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PriCells: 正常人食管黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)

時(shí)間:2021-9-27 閱讀:285
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PriCells: 正常人食管黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)
 
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 一般采用活檢時(shí)獲得的正常食管黏膜組織
2. 不含Ca2+和Mg2+的1×HBSS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和1.5g/L慶大霉素,pH7.4
3. 手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷
4. 離心管(15ml、50ml)
 
實(shí)驗(yàn)方法:
1. 食管黏膜組織放入HBSS中,在解剖顯微鏡下分離黏膜與黏膜下組織,用HBSS沖洗2-3次,將黏膜剪成約1mm3大小的組織塊。
2. 1塊/cm2的密度將植塊放入培養(yǎng)皿中,上皮面朝下;也可在培養(yǎng)皿內(nèi)放入蓋玻片,將組織塊放在蓋玻片上培養(yǎng)。
3. 當(dāng)組織塊貼壁后,加入適量培養(yǎng)液,培養(yǎng)液的量為能濕潤(rùn)組織塊但不使組織塊浮起為宜,在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)。
4. 組織塊貼壁1-3d后,補(bǔ)充培養(yǎng)液。以后每隔2-3d換液1次。
5. 植塊培養(yǎng)3d后,細(xì)胞從植塊邊緣遷出。1周后,細(xì)胞向外遷移擴(kuò)展,并逐漸分化,細(xì)胞的形態(tài)逐漸趨向正常食管黏膜上皮細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征??拷矇K的細(xì)胞體積小,類似基底細(xì)胞。外側(cè)的細(xì)胞扁平,為分化的上皮細(xì)胞。2周后,細(xì)胞開始出現(xiàn)凋亡形態(tài)。3周后,近側(cè)細(xì)胞減少,甚至消失。剩余的大部分細(xì)胞呈分化狀態(tài)。
 
PriCells提供:
1. 各種原代細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基;
2. 各種原代細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑;
3. 原代細(xì)胞分離試劑盒;
4. 原代細(xì)胞鑒定試劑盒;
5. 各種原代細(xì)胞DNA;
6. 各種原代細(xì)胞RNA;
7. 各種原代細(xì)胞蛋白質(zhì);


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