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59次大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(FGFR1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書
BS-8510 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(FGFR1)ELISA試劑盒
有效期:6個(gè)月(4℃避光保存)
一、試劑盒組成
預(yù)包被酶標(biāo)板:96孔/48孔,包被抗大鼠FGFR1單抗。
標(biāo)準(zhǔn)品:6個(gè)濃度梯度(0-1000 pg/mL),凍干粉需復(fù)溶。
生物素化檢測(cè)抗體:HRP標(biāo)記,30倍濃縮液(0.4 mL)。
顯色系統(tǒng):TMB底物液(15 mL)、終止液(2M H?SO?,15 mL)。
輔助試劑:洗滌緩沖液(30×濃縮液)、樣本稀釋液(含1% BSA)。
二、實(shí)驗(yàn)流程
樣本準(zhǔn)備
血清/血漿:采集后3000×g離心10分鐘,避免溶血。
組織勻漿:按1:9(w/v)加入PBS勻漿,離心取上清。
細(xì)胞上清:直接檢測(cè)或離心去除碎片。
保存:短期4℃(≤48小時(shí)),長(zhǎng)期-80℃(避免反復(fù)凍融)。
檢測(cè)步驟
加樣:標(biāo)準(zhǔn)品/樣本各100μL/孔,37℃孵育90分鐘。
洗滌:洗滌緩沖液(1:20稀釋)洗板3次,拍干。
加抗體:生物素化抗體100μL/孔,37℃孵育60分鐘。
顯色:TMB底物液100μL/孔,避光反應(yīng)15分鐘,終止液50μL/孔。
讀數(shù):450nm波長(zhǎng)測(cè)OD值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度。
三、注意事項(xiàng)
交叉反應(yīng):本試劑盒特異性針對(duì)大鼠FGFR1,與人源FGFR1交叉反應(yīng)率<5%。
靈敏度:檢測(cè)下限為15 pg/mL,線性范圍50-1000 pg/mL。
干擾因素:避免高脂或溶血樣本,建議稀釋后復(fù)測(cè)。
質(zhì)量控制:每板需設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔,CV值應(yīng)<10%。
四、數(shù)據(jù)示例
標(biāo)準(zhǔn)品濃度 (pg/mL)OD450均值
00.05
500.32
1000.67
擬合曲線:建議采用四參數(shù)邏輯回歸(4PL)模型。
五、技術(shù)支持
問(wèn)題排查:若OD值異常,檢查洗滌步驟或底物避光性。
定制服務(wù):可提供大鼠FGFR1重組蛋白(15kDa)作為陽(yáng)性對(duì)照
注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒
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