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一，D-螢光素的作用原理
D-螢光素 (D-Luciferin) 是螢火蟲螢光素酶 (Firefly Luciferase) 的化學發(fā)光底物。在ATP 和螢光素酶存在下，螢光素能夠被氧化發(fā)光。當螢光素過量時，發(fā)光亮度與螢光素酶濃度呈正相關。通過螢光素/螢光素酶生物發(fā)光體系，可以非常靈敏、高效地檢測基因表達、腫瘤生長、藥物反應等。
二，游離態(tài)和鹽形式的 D-螢光素，怎么選？
目前市面上主要有 3 種 D-螢光素，D-螢光素游離酸 (HY-12591A)、鈉鹽 (HY-12591) 和鉀鹽 (HY-12591B)。D-螢光素鈉鹽、鉀鹽易溶于水，而游離酸形式難溶于水，需要適當?shù)膲A中和才能溶于水。配成溶液后，這 3 種形式的 D-螢光素生物活性相當。
三，外生物發(fā)光、體內活體成像的檢測怎么操作？
以 D-螢光素鉀鹽為例：
1、體外生物發(fā)光檢測 (In vitro bioluminescent assays)
1) 將細胞鋪在 24 孔黑孔板上，鋪板密度為 0.5-2.0×105 個細胞/孔，37℃，培養(yǎng)過夜。
2) 用超純水配制 15 mg/mL 的 D-螢光素儲存液 (100×)。
注：D-螢光素溶液最好現(xiàn)用現(xiàn)配，也可分裝后-20℃ 避光凍存，有效期 1 個月。
3) 用預熱好的細胞培養(yǎng)基 1: 100 稀釋儲存液，配制終濃度 150 μg/mL 的 D-螢光素工作液 (1×)。
4) 去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基直至無殘留。
5) 向細胞內添加 1×D-螢光素工作液后，立即進行圖像分析。
2、小鼠活體成像分析 (In vivo analysis in mice)
1) 用無菌的 DPBS (no Mg2+、Ca2+) 配制 15 mg/mL 的 D-螢光素溶液，0.2 μm 濾膜過濾除菌。
注：D-螢光素溶液最好現(xiàn)用現(xiàn)配，也可分裝后 -20℃ 避光凍存，有效期 1 個月。
2) 按 150 mg/kg 劑量和 10 μL/g 注射體積向每支小鼠注射相應量的 15 mg/mL D-螢光素溶液。
3) 腹腔或靜脈注射 5-15 min 后進行活體成像分析。
四，逐典D-螢光素鉀鹽優(yōu)勢
1.高純度（HPLC驗證純度≥99%)
2.優(yōu)異的生物發(fā)光性能
3.高溶解度（>40mg/ml)
五，客戶之聲
