SCF 在細胞圈里被默認識別為 Stem Cell Factor,但商品化產品常把“含 SCF 的條件培養(yǎng)基"簡寫成 SCF Medium。下單前務必讀小字,確認瓶里到底是:
重組蛋白 SCF(凍干粉)
含分泌因子的培養(yǎng)液(已加 SCF、 bFGF、胰島素等)
還是只有空載體細胞的上清液
把類別看錯,實驗直接歸零,發(fā)票只能當書簽。
同樣寫 10 ng/ml,CHO 表達的 SCF 比 E.coli 糖基化完整,活性高 1.8–2.2 倍。看 COA 時優(yōu)先找 ED50(刺激 TF-1 細胞增殖半數有效量),數值越低代表比活越高。別只盯 ng,否則買到“稱重合格、功能拉胯"的便宜貨,還要自己補濃度,預算翻倍。
做原代造血干細胞培養(yǎng),帶血清版本(5% FBS)可讓細胞快速貼壁,但 48 h 后分化率升高。
做類器官或 CAR-T 擴增,必須選 Chemically Defined(CD)級別,瓶身標注“NO FBS, NO xeno"。多付 30% 的錢,換來 FDA 申報時不用補外源病毒檢測,性價比其實更高。
SCF 含 4 個半胱氨酸,形成二硫鍵才有活性。廠家推薦“一次性分裝"不是客套話。45 ml 大包裝看似便宜,每開蓋吸 1 ml,瓶內體積減少,蛋白濃度因蒸發(fā)被“被動濃縮",活性曲線呈鋸齒狀。買 5 ml×10 支的小包裝,貴 8%,但能把 CV 值從 18% 壓到 5%,發(fā)文章時審稿人挑不出毛病。
拿到新批號先做 24 h 預實驗:同一來源的 CD34+ 細胞,分成舊批號對照組與新批號梯度組,看 72 h 增殖倍數。若新批號 EC50 偏移>1.5 倍,直接退貨,廠家會乖乖換新貨并承擔運費。跳過這一步,等正式實驗細胞不增殖,快遞單都過期,只能自費重新買。
列表頭四欄——報價、總活性(IU)、每 10? IU 單價、到貨周期。橫向對比五家供應商后,你會發(fā)現最貴的 A 公司其實比便宜的 E 公司便宜 12%,因為蛋白比活高,用量減半。把表格截圖發(fā)給采購部,領導簽字速度會快很多。
SCF 條件培養(yǎng)基在 37℃ 放置 6 h,活性損失 40%??爝f箱里若只有普通冰袋,表面溫度 8–10℃,風險高。要求廠家用“相變冰盒(-2℃)+ 溫度記錄儀",簽收時導出 PDF,曲線高于 4℃ 就拒收。別怕麻煩,真出問題,這份 PDF 是你索賠的直接證據。
每批 SCF 留 200 μl 原液 –80℃ 封存,寫好編號、到貨日期、開封日期。雜志要求補體外數據時,直接拿同批號蛋白,避免“用新批號重做所有實驗"的尷尬??此普加靡缓袃龃婧校瑢嶋H節(jié)省 2–3 周重復實驗時間,趕畢業(yè)答辯或項目結題時就知道值多少錢。
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