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干貨分享|病毒純化過程中,該如何正確使用全能核酸酶?

2023-8-18  閱讀(194)

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病毒疫苗的生產(chǎn)、細胞治療與基因治療等領(lǐng)域均可能會用到病毒,對其質(zhì)量進行控制對于保障上述產(chǎn)品的安全性和有效性具有及其重要意義。其中HCD殘留可能會傳遞腫瘤或病毒相關(guān)基因,造成潛在的危險性,因此,去除宿主核酸或在程度上降低其殘留刻不容緩。




逐典Pannarase全能核酸酶

逐典Pannarase全能核酸酶是一種來源于Serratia marcescens的非特異性核酸內(nèi)切酶,該酶可以將任何形式的 DNA 和 RNA  (線性、環(huán)形、超螺旋)降解成3-5bp的寡核苷酸,并可在一系列寬泛的操作條件下保持高效性。






接下來小編就帶您

一起了解

在病毒純化過程中

如何正確使用全能核酸酶


常見的病毒純化流程


全能核酸酶應用條件

全能核酸酶的酶活會受到多種因素的影響(例如溫度、pH、離子強度等),故用量范圍也會從0.1 U/mL-250 U/mL不等。因此,不同的操作環(huán)境下酶的最佳濃度不同,需要通過實驗設置梯度進行最佳條件的摸索。

以下是文獻中具體的應用實例:

1. 樣品:狂犬病毒濃縮液

處理條件:核酸酶濃度50~90U/ml ,

37 ℃處理 2 h,轉(zhuǎn)入18 ~ 26 ℃處理 6h




2. 樣品:狂犬病病毒濃縮液

處理條件:25、50和100 U/ml,37℃



3. 樣品:流感病毒濃縮液

處理條件:10 U/mL,37℃



參考文獻

[1] 崔燕平. 非限制性核酸內(nèi)切酶對狂犬病疫苗中Vero細胞DNA的去除作用[J]. 中國生物制品學雜志, v.27(04):444-447.

[2] 劉杰,劉輝,楊會強,康莊,孫艷,毛川成,何敏,李玉華.多種方法結(jié)合去除凍干人用狂犬病疫苗中Vero細胞殘留DNA[J].中國生物制品學雜志,2013,26(12):1827-1830.

[3] 阮朝列,施錦麗,李衛(wèi)東等.Benzonase核酸酶在Vero細胞流感病毒滅活疫苗中的應用研究[J].病毒學報,2023,39(04):980-990.




逐典Pannarase全能核酸酶E.coli中表達純化并在GMP條件下生產(chǎn),可高效去除各種樣品中的核酸雜質(zhì),助力解決廣大疫苗生產(chǎn)、基因和細胞治療廠商解決產(chǎn)品的核酸殘留問題;此外某些病毒生產(chǎn)中可能會涉及到高鹽的環(huán)境,逐典Pannarase耐高鹽全能核酸酶將成為您“疑難雜癥"的選擇!



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