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世聯(lián)博研提供CCK8檢測實驗服務

時間:2024/7/8閱讀:167
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一、實驗介紹

Cell Counting Kit-8(簡稱CCK-8)試劑可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。其基本原理為:該試劑中含有WST-8【化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓(1-Methoxy PMS)的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物(Formazan dye)。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。


二、實驗目的

  1.藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養(yǎng)的細胞毒性的測定;

  2.細胞增殖及細胞活性測定。

三、實驗步驟

image.png

四、送樣運輸要求

 

1 凍存細胞

凍存管寄送前,使用封口膜把凍存管口封嚴密,凍存管單獨用自封袋存放。干冰運輸。運輸時間在2天以內干冰用量在10kg,在2-4天,干冰用量在20kg。

2 活細胞

  1. 使用T25瓶,瓶蓋無孔。

  2. 生長狀態(tài)良好的細胞,細胞密度在30%-40%為宜,寄送前,移去瓶內舊培養(yǎng)基,添加新培養(yǎng)基至瓶頸部,保留微量空氣,擰緊瓶蓋,并用封口膜密封,瓶身用75%表面消毒,把瓶用無菌袋或自封袋包裝,然后放置在適當?shù)暮袃?,盒周圍用棉花等做防震防壓處理。當溫度低?0度是要加保溫措施,如暖寶寶等。

  3. 細胞培養(yǎng)條件備注完整,如培養(yǎng)基,培養(yǎng)溫度,F(xiàn)BS用量等。

  4. 備注:運送時間原則在4天以內,如細胞生長速度快,則加入的培養(yǎng)基血清可以減半,細胞密度在20%-30%。



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