IFN-β 選購(gòu)指南：實(shí)驗(yàn)室到臨床的全鏈路決策書(shū)

真身辨認(rèn)：先分清“糖基化"與“非糖基化"

• 糖基化 IFN-β-1a：CHO 細(xì)胞表達(dá)，166 aa，分子量 22.5 kDa，帶 1 個(gè) N80 位點(diǎn)復(fù)雜型聚糖；半衰期 10 h，用于倍泰龍、利比。

• 非糖基化 IFN-β-1b：E. coli 包涵體，165 aa，N80→S80 突變，分子量 18.5 kDa，無(wú)聚糖；半衰期 4 h，需要 qod 給藥。

• PEG-IFN-β-1a：20 kDa 線(xiàn)性 PEG 定點(diǎn)偶聯(lián) N80，表觀(guān)分子量 42 kDa，腎清除率下降 6 倍，給藥間隔拉到 2 周。

標(biāo)簽純度：別讓“185 aa 全長(zhǎng)"忽悠

• SDS-PAGE 單一條帶 ≥98 %，銀染無(wú)雜帶；Western blot 用 7TD1 單抗識(shí)別 144–154 表位，雜蛋白 <0.1 %。

• HPLC-SEC 聚集體 <2 %，二聚體峰拖尾因子 0.9–1.1；聚集體過(guò)高會(huì)觸發(fā) TLR2，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)背景飆高。

• 內(nèi)毒素：臨床級(jí) <0.1 EU/10? IU；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)級(jí)可放寬到 1 EU/10? IU，超過(guò)此值小鼠會(huì)釋放 IL-6 假陽(yáng)性。

比活性：IU 與 pg 的換算暗坑

• WHO NIBSC 00/572 定義 1 IU = 6 pg 糖基化 IFN-β-1a；E. coli 產(chǎn)品比活性高 1.8 倍，1 IU = 3.3 pg。

• 生物法驗(yàn)證：A549/WISH + VSV 病變抑制，EC50 曲線(xiàn)斜率必須在 ?1.8 至 ?2.2；斜率過(guò)陡提示混有 IFN-α 污染。

• 報(bào)告基因捷徑：HEK-Blue IFN-β 細(xì)胞，ISG54-SEAP 上線(xiàn) 6 h，EC50 與經(jīng)典生物法偏差 <15 %，適合高通量批次放行。

運(yùn)輸與保存：?70 °C 是硬杠杠

• 液體型：含 0.3 % HSA 穩(wěn)定劑，?70 °C 五年活性下降 <5 %；?20 °C 一年下降 18 %，不可反復(fù)凍融。

• 凍干型：5 % 海藻糖 + 0.5 % 甘露醇，25 °C 加速 28 天活性損失 <3 %，適合野外運(yùn)輸。

• 避光：468 nm 藍(lán)光 30 min 可氧化 Met36，活性掉 40 %；棕色瓶 + 鋁箔是標(biāo)配。

包裝規(guī)格：按實(shí)驗(yàn)規(guī)模拆單

• 小試：5×10? IU/支，一次用完免稀釋?zhuān)瑴p少 4 °C 存放；贈(zèng)送 1 mL 無(wú)菌 HSA 稀釋液，避免實(shí)驗(yàn)室自行配制差異。

• 中試：5×10? IU 一次性袋裝，焊接無(wú)菌接管，直接連生物反應(yīng)器，降低開(kāi)口污染。

• 臨床：3×10? IU 預(yù)充筆，帶 RFID 芯片，記錄溫度鏈，冷鏈斷點(diǎn) 30 min 自動(dòng)報(bào)警。

供應(yīng)商審計(jì)：三份文件缺一不可

• FDA BLA 編號(hào)：查詢(xún) IFN-β-1a 是否持有 STN 125290，核對(duì)與所購(gòu)批次一致性。

• EDMF 文件：看宿主蛋白殘留方法是否驗(yàn)證到 1 ppm；無(wú)此數(shù)據(jù)，文章審稿常被 QA 打回。

• 病毒清除驗(yàn)證：至少三步層析 + 納濾 20 nm，累計(jì)清除 LRV ≥18；少了病毒步驟，臨床申報(bào)發(fā)補(bǔ)。

價(jià)格陷阱：IU 與 mg 的雙單位游戲

• 糖基化產(chǎn)品：1 mg ≈ 1.5×10? IU，標(biāo)價(jià) ￥8 萬(wàn)/mg；折算 IU 僅 0.5 元/IU，看似便宜，實(shí)則比活性低。

• 非糖基化：1 mg ≈ 3.0×10? IU，標(biāo)價(jià) ￥4.5 萬(wàn)/mg，折算 0.15 元/IU；做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)優(yōu)先選，動(dòng)物模型需加大劑量。

• PEG 化：1 mg ≈ 0.8×10? IU，標(biāo)價(jià) ￥25 萬(wàn)/mg，折算 3.1 元/IU；長(zhǎng)周期實(shí)驗(yàn)節(jié)省人力，綜合成本反而低。

售后支持：技術(shù)團(tuán)隊(duì)響應(yīng)時(shí)限

• 活性爭(zhēng)議：24 h 內(nèi)提供原始 A549/VSV 實(shí)驗(yàn)記錄，含板位圖與 EC50 曲線(xiàn)源文件。

• 換貨條款：運(yùn)輸干冰耗盡 12 h 內(nèi)拍照取證，48 h 內(nèi)補(bǔ)發(fā)新批次，舊貨由供應(yīng)商委托生物廢棄物公司回收。

• 應(yīng)用筆記：提供 10 種細(xì)胞系（THP-1、HepG2、Neuro2a 等）的 ISG 誘導(dǎo) fold 值基線(xiàn)，避免實(shí)驗(yàn)室重復(fù)踩坑。