什么是單克隆抗體？單抗制備技術(shù)和原理 -賽默飛

什么是單克隆抗體？

單克隆抗體是通過將抗原注入到宿主動物體內(nèi)啟動機體免疫應(yīng)答而產(chǎn)生的。因而制作單克隆抗體的大多數(shù)操作都是在體外將來自這些宿主的脾細胞與培養(yǎng)的惡性骨髓瘤細胞進行融合。將細胞克隆分離出來，融合步驟中存活下來的細胞稱為雜交瘤。雜交瘤因骨髓瘤特性而可以永生，且容易在培養(yǎng)物中繁殖。

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單克隆抗體的特點

一些雜交瘤克隆因帶有B細胞特性而繼續(xù)合成并分泌針對單表位的遺傳學(xué)同源性抗體，稱為單克隆抗體。單克隆抗體與免疫動物自身的天然免疫球蛋白同源，但單克隆抗體與血清純化的多克隆抗體不同，單克隆抗體對單表位具有特異性，并且因由雜交瘤體外產(chǎn)生而可長期穩(wěn)定供應(yīng)。

單克隆抗體源自雜交瘤細胞。它們的生產(chǎn)包括接種動物（是小鼠），分離其脾細胞，然后同親本細胞融合。所得雜交瘤細胞經(jīng)過表征后篩選克隆用于抗體生產(chǎn)。

優(yōu)勢：

· 因為是雜交瘤細胞庫生產(chǎn)出來的所以批次間一致

· 單表位結(jié)合

注意事項：

· 隨著時間推移單克隆抗體會呈現(xiàn)細胞漂移

· 無多表位結(jié)合

· 需要考慮單克隆抗體的同型特異性

鼠單克隆抗體

我們提供的兔單克隆抗體其可用于多種應(yīng)用，包括熒光免疫分析、免疫組織化學(xué)技術(shù)、流式細胞分析、免疫印跡和 ELISA。與單克隆抗體一樣，鼠單克隆抗體只檢測抗原的一個表位，因此特異性更高，高效與抗原結(jié)合，且實驗重復(fù)性較多克隆抗體更穩(wěn)定。

兔單克隆抗體

兔單克隆抗體源自雜交瘤細胞。它們的生產(chǎn)包括免疫原接種兔，分離其脾細胞，然后骨髓瘤細胞融合。所得雜交瘤細胞經(jīng)過表征后篩選好的克隆用于抗體生產(chǎn)。

優(yōu)勢：

· 使用兔全部天然抗體庫帶來的高特異性

· 單表位結(jié)合

· 兔中的單個同種型

注意事項：

· 隨著時間推移，兔雜交瘤比小鼠雜交瘤更快呈現(xiàn)細胞漂移

· 無多表位結(jié)合

單克隆抗體和多克隆抗體之間的主要區(qū)別為何？

單克隆抗體 (mAb) 和多克隆抗體 (pAb) 在其來源、特異性和應(yīng)用方面基本不同。來自單細胞克隆的 mAb 通過與靶抗原上的 抗原決定簇結(jié)合而表現(xiàn)出出色的特異性，且其結(jié)構(gòu)一致。相比之下，pb 由 B 細胞的多個克隆產(chǎn)生，可提供更廣泛的抗原決定簇識別范圍，從而實現(xiàn)結(jié)構(gòu)多樣性。

mAb 的生產(chǎn)通常更耗時且成本高昂，從而適合于精準的應(yīng)用，如診斷和靶向治療。另一方面，pAb 的生產(chǎn)速度更快且經(jīng)濟合算，能夠在各種研究應(yīng)用中發(fā)揮其多功能性。選擇單克隆或多克隆抗體取決于實驗或應(yīng)用的特定要求，并需對靶向精度、成本和所需抗原決定簇識別的廣度等因素進行考慮。

單克隆抗體與多克隆抗體的區(qū)別：關(guān)鍵差異

單克隆抗體：

· 源自 B 細胞的單克隆

· 可與單抗原決定簇結(jié)合—高度特異性

· 由于復(fù)雜的生產(chǎn)工藝，需較高的生產(chǎn)時間和較多的成本

· 常用于精準的研究應(yīng)用，如診斷測定（ELISA與蛋蛋白質(zhì)免疫印跡等）和治療（例如靶向癌癥治療）

多克隆抗體：

· 源自 B 細胞的多個克隆

· 識別多個抗原決定簇—更廣泛的特異性

· 通用廣泛用于各種研究應(yīng)用

· 更快且更經(jīng)濟高效地生產(chǎn)產(chǎn)品

· 常用于需要廣泛特異性的研究應(yīng)用，如免疫組織化學(xué)技術(shù) (IHC)、免疫熒光 (IF)、蛋白質(zhì)免疫印跡與早期診斷檢測

單克隆一抗抗體

單克隆抗體是通過將抗原注入到宿主動物體內(nèi)促動的機體免疫應(yīng)答而產(chǎn)生的。應(yīng)答后，可以對相關(guān)的 B 細胞進行篩選，選出所需的特異性抗體。宿主的這些細胞在體外與培養(yǎng)的惡性骨髓瘤細胞合并，產(chǎn)生雜交瘤。這些雜交瘤因骨髓瘤特征而可復(fù)制，并且可以輕松培養(yǎng)。一些雜交瘤克隆體在保持 B 細胞特性下，持續(xù)生產(chǎn)針對單抗原決定簇的基因均相抗體，稱為單克隆抗體。這些抗體與免疫動物的天然免疫球蛋白非常相似，但不同于源自血清的多克隆抗體，因為這些抗體針對單個抗原決定簇具特異性，從而可確保穩(wěn)定且長期的供應(yīng)。

用于單克隆一抗的宿主

考慮單克隆抗體的宿主物種對免疫原性、交叉反應(yīng)性、人源化的易程度與進化的等諸多原因至關(guān)重要。

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