IgG1 選購(gòu)指南：別讓“常用亞型”變成最貴試錯(cuò)

亞型定位：先問(wèn)實(shí)驗(yàn)到底需不需要 IgG1

流式、ELISA、免疫沉淀、治療性抗體工程……不同場(chǎng)景對(duì) IgG1 的“剛性需求"差異巨大。把 IgG1 當(dāng)鑰匙買(mǎi)，往往多花 30 % 預(yù)算卻換來(lái)交叉反應(yīng)。先寫(xiě)三行實(shí)驗(yàn)概要：樣本物種、檢測(cè)平臺(tái)、是否需要 Fc 段功能。寫(xiě)不清這三點(diǎn)，繼續(xù)往下看只會(huì)越看越暈。

克隆號(hào)迷宮：同一抗原 200+ 克隆怎么篩

抗體公司目錄里，IgG1 克隆號(hào)后面跟“-3G2、-5H1"這類(lèi)尾巴。它們不是版本號(hào)，而是亞克隆差異。真·訣竅是先把文獻(xiàn)里出現(xiàn)頻次多的克隆號(hào)扔進(jìn) PubMed，用“host species + application"二次檢索，看 5 年內(nèi)有沒(méi)有人報(bào)導(dǎo)過(guò)非特異條帶。只要有一篇流式文章指出“背景高"，立刻拉黑。剩下 2–3 個(gè)克隆再進(jìn)入下一輪。

表位與修飾：別讓磷酸化位點(diǎn)藏在 IgG1 身后

IgG1 本身不識(shí)別表位，但它決定了實(shí)驗(yàn)窗口。以抗磷酸化抗體為例，如果表位緊鄰 Pro-Gly 片段，選 IgG1 亞型常出現(xiàn)“肽段構(gòu)象遮蔽"，Western 背景干凈卻條帶弱。換成 IgG2a 或敲除 Fc 的 IgG1 變體，信號(hào)能翻 3 倍。解決方法是向廠家索要“epitope mapping peptide array"報(bào)告，確認(rèn)識(shí)別序列不含柔性 Gly 重復(fù)。要不到報(bào)告？直接換品牌。

宿主物種陷阱：小鼠 IgG1 還是大鼠 IgG1

同一亞型，不同宿主，價(jià)格差一倍。小鼠 IgG1 在人源樣本里背景低，但做大鼠模型時(shí)，抗小鼠二抗會(huì)狂飆背景。反過(guò)來(lái)，大鼠 IgG1 在小鼠組織里同理。多物種實(shí)驗(yàn)直接選“重組兔 IgG1"或“人源化 IgG1"，省掉二抗交叉煩惱。預(yù)算卡死？買(mǎi) 0.5 mg 小包裝做預(yù)實(shí)驗(yàn)，背景不合格立刻止損。

Fc 工程版本：ADCC、CDC 功能要不要

體外診斷多數(shù)場(chǎng)景只認(rèn) Fab，F(xiàn)c 像“沉默乘客"。一旦進(jìn)入治療性抗體或體內(nèi)中和實(shí)驗(yàn)，F(xiàn)cγR 結(jié)合力決定半衰期和細(xì)胞毒性。野生型 IgG1 Fc 親和力高，可能引起意外細(xì)胞殺傷?，F(xiàn)在主流供應(yīng)商提供三檔 Fc 沉默突變：LALA、DANA、YTE。LALA 便宜，YTE 半衰期最長(zhǎng)，價(jià)差不低于 40 %。把實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)寫(xiě)清楚：只做體外阻斷選 LALA；要做小鼠體內(nèi)半衰期，直接上 YTE，省得二次購(gòu)買(mǎi)。

包裝規(guī)格算法：mg 數(shù)不是越大越省

重組 IgG1 每 mg 活性在 4 °C 下按月衰減，廠商給的 36 個(gè)月有效期是–80 °C 數(shù)據(jù)。流式每周用 2 次，每次 0.25 μg，買(mǎi) 100 μg 小包裝剛好 2 個(gè)月用完，避免反復(fù)凍融。Western 一抗稀釋度 1:1000，每膜 10 mL 工作液，單次消耗 10 μg，一年 50 張膜就是 0.5 mg。算清消耗曲線(xiàn)再下單，大包裝單價(jià)低但報(bào)廢風(fēng)險(xiǎn)高，綜合成本反而貴。

批次平行測(cè)試：一次 Western 鎖定未來(lái)三年

選定克隆后，一次性買(mǎi) 3 個(gè)相鄰批次，同一凝膠平行跑樣。曝光后灰度值差異＞8 %，說(shuō)明批次間存在顯著差異，這個(gè)品牌直接淘汰。灰度差＜5 %，把合格批次編號(hào)寫(xiě)進(jìn)實(shí)驗(yàn)室 SOP，后續(xù)訂單強(qiáng)制要求同一批號(hào)。多數(shù)廠商愿意預(yù)留 1 年批次，寫(xiě)郵件時(shí)附上 SOP 截圖，成功率 90 % 以上。

隱形費(fèi)用：運(yùn)輸干冰和關(guān)稅誰(shuí)埋單

IgG1 凍干粉看似常溫即可，但部分 Fc 工程化蛋白要求干冰運(yùn)輸，境外訂單 2 kg 干冰附加費(fèi) 120 美元。進(jìn)口關(guān)稅 HS 編碼 3002.13，關(guān)稅 3 %、增值稅 13 %，一套下來(lái)溢價(jià) 16 %。提前讓銷(xiāo)售把運(yùn)輸條款寫(xiě)成“DDP 門(mén)到門(mén)"，費(fèi)用鎖死，合同里隱藏的小字才不會(huì)變成月底的驚嚇。

售后響應(yīng)紅線(xiàn)：48 小時(shí)不給 COA 直接退貨

重組 IgG1 每批都必須有 SDS-PAGE、SEC-HPLC、 endotoxin 三份報(bào)告。下單前把“48 小時(shí)內(nèi)提供 COA"寫(xiě)進(jìn)采購(gòu)郵件，超時(shí)即觸發(fā)無(wú)條件退貨。別等實(shí)驗(yàn)做到一半發(fā)現(xiàn)內(nèi)毒素 5 EU/mg，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)全軍覆沒(méi)，再扯皮就晚了。