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參 考 價 | 面議 |
應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè) |
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操作步驟
(1)所有細胞培養(yǎng)試劑和Transwell chamber 放在37°C溫育;
(2)待測細胞培養(yǎng)至對數(shù)生長期,消化細胞,用PBS和無血清培養(yǎng)基先后洗滌一次,用無血清培養(yǎng)基懸浮細胞,計數(shù),調整濃度為2X10* /ml;
(3)在下室(即24孔板底部)加入600-800μ 1含10%血清的培養(yǎng)基,上室加入100- 150μ 1細胞懸液,繼續(xù)在孵箱培養(yǎng)24小時;
(4)用鑷子小心取出chamber,吸干上室液體,移到預先加入約800μ 1甲醇的孔中,室溫固定30分鐘;
(5)取出chamber, 吸千上室固定液,移到預先加入約800μ 1 Giemsa 染液的.孔中,室溫染色15-30分鐘;
(6)輕輕用清水沖洗浸泡數(shù)次,取出chamber, 吸去上室液體,用濕棉棒小心擦去_上室底部膜表面上的細胞;
(7)用小鑷子小心揭下膜,底面朝上晾干,移至載玻片上用中性樹膠封片;
(8)顯微鏡下取9個隨機視野計數(shù),統(tǒng)計結果。
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