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色譜柱的分離柱效好壞由什么決定?
決定相鄰組分分離好壞的主要因素有:*,兩個(gè)組分的保留值之差,也就是色譜柱內(nèi)遷移速率的差異;它取決于各組分與固定相、流動(dòng)相的相互作用的差異。第二,組分的峰寬反映組分區(qū)帶在移動(dòng)過(guò)程中的擴(kuò)張程度,很大程度上取決于色譜的分離條件。
在考慮液相色譜色譜柱的分離柱效時(shí),需要特別注意以下幾個(gè)問(wèn)題。
*,決定組分保留值的分配系數(shù)。分配系數(shù)K=溶質(zhì)在固定相中的濃度/溶質(zhì)在流動(dòng)相中的濃度。K值小的組分在固定相中濃度小,所以容易隨流動(dòng)相運(yùn)動(dòng)而較早出峰,反則反之。
第二,決定組分保留值的分配比(容量因子)。容量因子=組分在固定相中的量/組分在流動(dòng)相中的量。
第三,選擇性因子α。即后出峰的組分的調(diào)整保留時(shí)間與先出峰的組分的調(diào)整保留時(shí)間的比值。
因?yàn)榻M分在色譜柱內(nèi)移動(dòng)時(shí),會(huì)逐步產(chǎn)生擴(kuò)散,不利于分離,影響色譜柱的分離效率,所以塔板數(shù)高者好。使用過(guò)程中,當(dāng)塔板數(shù)降到一定程度時(shí)該柱就報(bào)廢了。