產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測(cè)定儀|樣品前處理|試驗(yàn)機(jī)|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>其他文章>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

淺析基因電轉(zhuǎn)染儀脈沖過(guò)程

來(lái)源:廣州市艾貝泰生物科技有限公司   2022年05月27日 15:35  
  基因電轉(zhuǎn)染儀作為物理方法的一種,不僅能將DNA、RNA,還能將抗體、酶及其他生物活性分子轉(zhuǎn)入細(xì)菌、酵母、動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞。它是一種簡(jiǎn)便的基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng),具有其他轉(zhuǎn)移方法不能對(duì)比的*性,如操作簡(jiǎn)便、快捷,可重復(fù)性強(qiáng),轉(zhuǎn)染率高,適用廣譜等,尤其對(duì)目前一般認(rèn)為難轉(zhuǎn)的懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也能獲得較高的轉(zhuǎn)染。
 
  電穿孔法是通過(guò)電場(chǎng)作用于細(xì)胞幾微秒到幾毫秒之后,在細(xì)胞膜上暫時(shí)形成小孔或開口,把大分子如DNA等導(dǎo)入細(xì)胞并進(jìn)入細(xì)胞核的技術(shù)。其過(guò)程簡(jiǎn)述如下:首先在電擊過(guò)程中,細(xì)胞膜上出現(xiàn)穿孔,質(zhì)粒在電泳力的作用下與細(xì)胞膜接觸,并在細(xì)胞膜上電穿孔的區(qū)域形成一種可轉(zhuǎn)移的復(fù)合物。再次電擊后,質(zhì)粒脫離復(fù)合物并擴(kuò)散至細(xì)胞質(zhì)內(nèi),開始瞬轉(zhuǎn);同時(shí)小部分質(zhì)粒進(jìn)入核內(nèi)與染色體整合,開始穩(wěn)轉(zhuǎn)。一旦DNA擴(kuò)散至細(xì)胞,膜上小孔會(huì)關(guān)閉。
 
  淺析基因電轉(zhuǎn)染儀脈沖過(guò)程:
  1)脈沖波形
  脈沖波形主要分為兩種:1、方波脈沖;2、指數(shù)遞減波脈沖。方波脈沖是指:電壓瞬間升至預(yù)設(shè)電壓,保持電壓放電,然后瞬間終止放電。一般哺乳動(dòng)物細(xì)胞電轉(zhuǎn)染時(shí)選擇方波脈沖,有較高的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞存活率。指數(shù)遞減波脈沖是指:先對(duì)電容充電,然后讓電容*放電,其電壓變化呈指數(shù)遞減。一般這種波形的脈沖電轉(zhuǎn)染適用于細(xì)菌、酵母菌、昆蟲細(xì)胞。
  2)脈沖時(shí)間
  脈沖時(shí)間的選定主要取決與脈沖波形。在方波脈沖中,脈沖時(shí)間可直接設(shè)定。在指數(shù)遞減波脈沖中,脈沖時(shí)間是指電壓衰減至初始電壓1/3時(shí)所用的時(shí)間,等于電容(C)與電阻(R)的乘積,單位是ms。在參數(shù)優(yōu)化中,增加電壓應(yīng)當(dāng)降低脈沖時(shí)間,而減小電壓則應(yīng)當(dāng)增大脈沖時(shí)間。

免責(zé)聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618