SH-SY5Y收貨常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案

常溫運(yùn)輸過(guò)程中，細(xì)胞不免受到震蕩和溫度變化的影響，出現(xiàn)皺縮、聚團(tuán)甚至脫落的現(xiàn)象。遇到這種情況，不用緊張，只要正確處理，細(xì)胞就能恢復(fù)正常生長(zhǎng)。

收貨時(shí)皺縮

常溫細(xì)胞收貨后，把細(xì)胞放進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)即可。如果4小時(shí)后細(xì)胞仍然沒(méi)有鋪展開(kāi)，密度適中的前提下可以靜置過(guò)夜（過(guò)夜前倒出部分培養(yǎng)基，留5-10mL在瓶中，瓶蓋擰松）。

收貨時(shí)聚團(tuán)

常溫細(xì)胞收貨后，先把細(xì)胞放進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)以穩(wěn)定狀態(tài)，再進(jìn)行傳代。傳代用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化1-3min左右。

收貨時(shí)脫落

常溫細(xì)胞收貨后，先把細(xì)胞放進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)以穩(wěn)定狀態(tài)再處理。脫落后的細(xì)胞通常聚團(tuán)漂浮，通過(guò)離心將漂浮的細(xì)胞團(tuán)收集起來(lái)，在離心管里進(jìn)行胰酶消化后重新鋪板即可。

貼壁細(xì)胞常規(guī)方法消化下來(lái)，和處理好的脫落細(xì)胞合并，混勻后鋪板。

SH-SY5Y脫落處理步驟：

1.    1200rpm（約250g）3min離心收集細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)基；

2.    PBS 重懸細(xì)胞，再次 1200rpm（約250g）3min離心，去除PBS；

3.    加入 1mL左右 0.25%胰酶重懸細(xì)胞，吹打1-2下吹起沉淀即可；

4.    放入細(xì)胞培養(yǎng)箱約 1-3min；

5.    用移液槍輕輕吹打細(xì)胞懸液，使細(xì)胞團(tuán)分散；

6.    迅速加入 3-5mL含血清的培養(yǎng)基混勻以終止消化；

7.    1200rpm（約250g）3min離心，去除胰酶；

8.    加入新鮮培養(yǎng)基按合適比例接入無(wú)菌培養(yǎng)器皿中；

SH-SY5Y細(xì)胞收貨時(shí)皺縮、脫落

SH-SY5Y細(xì)胞處理后第三天