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70次大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒的實驗原理
BS-3017 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒
基于?雙抗體夾心法?,其核心流程與VEGF家族其他成員(如VEGF-A)的檢測方法類似,具體步驟如下:
實驗原理詳解
抗體包被?
微孔板預先包被抗VEGF-B的特異性捕獲抗體,形成固相抗體層,用于結(jié)合樣本中的目標抗原?。
抗原-抗體結(jié)合?
樣本(如血清、組織勻漿)與標準品加入孔中,VEGF-B與捕獲抗體結(jié)合,形成“固相抗體-抗原"復合物?。
酶標抗體反應?
加入生物素標記的檢測抗體(或HRP標記的二抗),與抗原的另一表位結(jié)合,形成“捕獲抗體-抗原-酶標抗體"夾心結(jié)構(gòu)?。
顯色與定量?
加入TMB底物后,酶催化反應產(chǎn)生藍色產(chǎn)物,終止后變?yōu)辄S色。通過酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值),其強度與VEGF-B濃度呈正相關(guān)?。
關(guān)鍵特點
特異性?:雙抗體設計確保對VEGF-B的高特異性,避免與其他VEGF家族成員交叉反應?。
靈敏度?:檢測范圍通常為31.2–2000pg/mL,適用于低濃度樣本分析?。
樣本兼容性?:支持血清、血漿等樣本類型,需注意抗凝劑選擇(如EDTA)以避免干擾?。
注意事項
實驗需嚴格控制孵育時間(通常37℃ 60分鐘)和洗滌次數(shù),以減少背景信號?。
顯色反應需避光操作,終止后30分鐘內(nèi)完成檢測以保證數(shù)據(jù)穩(wěn)定性?。
如需進一步了解VEGF-B的生物學功能或?qū)嶒瀮?yōu)化細節(jié),可參考相關(guān)文獻或試劑盒說明書?。
注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產(chǎn)品說明請咨詢技術(shù)老師或品牌供應商。
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