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37次大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA檢測試劑盒技術(shù)說明書
BS-2901大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒
一、產(chǎn)品概述
本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)技術(shù),專用于體外定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿等樣本中第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)的濃度。其核心原理為:預(yù)包被抗體的微孔板捕獲樣本中的FⅧAg,再通過酶標(biāo)記抗體形成復(fù)合物,經(jīng)底物顯色后,通過酶標(biāo)儀測定吸光度(OD值),濃度與顯色強(qiáng)度呈正相關(guān)?。該技術(shù)具有高靈敏度(檢測限低至0.008 IU/mL)和特異性,適用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床診斷?。
二、試劑盒組成
預(yù)包被微孔板?:96孔格式,含固定化捕獲抗體?。
校準(zhǔn)品?:標(biāo)準(zhǔn)濃度梯度(如80、40、20、10、5、2.5 U/L),用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
對照品?:陰性對照和陽性對照血漿,驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)有效性?。
酶標(biāo)記物?:辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體?。
底物溶液?:TMB顯色液,反應(yīng)后呈藍(lán)色,終止后轉(zhuǎn)黃色?。
終止液?:硫酸溶液,終止酶促反應(yīng)。
樣本稀釋液?:用于樣本預(yù)處理,避免高濃度樣本超出檢測范圍。
洗滌緩沖液?:濃縮液,需按比例稀釋使用?。
三、樣本處理與保存
血清/血漿?:離心分離(3000×g,10分鐘),避免溶血或脂血;EDTA、肝素或檸檬酸鹽抗凝血漿均可使用。
組織勻漿?:生理鹽水勻漿后離心取上清。
保存條件?:短期(2-8℃)或長期(-70℃)保存,避免反復(fù)凍融;室溫解凍后充分混勻。
四、操作步驟
準(zhǔn)備試劑?:室溫平衡試劑20分鐘,洗滌緩沖液稀釋后使用?。
加樣?:每孔加入50μL樣本或校準(zhǔn)品,37℃孵育1小時(shí)。
洗滌?:棄液后,洗滌緩沖液清洗3次,每次3分鐘?。
加酶標(biāo)記物?:加入HRP標(biāo)記抗體,37℃孵育1小時(shí)?。
再次洗滌?:重復(fù)洗滌步驟?。
顯色?:加入TMB底物,37℃避光孵育10-30分鐘。
終止反應(yīng)?:加入終止液,溶液由藍(lán)轉(zhuǎn)黃?。
檢測?:酶標(biāo)儀450nm波長測定OD值,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度。
五、注意事項(xiàng)
操作規(guī)范?:嚴(yán)格遵循孵育時(shí)間和溫度,避免交叉污染?。
樣本要求?:避免溶血或高脂樣本,稀釋后檢測超出范圍的樣本。
試劑保存?:2-8℃避光保存,有效期6個(gè)月;濃縮洗滌液需溶解后使用?。
儀器校準(zhǔn)?:使用高精度加樣器(0.5-1000μL)和450nm酶標(biāo)儀。
安全提示?:僅限科研用途,操作時(shí)佩戴防護(hù)裝備?。
六、性能驗(yàn)證
靈敏度?:檢測限低至0.008 IU/mL,可準(zhǔn)確識別低濃度樣本?。
精密度?:板內(nèi)變異系數(shù)<10%,板間變異系數(shù)<15%,確保結(jié)果重現(xiàn)性?。
線性范圍?:標(biāo)準(zhǔn)曲線覆蓋2.5-80 U/L,樣本稀釋后仍保持線性。
特異性?:與結(jié)構(gòu)類似物無交叉反應(yīng),避免假陽性?。
七、應(yīng)用范圍
本試劑盒適用于大鼠FⅧAg的定量分析,支持疾病機(jī)制研究、藥物開發(fā)等科研場景,提供穩(wěn)定可靠的檢測數(shù)據(jù)。
注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒
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