詳細(xì)介紹
反應(yīng)機(jī)理:
5-Ethynyl uridine(5-乙炔基尿苷)是一種核苷類似物,常用于生物化學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究中,尤其是在研究RNA合成、細(xì)胞增殖和基因表達(dá)調(diào)控等方面。
結(jié)構(gòu):5-EU 是尿苷(Uridine)的衍生物,其5位上的羥基被乙炔基(-C≡CH)取代。
結(jié)構(gòu)式:
基礎(chǔ)知識概述:
69075-42-9,5-Ethynyl uridine
中文名:5-乙炔基尿苷
英文名:5-Ethynyl uridine
分子式:C11H12N2O6
分子量:268.22
規(guī)格標(biāo)準(zhǔn):1mg、5mg、10mg
試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司
相關(guān)應(yīng)用:
1.RNA合成的檢測:
5-EU 可以被細(xì)胞攝取,并摻入到新合成的RNA中。通過檢測5-EU的摻入,可以評估細(xì)胞的RNA合成活性。
常用于研究基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制,例如轉(zhuǎn)錄活性、RNA加工和穩(wěn)定性等。
2.細(xì)胞增殖的標(biāo)記:
由于RNA合成與細(xì)胞增殖密切相關(guān),5-EU 可以作為細(xì)胞增殖的標(biāo)記物。通過檢測5-EU的摻入,可以區(qū)分增殖細(xì)胞和非增殖細(xì)胞。
常用于細(xì)胞生物學(xué)研究,例如干細(xì)胞研究、腫瘤細(xì)胞增殖分析等。
3.熒光成像:
5-EU 本身不具有熒光,但可以通過點(diǎn)擊化學(xué)(Click Chemistry)反應(yīng)與熒光染料(如Alexa Fluor系列)結(jié)合,從而實(shí)現(xiàn)熒光成像。
例如,5-EU 可以與疊氮基團(tuán)(Azide)標(biāo)記的熒光染料發(fā)生CuAAC(銅催化的疊氮-炔基環(huán)加成)反應(yīng),生成穩(wěn)定的三唑環(huán)產(chǎn)物,從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)RNA的熒光標(biāo)記和成像。
使用方法:
1.細(xì)胞標(biāo)記:
將5-EU 添加到細(xì)胞培養(yǎng)基中,通常濃度范圍為100-500 µM,孵育時間根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求而定(通常為數(shù)小時到數(shù)天)。
細(xì)胞攝取5-EU 后,5-EU 會被摻入到新合成的RNA中。
2.點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng):
使用CuAAC反應(yīng)將5-EU 與熒光染料結(jié)合。反應(yīng)條件通常包括:
5-EU標(biāo)記的RNA
疊氮基團(tuán)標(biāo)記的熒光染料(如Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 594等)
銅催化劑(如CuSO?)
還原劑(如抗壞血酸鈉)
反應(yīng)完成后,通過熒光顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)RNA的分布。
注意事項:
純度標(biāo)準(zhǔn)95%+
保存建議:避免反復(fù)凍融,避光保存,儲液應(yīng)該立即使用,任何未用的溶液分裝小份冷凍于 < -20°C
注意事項:僅用于科學(xué)研究
相關(guān)試劑(部分):
Uridine diphosphate glucose
Uridine triacetate
Uridine triphosphate
Tri-O-acetyl uridine
Uridine-5'-diphosphoglucose pyrophosphorylase
Uridine triphosphate trisodium dihydrate
Uridine-5'-diphosphate disodium salt
Uridine-5-oxyacetic acid
Uridine-5-oxo-acetyl-(9-fluorenylmethyl) ester
N3-(Butyn-3-yl)uridine
Uridine adenosine tetraphosphate
5-(t-Butyloxycarbonylmethoxy)uridine
Uridine 5-oxyacetic acid methyl ester
Uridine 5'-O-thiodiphosphate
Uridine diphosphate glucuronic acid
69075-42-9,5-Ethynyl uridine