ELISA實驗的的基本原理

    ELISA即酶聯(lián)免疫吸附試驗，是一種常用的固相酶免疫測定方法。Engvall 和Perlmann于1971年最先應(yīng)用該法進行了IgG定量測定，并命名為"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。 ELISA的基本原理是：

1）使抗原（或抗體）結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性；

2）使抗原（或抗體）與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo)抗原（或抗體），而且此酶標(biāo)抗原（或抗體）既保留其免疫活性，又保留其酶活性；

3）測定時將受檢標(biāo)本（抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原（或抗體）按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進行反應(yīng)，再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開，最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的抗體或抗原量成一定比例；再加入酶反應(yīng)底物后，底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物，根據(jù)其顏色反應(yīng)的深淺進行定性或定量分析，以了解被測標(biāo)本中抗體或抗原含量。

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