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導電組織生物打印方案
閱讀：166 發(fā)布時間：2024-2-4
概述
3D石墨烯（3DG）是一種生物相容性導電材料，用于打印電刺激組織，如心臟、骨骼肌和神經(jīng)，以及生物相容性電路。3DG在室溫下打印，打印后可以接種細胞。按照以下分步過程進行導電組織生物打印。
下面用戶說明中提供的推薦制劑可產(chǎn)生一種簡化的可打印生物材料，可創(chuàng)建可重復的 3D 打印結(jié)構(gòu)。但是，用戶可以根據(jù)自己的需要修改準備工作。
材料
3 mL Dimension Inx 3D-石墨烯
生物墨水混合器
5 mL 注射器
14G金屬拉絲針
27G打印針
砂紙印刷面
培養(yǎng)皿
間充質(zhì)干細胞或其他選擇的細胞系
間充質(zhì)干細胞生長培養(yǎng)基
方法
印刷：
將小瓶從 4°C 中取出，使其達到室溫;
當材料從冰箱中取出時，它看起來會變硬，所以在處理之前等待它看起來很流暢;
用生物墨水混合器劇烈渦旋材料，直至均勻;
注意：如果材料溶劑似乎大部分與粉末分離，您可以用膠帶將小瓶固定在渦旋混合器上，并保持至少一小時。長時間混合小瓶將獲得更好的打印體驗。
使用 14G 針頭刺穿樣品瓶蓋并繪制打印量 （3 mL），不要將樣品瓶倒置以防止材料損失。3D-石墨烯具有高粘性，因此加載可能需要幾分鐘。我們建議您僅將此樣品瓶用于一次打印會話。如果您將其用于更多會話，請確保將其適當密封。建議將刺破的蓋子換成實心蓋子，以便更好地進一步存放;
拉拔材料后，取下注射器柱塞和拉絲針;
從柱塞上取下塞子并將其放入注射器中;
將塞子放回注射器中，用柱塞推動它，直到它接觸并均勻分布在注射器中的拉出材料。確保在用柱塞推動塞子時，它們不會重新連接;
放置 27G 打印針并裝入您的 Allevi！
將粘合劑打印表面放在培養(yǎng)皿上。
印后：
在處理之前，讓您的打印結(jié)構(gòu)在通風櫥中靜置至少 2 小時。請注意，打印件在洗滌前可以無限期地存放在密封的玻璃容器中;
將打印的結(jié)構(gòu)浸入 70% 乙醇中至少 1 小時。建議輕柔攪拌。更換乙醇，讓您的物體再浸入水中一個小時;
用PBS（用于生物應(yīng)用的無菌PBS）代替乙醇，并立即使用。如果您想存儲此對象，請將其冷凍在 -20 ?C、– 40 ?C 或 -80 ?C;
如果您沒有使用我們的盤子并且您的結(jié)構(gòu)與您的表面融合，請小心地使用剃須刀片將其取下。如果您確實使用過我們的盤子，只需戴上手套取下您的結(jié)構(gòu)即可;
如果您愿意，您可以用剪刀、手術(shù)刀、活檢打孔機等切割您的指紋。
細胞接種：
從打印的結(jié)構(gòu)中吸出多余的液體，但不要讓它干燥。細胞接種時應(yīng)略微濕潤;
10-15 μL 應(yīng)接種在直徑 5 mm、厚 1 mm 的印刷構(gòu)建體中;
對于此應(yīng)用，建議以 5 x 10 的密度接種間充質(zhì)干細胞6細胞/mL。
凝膠也可以注射到生物打印和洗滌的物體中。
打印設(shè)置
| 速度 （mm/s） | 層高 （mm） | 噴嘴直徑 （mm） | 軌距 | 壓力 （psi） | 打印溫度 （°C） |
|---|---|---|---|---|---|
| 16 | 0.2 | 0.2 | 27 | 10-20 | 室溫 |
應(yīng)用
骨組織：天然骨骼封裝在神經(jīng)和肌肉組織中，因此將 3DG 與 HB 一起打印可能會產(chǎn)生多組織單元。
心臟、神經(jīng)和骨骼肌組織：3DG 非常適合需要導電的組織。由于其導電性，3DG可以傳輸對心臟、神經(jīng)和骨骼肌功能至關(guān)重要的電信號。
生物相容性和柔性電路：隨心所欲地打印電路，用細胞接種它們并運行電流進行刺激。
警告
請勿將液體形式的 3DG 存放在塑料容器中數(shù)小時，否則會變干。打印前盡量限制所有空氣暴露，以確保佳打印體驗;
使用比提供的針頭規(guī)格更高（噴嘴直徑更?。┑尼橆^進行打印可能會導致間歇性堵塞;
不要讓液態(tài)3DG與黑色金屬長時間接觸，它會腐蝕它們。也不要讓它與聚酯或聚苯乙烯接觸，它會與它們?nèi)诤稀?/p>
不要讓 3DG 達到 70 ?C 以上的溫度，否則會熔化。
不要試圖用熱、蒸汽、環(huán)氧乙烷或過氧化氫對打印結(jié)構(gòu)進行滅菌。該材料含有二氯甲烷、2-丁氧基乙醇和鄰苯二甲酸二丁酯。
僅用于研究目的。不供人類或臨床使用。
