大腸菌群和大腸桿菌菌落計數(shù)方法

1.平板計數(shù)法

通常使用的培養(yǎng)基為紫紅膽鹽乳糖瓊脂。準備兩套平板，每個平板各加入稀釋范圍內(nèi)的樣品液1ml，另加15ml熔化并冷卻至45℃的紫紅膽鹽乳糖瓊脂充分混勻。再覆蓋5ml瓊脂培養(yǎng)基，凝固后將平板翻轉(zhuǎn)，置于35℃培養(yǎng)24h,進行大腸菌群計數(shù)。培養(yǎng)后的大腸菌群為深紅色菌落。通常典塑大腸菌群的菌落直徑為0.5mm或稍大，緊貼菌落周圍有膽鹽沉淀。當幾個菌落長在一起時菌落可能變小。如果食品中含有碳水化合物而不含乳糖，那么當?shù)拖♂尪龋雀邼舛龋┦称芳拥脚囵B(yǎng)基中可能導致前文提及的異常結(jié)果。對10-2或更低稀釋度的平板，有必要對大腸菌群的假陽性結(jié)果進行驗證，可將菌落挑選出來,轉(zhuǎn)接到乳糖肉湯或麥康凱肉湯中在35℃培養(yǎng)后驗證，或用Eijk-man試驗驗證大腸桿菌的存在。
2.干燥復水膜計數(shù)法

干燥復水膜是一種十分有用的大腸桿菌計數(shù)膜。用紫紅膽鹽培養(yǎng)基作為基礎培養(yǎng)基，添加5-溴-4-氯-吲哚-β-葡萄糖苷酸以檢測葡萄糖醛酸的活性。大腸桿菌在平板上為藍色菌落并伴有氣泡產(chǎn)生。該產(chǎn)品便于操作和讀數(shù)，巳被作為AOAC確認為*方法。
3.濾膜法

將濾膜（MF)和改進的選擇性培養(yǎng)基結(jié)合使用，可檢測某些樣品中的大腸菌群和大腸桿菌。該方法對飲用水的檢測十分有用。