MMP-3 酶活檢測試劑盒選購指導書

1. 行業(yè)標準：先對齊尺子

• ISO 9001 認證：廠家必須具備體外診斷原料質(zhì)量體系，證書編號可在認監(jiān)委實時查驗

• 批次放行標準：CV ≤ 8 %，回收率 90–110 %，線性 r ≥ 0.995，檢出限 ≤ 0.05 ng/mL

• 校準品溯源：使用 NIBSC 92/602 國際標準品，每批提供換算系數(shù)，確保實驗室間可比性

2. 檢測原理：熒光底物法

• 底物序列：Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH?，酶切位點在 Gly-Leu，Km 2.3 μM

• 信號放大：激發(fā) 320 nm，發(fā)射 405 nm，酶切后熒光強度提升 60 倍，5 min 即可進入線性段

• 抑制對照：試劑盒自帶 1 mM GM6001，驗證特異性，加樣后抑制率應(yīng) >95 %

3. 靈敏度與動態(tài)范圍

• LOD：0.03 ng/mL，對應(yīng) 3 × SD 空白值，可檢出早期關(guān)節(jié)炎患者滑液中 MMP-3 微升高

• 線性上限：150 ng/mL，超過后可用零校準品 1:5 稀釋，回收率仍保持 98 %

• 交叉反應(yīng)：MMP-1、MMP-9 在 100 ng/mL 濃度下干擾 <0.2 %，無需額外封閉

4. 通量與耗時

高通量篩選優(yōu)先選 384 孔，單孔成本降低 35 %

5. 品牌實測橫評

• R&D DY513：靈敏度 0.02 ng/mL，價格 ￥4800/96 孔，標準品為真核表達，糖基化接近樣本

• Abcam ab39305：提供預(yù)包被板，減少 30 min 操作，價格 ￥3200，適合新手

• 國產(chǎn) Biolabbox：價格 ￥1500，線性 r 實測 0.993，與進口差異在 5 % 以內(nèi)，預(yù)算敏感實驗室可選

6. 運輸與儲存條件

• 藍冰運輸：2–8 °C，72 h 內(nèi)到貨，夏季須選順豐冷鏈，避免 25 °C 以上暴露

• 凍融穩(wěn)定性：校準品經(jīng) 3 次凍融偏差 <4 %，建議到貨即分裝 50 μL/管，?80 °C 保存

• 底物光穩(wěn)定性：未開封 2–8 °C 12 個月，開封后 4 周用完，鋁箔紙包裹防衰減

7. 常見選購誤區(qū)

• 只看價格忽略溯源：無 NIBSC 換算系數(shù)的批次，發(fā)表文章常被審稿人質(zhì)疑

• 混淆總蛋白與活性：ELISA 測總量，熒光底物法測活性，兩者數(shù)值無固定比例，選題前確定檢測目的

• 忽視樣本類型：血清需 1:100 稀釋，滑液含透明質(zhì)酸，需額外 1:200 稀釋并離心 12000 g 去除黏度，否則抑制信號

8. 下單清單模板

數(shù)量：2 盒 96 孔校準品：含 NIBSC 溯源底物：熒光法，激發(fā) 320/發(fā)射 405驗證數(shù)據(jù)：含 GM6001 抑制曲線貨期：≤ 7 天售后：提供 24 h 技術(shù)支持微信通道