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MLCB寒天培地培養(yǎng)基的試驗(yàn) 原理、試驗(yàn)方法及結(jié)果
閱讀:1008 發(fā)布時(shí)間:2024-5-30一、試驗(yàn)原理:
本產(chǎn)品用于沙門(mén)氏菌的分離培養(yǎng)。
酵母浸粉、蛋白胨和牛心浸粉提供微生物生長(zhǎng)所需的碳源和氮源;氯化鈉用于維持均衡的滲透壓,甘露醇作為可發(fā)酵的糖類(lèi)被沙門(mén)氏菌利用產(chǎn)酸;沙門(mén)氏菌產(chǎn)生的脫羧酶與L-賴氨酸鹽酸鹽反應(yīng)生成堿性物質(zhì);在堿性條件下,硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨與沙門(mén)氏菌產(chǎn)生的硫化氫反應(yīng)使得菌落的顏色呈現(xiàn)黑色;煌綠和結(jié)晶紫可抑制大腸桿菌等革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng);瓊脂起凝固的作用。
二、培養(yǎng)基配方(g/L):
表1 MLCB寒天培地培養(yǎng)基配方
| 成分 | 添加量 | 
| 酵母浸粉 | 5.0 | 
| 蛋白胨 | 10.0 | 
| 牛心浸粉 | 2.0 | 
| 氯化鈉 | 4.0 | 
| 甘露醇 | 3.0 | 
| L-賴氨酸鹽酸鹽 | 5.0 | 
| 硫代硫酸鈉 | 4.0 | 
| 檸檬酸鐵銨 | 1.0 | 
| 煌綠 | 0.0125 | 
| 結(jié)晶紫 | 0.01 | 
| 瓊脂 | 15.0 | 
| pH值6.8±0.2 | 25℃ | 
三、試驗(yàn)方法:
1.稱取本品49.0g,加熱煮沸溶解于1000mL蒸餾水(可根據(jù)培養(yǎng)需要擴(kuò)大或縮小產(chǎn)品用量)中,冷至50-55℃時(shí),傾入無(wú)菌平皿,備用;
2.質(zhì)控菌液按國(guó)標(biāo)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備而成;
3.用接種環(huán)取一環(huán)相應(yīng)菌液劃線接種于無(wú)菌培養(yǎng)基上,36±1℃需氧培養(yǎng)18-24h。
四、試驗(yàn)結(jié)果判斷:
  1.外觀
  此干燥培養(yǎng)基粉末均勻,呈淡黃色,煮沸滅菌后制備好的培養(yǎng)基為藍(lán)紫色透明固態(tài)。
2.生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
接種以下質(zhì)控菌株,放入培養(yǎng)箱中,于36±1℃需氧培養(yǎng)18-24 h,觀察試驗(yàn)結(jié)果。
表2 MLCB寒天培地培養(yǎng)基不同菌株質(zhì)量控制結(jié)果
| 質(zhì)控菌株 | 菌株編號(hào) | 接種量(CFU) | 質(zhì)控情況 | 菌落特征 | 
| 腸炎沙門(mén)氏菌 | CMCC(B) 50746 | / | +++ | 黑色中心菌落 | 
| 鼠傷寒沙門(mén)氏菌 | ATCC 14028 | / | +++ | 黑色中心菌落 | 
| 大腸埃希氏菌 | ATCC 25922 | / | - | 抑制 | 
| 金黃色葡萄球菌 | ATCC 25923 | / | - | 抑制 | 

圖1 MLCB寒天培地培養(yǎng)基微生物質(zhì)控結(jié)果
注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。
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