產(chǎn)品簡介：

本產(chǎn)品專門用于從血清(血漿或腦脊液)、病毒拭子保存液、培養(yǎng)基等液 體樣品中提取微量病毒 RNA 的產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點：

1.操作簡單快捷，整個過程只需要 30 分鐘左右。

2.靈敏度高，通過 RT-PCR 檢測到的靈敏度最高可以達到 50 拷貝/mL

（根 PCR 條件相關(guān)）。

3.安全無毒，不需要使用苯-酚和氯仿等有機溶液。

4.一般一次可以處理 0.2 mL 樣品。如果加上病毒離心富集步驟，最多可以處理 1.5 mL 樣品。

5.得到的 RNA 可以用于后續(xù)的 RT-PCR 和熒光定量 RT-PCR。

6.價廉物美，性價比遠低于國外同類產(chǎn)品。

7.適用于各種材料，包括血清、血漿、腦脊液、尿液、糞便、培養(yǎng)細胞  上清液等無細胞材料。

8.病毒RNA-提取試劑盒（過柱法）只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

成份包裝包裝

病毒裂解液30 mL30mL 本色瓶

核酸掛柱液40 mL60mL 本色瓶

離心吸附柱50 套塑料袋

通用洗柱液50 mL60mL 本色瓶

RNA 洗脫液10 mL10mL 本色瓶

使用手冊1 份無

保存和運輸

常溫運輸和保存，RNA 病毒裂解液長期（1 周）放置需放 4℃，有效期一年。

自備試劑

無

使用方法：

1.如果有 N 個樣品，標記 N+2 個 1.5-2 mL 螺旋蓋塑料離心管，多出的一個為陽性對照，一個為陰性對照。為避免污染，建議不要使用壓蓋  式塑料離心管。在做標記時，最好標出向心面或離心面，以便在后續(xù)  離心后取上清時 不會把沉淀丟失。

2.各加入 0.2 mL 液體樣品（血清、血漿、尿液、腦脊液、唾液、眼淚等等）。

2.1、 如果是口腔拭子、咽喉拭子等各種拭子樣品，則將拭子放入 0.2mL 自備生理鹽水中擠壓出液體，然后取 0.2 mL 進行提取。

2.2、 如果是糞便等半固定樣品，則取約 0.3 mL 的樣品，加入 0,3自備生理鹽水，震蕩重懸，離心取 0.2 mL 上清進行提取。

2.3、 如果血液，細胞培養(yǎng)液等含細胞的液體，可以離心用上清，也可以直接取用，但后者提取的 RNA 中有細胞的基因組 DNA 污染。血漿的抗凝劑必須是 EDTA 或 ACD，不能是肝素。使用ACD 時由于所加入 ACD 會增加體積，樣品會被稀釋，得到的病毒滴度會比使用 EDTA 低 15%左右。血漿最好按 0.6 mL/ 管的量分裝保存，以避免反復凍融。

2.4、 如果樣品是實體組織或培養(yǎng)細胞，則需要在自備生理鹽水中勻漿后離心，用 0.2 mL 上清液（含病毒）進行提取，但此種情況下最后得到的 RNA 不可避免的會含有基因組 DNA 污染。

2.5、 如果是病毒樣品保存液或病毒-采樣管，則直接取用 0.2 mL 保存液。

2.6、 如果液體樣品中的病毒需要富集，可以使用 1.5 mL 上述方法得到的液體在 4℃ 24,000×g 冷凍離心 60 分鐘, 移棄 1.3 mL、用剩下的 0.2 mL 繼續(xù)操作。

3.加入 0.6 mL 病毒裂解液，振蕩 30 秒混勻。注意：病毒裂解液在 4℃ 放置后可能會產(chǎn)生沉淀，使用前必須放在 65℃水浴使沉淀徹-底溶解并充分搖勻后再取用。

4.室溫放置 10 分鐘。

5.加入 0.8 mL 核酸掛柱液到離心管中，顛倒混勻后轉(zhuǎn)移一半的混合液

（0.8 mL）到離心吸附柱中。

6.室溫放置 2 分鐘后 12,000×g 室溫離心 1 分鐘，棄收集管中的穿透液， 把離心吸附柱放回到收集管中。

7.將剩余的另外一半裂解液（0.8 mL）轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中。

8.室溫放置 2 分鐘后 12,000×g 室溫離心 1 分鐘，棄收集管中的穿透液， 把離心吸附柱放回到收集管中。

9.加入 0.7 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中，12,000×g 室溫離心 1 分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。

10.加入 0.3 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中，12,000×g 室溫離心 1 分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。此步為第二次洗滌，可以跳過。

11.12000×g 室溫離心半分鐘，去掉離心吸附柱中殘留的液體。

12.在離心吸附柱的濾膜的中部加入 30-50 μL RNA 洗脫液，然后將離心吸附柱套入一新的 1.5 mL 離心管中.

13.室溫放置 2 分鐘后 12,000×g 室溫離心 1 分鐘，離心管中收集的樣品即為 RNA。

14.RNA 樣品可以直接用于 RT-PCR 或逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，也可放-80℃長期保存。

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