如何選擇微量紫外-可見光測量是否適合您的樣品呢？

在微量和比色皿模式之間進(jìn)行選擇取決于幾個(gè)因素：

• 樣品類型：是 DNA 樣品、蛋白質(zhì)還是其他材料？

• 樣品溶劑：使用的溶劑是什么（例如水、有機(jī)溶劑）？

• 樣品濃度：是預(yù)期濃度高，還是樣品接近檢測限？

• 可用體積：有多少樣品可用于分析？

何時(shí)使用微量

微量紫外-可見光測量已成為核酸定量和蛋白質(zhì)分析的標(biāo)準(zhǔn)，特別是在處理小體積和高濃度時(shí)。常見的工作流程，如離心柱迷你制備，產(chǎn)生的 DNA 濃度在微量分光光度計(jì)的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)（例如，DS 系列儀器上的 dsDNA 為 0.75 ng/μL 至 37,500 ng/μL）。

主要優(yōu)點(diǎn)：

• 樣品保存：僅需要 1 μL，其余部分保留用于下游應(yīng)用。

• 無需稀釋：消除連續(xù)稀釋和移液不一致造成的錯(cuò)誤。

• 自動(dòng)路徑長度選擇：SmartPath™ 等技術(shù)會(huì)自動(dòng)優(yōu)化路徑長度。

• 簡單清理：快速擦拭即可去除樣品，降低污染風(fēng)險(xiǎn)。

微量模式特別有利于測量水基溶液，這些溶液由于表面張力而保持完整性并緩慢蒸發(fā)，支持準(zhǔn)確定量。

如果您的樣品量有限或您正在進(jìn)行常規(guī) DNA 定量，微量紫外可見光通常被選。

什么時(shí)候應(yīng)該使用比色皿？

雖然微量測量已成為許多樣品類型的常規(guī)，但傳統(tǒng)的比色皿仍然可用于某些測定。

• 揮發(fā)性溶劑中的樣品：比色皿是一個(gè)大部分封閉的容器，可以減緩有機(jī)溶劑的蒸發(fā)，有助于保持樣品體積并在測量揮發(fā)性樣品時(shí)提高準(zhǔn)確性。

• 微生物樣品的 OD600 測量：用戶可以利用比色皿較長的 10 毫米光程來執(zhí)行精確的光散射測量，例如細(xì)菌或酵母樣品的 OD600 評估。

• 動(dòng)力學(xué)測定：當(dāng)您需要監(jiān)測吸光度隨時(shí)間的變化時(shí)，例如酶反應(yīng)，比色皿的較大體積和受控環(huán)境可以實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定、連續(xù)的測量。

為什么使用微量模式進(jìn)行樣品測量？

改用微體積紫外-可見光測量的好處很多：

• 樣品保存：僅使用 1 uL 樣品進(jìn)行質(zhì)量控制測量，可保留更多的樣品量以進(jìn)行額外的 QC 評估，并使更多的樣品可用于終點(diǎn)分析。

• 消除樣品稀釋：在引入微量紫外-可見光測量之前，用戶通常會(huì)對樣品濃度做出有根據(jù)的猜測，或者可能會(huì)準(zhǔn)備一些樣品稀釋液以確保吸光度落在固定光程的線性范圍內(nèi)。如果樣品對于比色皿光程來說濃度過高，用戶將獲得不準(zhǔn)確的吸光度測量結(jié)果。無需樣品稀釋還可以減少因移液不正確的體積或未在連續(xù)稀釋的樣品中分配整個(gè)體積而產(chǎn)生的額外錯(cuò)誤。

• 多種光程可優(yōu)化任何樣品：DS 系列分光光度計(jì)等儀器上的微量模式使用 SmartPath™ 技術(shù)。這會(huì)自動(dòng)為每次測量選擇正確的光程，使其能夠處理廣泛的濃度（例如，dsDNA 為 0.75 ng/μL 至 37,500 ng/μL）。

• 易于清理：微量測量后取出樣品很簡單——只需用干凈、干燥的實(shí)驗(yàn)室濕巾擦拭即可。比色皿的清潔更耗時(shí)，需要清洗和干燥以避免污染。一次性比色皿避免了這種情況，但會(huì)帶來財(cái)務(wù)和環(huán)境成本。