5
當(dāng)前位置：武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司>>技術(shù)文章>>PriCells: 密度梯度分離法分離單個核細(xì)胞（MNCs）
PriCells: 密度梯度分離法分離單個核細(xì)胞（MNCs）
PriCells: 密度梯度分離法分離單個核細(xì)胞（MNCs）
試劑和材料：
1. 合適的培養(yǎng)基或冷凍液；
2. PBSA；
3. Ficoll-Hypague；
4. 巴氏吸管；
5. 50ml離心管；
實驗方法：
1. 將臍血樣品用PBSA按1：1比例稀釋；
2. 將15ml Ficoll-Hypague吸入50ml離心管；
3. 將30mlPBSA稀釋的臍血樣品緩慢地加到Ficoll-Hypague上；
4. 室溫450g離心20-30min；
5. 離心后，在Ficoll-Hypague液面上明細(xì)可見一層細(xì)胞，是密度低于Ficoll-Hypague液的單個核細(xì)胞層；
6. 用巴氏吸管，將單個核細(xì)胞層吸出，轉(zhuǎn)移到另一離心管中；
7. 用PBSA洗細(xì)胞，室溫200g離心10min；
8. 倒掉上清，用PBSA重懸細(xì)胞，洗細(xì)胞，重復(fù)上述步驟7；
9. 最后，用合適的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞（冰凍液或培養(yǎng)基）；