操作RMC PowerTome 3D切片機(jī)的流程與要點(diǎn)

掌握正確的操作流程是使用RMC PowerTome 3D超薄切片機(jī)獲得高質(zhì)量切片、延長設(shè)備壽命并確保安全的關(guān)鍵。以下是一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化的操作指南和要點(diǎn)說明。

準(zhǔn)備工作：

1. 樣品準(zhǔn)備： 確保樣品已經(jīng)過固定、脫水、滲透并牢固包埋在合適的樹脂中。樣品塊頂端應(yīng)修整成規(guī)整的梯形或矩形，表面平整。

2. 設(shè)備檢查： 開機(jī)前，檢查儀器是否清潔，運(yùn)動部件是否順暢。確認(rèn)電源連接穩(wěn)定。

3. 安裝刀片： 穩(wěn)妥地安裝玻璃刀或鉆石刀于刀臺上。調(diào)整刀角（knife angle）至推薦值，通常對于鉆石刀約為4-6°。

4. 安裝樣品： 將修整好的樣品塊牢固地安裝于樣品夾中，確保夾緊無松動。

對刀與修塊：

1. 粗調(diào)對刀： 使用手輪手動控制樣品臂移動，在顯微鏡或放大鏡輔助下，將樣品塊表面緩慢靠近刀口，直到兩者幾乎處于同一焦點(diǎn)平面，留有微小間隙。

2. 精細(xì)修塊（Trimming）： 設(shè)置一個(gè)較厚的切片厚度（如1-2 μm）和較慢的速度，進(jìn)行數(shù)次切片，以修整掉樣品塊表面可能殘留的修整痕跡，獲得一個(gè)新鮮、平整的切面。

切片參數(shù)設(shè)置：

1. 設(shè)置厚度： 根據(jù)應(yīng)用需求設(shè)定目標(biāo)切片厚度（如對于半薄切片設(shè)為1.5 μm，對于超薄切片設(shè)為70 nm）。

2. 設(shè)置速度： 依據(jù)樣品硬度選擇切片速度。較硬或脆的樣品宜用較慢速度。

3. 設(shè)置回縮： 設(shè)定一個(gè)適當(dāng)?shù)幕乜s距離（如1-2 μm），以避免返回行程中樣品刮擦刀片或切片。

自動切片與收集：

1. 開始切片： 啟動自動切片循環(huán)。設(shè)備將按設(shè)定參數(shù)進(jìn)行連續(xù)切片。

2. 收集切片： 對于半薄切片，可用細(xì)鑷子或毛刷將其從刀口水槽中轉(zhuǎn)移至載玻片上。對于超薄切片，則需使用銅網(wǎng)或鎳網(wǎng)在水槽液面上進(jìn)行撈取。

使用后維護(hù)：

1. 清潔： 切片結(jié)束后，及時(shí)用棉簽和去離子水清潔刀口和水槽。若使用鉆石刀，需按照制造商指南進(jìn)行仔細(xì)清潔和存放。

2. 復(fù)位： 將樣品臂和進(jìn)給機(jī)構(gòu)復(fù)位至安全位置。

3. 關(guān)機(jī)： 關(guān)閉電源，并蓋上防塵罩。

操作要點(diǎn)：

• 始終注意操作安全，避免手部直接靠近鋒利的刀口。

• 保持耐心和細(xì)致，對刀和修塊是成功切片的基礎(chǔ)。

• 根據(jù)樣品情況靈活調(diào)整參數(shù)，不同的樣品可能需要不同的最佳設(shè)置。

• 保持工作環(huán)境的清潔、無振動，避免氣流直吹設(shè)備。