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別讓培養(yǎng)基配制成為類器官研究的阻礙

來源:廈門?;锟萍加邢薰?nbsp;  2023年04月03日 13:28  
和,類器官培養(yǎng)基自己配好還是購買商品化培養(yǎng)好                                                                                    

                                                                                       

作為生命科學研究且最重要的方法,細胞體外培養(yǎng)技術(shù)直接影響了研究結(jié)果的準確性。傳統(tǒng)二維細胞培養(yǎng)模型,藥物無差別作用于每個細胞。細胞間作用力弱,類型單一,細胞貼壁生長,無法模擬體內(nèi)的生長環(huán)境和空間結(jié)構(gòu)。類器官培養(yǎng)不僅高度模擬體內(nèi)細胞生長環(huán)境,保持細胞生長結(jié)構(gòu),擁有器官的部分功能特性,能更好地代表組織器官的生理功能和生物學特性。但現(xiàn)階段許多類器官原代建立尚存在成功率低,培養(yǎng)條件不穩(wěn)定的情況。而使用合適、優(yōu)秀的類器官培養(yǎng)基不僅是類器官培養(yǎng)成功的一大關(guān)鍵,還能省時省力節(jié)約科研成本。今天我們來聊聊類器官的培養(yǎng)基。                                                                                        


                                                                                       


                                                                               
用什么替代動物模型                                                                            

                                                                               


                                                                               


                                                                       


                                                                               
參考資料                                                                            

                                                                               


                                                                       

[1]https://modernizetesting.org/congress-eliminates-1930s-animal-testing-requirement                                                                        


                                                                       


                                                                       

[2]https://www.science。。org/content/article/fda-no-longer-needs-require-animal-tests-human-drug-trials#.Y76rZYPSO3g.twitter                                                                        


                                                                       

[3]https://science.sciencemag.org/content/371/6531/839                                                                        


                                                                   

[4]https://medicalxpress.com/news/2022-02-infusion-3d-cellular-intestine.html                                                                    


                                                                   


                                                                                   
?;惼鞴倥囵B(yǎng)案例                                                                                

                                                                                   


                                                                               


                                                                           
關(guān)于模基                                                                        

                                                                           

廈門?;锟萍加邢薰荆╔iamen Mogengel)位于中國·廈門國家高新技術(shù)創(chuàng)業(yè)中心;公司致力于3D細胞培養(yǎng)核心原材料的研發(fā)與產(chǎn)業(yè)化升級,是國內(nèi)一家從科研做起,從實驗研究中一路走來的全流程自主研發(fā)、自主生產(chǎn)的企業(yè)。目前公司的產(chǎn)品有基質(zhì)膠、類器官培養(yǎng)基、細胞因子、3D細胞培養(yǎng)耗材、3D細胞培養(yǎng)智能顯微鏡等;公司擁有4大技術(shù)研發(fā)中心:分子克隆和細胞編輯中心、實驗動物中心、蛋白表達和純化平臺、類器官質(zhì)檢系統(tǒng)和自動化。                                                                            


                                                                           

   團隊擁有十余年類器官技術(shù)研究基礎(chǔ),實力雄厚,科研意志堅定,學術(shù)態(tài)度嚴謹,大膽嘗試,勇于創(chuàng)新。公司推出的基質(zhì)膠、類器官培養(yǎng)試劑盒等產(chǎn)品廣泛適用于類器官培養(yǎng)、血管生成實驗、細胞侵襲(transwell)實驗、PDX、CDX模型實驗、腫瘤球培養(yǎng)、腫瘤移植、皮下成瘤實驗、干細胞培養(yǎng)及細胞分化研究等。                                                                            

前言                                            

                                               


                                   

作為生命科學研究常用且最重要的方法,細胞體外培養(yǎng)技術(shù)直接影響了研究結(jié)果的準確性。傳統(tǒng)二維細胞培養(yǎng)模型,藥物無差別作用于每個細胞,細胞間作用力弱,類型單一,細胞貼壁生長,無法模擬體內(nèi)的生長環(huán)境和空間結(jié)構(gòu)。類器官培養(yǎng)不僅能高度模擬體內(nèi)細胞生長環(huán)境,保持細胞生長結(jié)構(gòu),擁有器官的部分功能特性,而且能更好地代表組織器官的生理功能和生物學特性。但現(xiàn)階段許多類器官原代建立尚存在成功率低,培養(yǎng)條件不穩(wěn)定的情況,而使用合適、優(yōu)秀的類器官培養(yǎng)基不僅是類器官培養(yǎng)成功的一大關(guān)鍵,還能省時省力節(jié)約科研成本。                                    


                                   

今天我們來聊聊類器官的培養(yǎng)基。                                    


                                   

圖片                                    


                                   


                                               

                                                                   
類器官培養(yǎng)基自己配好還是購買商品化培養(yǎng)好                                                                

                                                                   

作為生命科學研究且最重要的方法,細胞體外培養(yǎng)技術(shù)直接影響了研究結(jié)果的準確性。傳統(tǒng)二維細胞培養(yǎng)模型,藥物無差別作用于每個細胞。細胞間作用力弱,類型單一,細胞貼壁生長,無法模擬體內(nèi)的生長環(huán)境和空間結(jié)構(gòu)。類器官培養(yǎng)不僅高度模擬體內(nèi)細胞生長環(huán)境,保持細胞生長結(jié)構(gòu),擁有器官的部分功能特性,能更好地代表組織器官的生理功能和生物學特性。但現(xiàn)階段許多類器官原代建立尚存在成功率低,培養(yǎng)條件不穩(wěn)定的情況。而使用合適、優(yōu)秀的類器官培養(yǎng)基不僅是類器官培養(yǎng)成功的一大關(guān)鍵,還能省時省力節(jié)約科研成本。今天我們來聊聊類器官的培養(yǎng)基。                                                                    


                                                                   


                                                           
用什么替代動物模型                                                        

                                                           


                                                           


                                                   


                                                           
參考資料                                                        

                                                           


                                                   

[1]https://modernizetesting.org/congress-eliminates-1930s-animal-testing-requirement                                                    


                                                   


                                                   

[2]https://www.science。。org/content/article/fda-no-longer-needs-require-animal-tests-human-drug-trials#.Y76rZYPSO3g.twitter                                                    


                                                   

[3]https://science.sciencemag.org/content/371/6531/839                                                    


                                               

[4]https://medicalxpress.com/news/2022-02-infusion-3d-cellular-intestine.html                                                


                                               


                                                               
模基類器官培養(yǎng)案例                                                            

                                                               


                                                           


                                                       
關(guān)于?;?/strong>                                                    

                                                       

廈門模基生物科技有限公司(Xiamen Mogengel)位于中國·廈門國家高新技術(shù)創(chuàng)業(yè)中心;公司致力于3D細胞培養(yǎng)核心原材料的研發(fā)與產(chǎn)業(yè)化升級,是國內(nèi)一家從科研做起,從實驗研究中一路走來的全流程自主研發(fā)、自主生產(chǎn)的企業(yè)。目前公司的產(chǎn)品有基質(zhì)膠、類器官培養(yǎng)基、細胞因子、3D細胞培養(yǎng)耗材、3D細胞培養(yǎng)智能顯微鏡等;公司擁有4大技術(shù)研發(fā)中心:分子克隆和細胞編輯中心、實驗動物中心、蛋白表達和純化平臺、類器官質(zhì)檢系統(tǒng)和自動化。                                                        


                                                       

   團隊擁有十余年類器官技術(shù)研究基礎(chǔ),實力雄厚,科研意志堅定,學術(shù)態(tài)度嚴謹,大膽嘗試,勇于創(chuàng)新。公司推出的基質(zhì)膠、類器官培養(yǎng)試劑盒等產(chǎn)品廣泛適用于類器官培養(yǎng)、血管生成實驗、細胞侵襲(transwell)實驗、PDX、CDX模型實驗、腫瘤球培養(yǎng)、腫瘤移植、皮下成瘤實驗、干細胞培養(yǎng)及細胞分化研究等。                                                        

類器官培養(yǎng)基的主要成分                        

                           

類器官培養(yǎng)基主要由基礎(chǔ)培養(yǎng)基、培養(yǎng)基補充劑、氨基酸、細胞因子、小分子抑制劑、激素、緩沖液等構(gòu)成[1]。                            


                           

常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基有Advanced DMEM/F12,Advanced DMEM等。這個根據(jù)不同類器官需求不難選擇。但細胞因子、小分子抑制劑、激素這些量小作用大的就讓人頭疼了,常見的有30余種不同成分。如廣泛使用的Wnt-3a,常用于乳腺類器官、小腸類器官、肝臟類器官的R-spondin-1,表皮生長因子[2],Noggin,激活素;以及促進增殖、防止分化、維持干性的A83-01等等。                            


                           


                           

自配類器官培養(yǎng)基進行科學研究                            

                       

                           

圖片                            


                           


                                   


                                   


                                   


                                   


                                   

一.

材料與知識準備                                                    


                                   


                                   


                                   

1.研究文獻                                                            

一般需要1周左右時間的文獻查閱來確定培養(yǎng)基成分并估算用量。                            


                           

2.購買培養(yǎng)基配置材料                                                            

對于細胞因子、抑制劑、激素等小批量購買時不僅需要高單價還要極長的貨期。正常到貨需1到2個月,等待期間可進行該類器官培養(yǎng)操作的技術(shù)學習。
                           


                           


                                   


                                   


                                   


                                   


                                   

二.

類器官培養(yǎng)基配置方法                                                    


                                   


                                   


                                   

1.實驗儀器及材料                                                            

(1)儀器:生物安全柜、電子分析天平、pH計、超純水器等;                            

(2)材料:燒杯、容量瓶、分裝瓶等;用于培養(yǎng)基配制的器皿需做到:不掛水滴、無有機物、無致熱原[3]。                            


                           


                           

2.培養(yǎng)基配置                                                            

(1)配制用水:選擇最新過濾的反滲透水,再用超純水機過濾為去熱原培養(yǎng)基用水(TOC<10,即總有機碳<10mg/L);                            

(2)使用電子天平準確稱量試劑,充分溶解,并調(diào)節(jié)pH值至7.4,定容后過濾分裝;                            

(3)按不同類器官對因子的需求向基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入所需細胞因子和抑制劑如Wnt-3a[4]、R-spondin-1、Noggin等,充分混勻;                            


                           


                                   


                                   


                                   


                                   


                                   

三.

自配培養(yǎng)基完成后的常見問題                                                    


                                   


                                   


                                   

培養(yǎng)基配制完成后,材料齊備便可進行類器官的培養(yǎng),而新手培養(yǎng)類器官若沒有正確的技術(shù)指導以及方便快速的步驟流程,僅憑借看文獻得來的技術(shù)培養(yǎng)常常事倍功半難以成功。此時若類器官長勢差、出芽率低、活性差,難以判斷是技術(shù)原因還是培養(yǎng)基原因,更有甚者形態(tài)怪異,與所知該類器官應有形態(tài)不一致,在類器官鑒定后發(fā)現(xiàn)所培養(yǎng)的類器官并非目標類器官,只能通過反復分析,重新配制,再次培養(yǎng),既耗時又費力。                            


                           

研究實驗常常無法確定培養(yǎng)基中的因子用量,配制培養(yǎng)基時條件嚴苛,步驟也繁多,配制時需小心謹慎,且費時費力。因此從文獻研究開始,到培養(yǎng)的類器官可以進行實驗需要6個月甚至更久。                            


                           

正所謂術(shù)業(yè)有專攻,對因子方面研究不多的老師即使沒有錯漏的配制出來后,也同樣容易出現(xiàn)培養(yǎng)的類器官出芽率低,活性差,或是類器官長勢良好卻在研究中掉鏈子的情況,甚至研究開始后進展不佳難以繼續(xù)。                            


                           

那么有沒有什么方法能打破由培養(yǎng)基配制問題造成的時間浪費、成本支出過高、培養(yǎng)效果不佳等研究阻礙呢?                            



                   

                                       

購買?;惼鞴倥囵B(yǎng)基進行科學研究                                        

                                   

                                       

圖片                                        


                                       


                                       


                                       


                                       


                                       

一.

產(chǎn)品選擇和方案推薦                                                        


                                       


                                       


                                       

在購買?;a(chǎn)品時,通常銷售人員會問清各位學者老師所研究的實驗方向,培養(yǎng)的類器官種類,并根據(jù)用戶個性化的需求對用戶進行最佳產(chǎn)品、貨號的推薦。                                


                                       


                                       


                                       


                                       


                                       

二.

技術(shù)支持                                                        


                                       


                                       


                                       

模基生物發(fā)貨快,貨期短。一般1~2周便可到手進行類器官培養(yǎng),在貨期等待期間模基生物會將該方面培養(yǎng)方法,培養(yǎng)操作流程等一并送出。                                


                               


                                   


                                       


                                       


                                       


                                       


                                       

三.

類器官培養(yǎng)                                                        


                                       


                                       


                                       

模基生物類器官培養(yǎng)經(jīng)驗豐富,總結(jié)的培養(yǎng)實驗流程操作簡單而又效果優(yōu)。根據(jù)?;鶎嶒灧桨缚纱蠓嵘醮闻囵B(yǎng)成功率,在材料上和技術(shù)上都為用戶盡可能提高了培養(yǎng)的成功率,而若不幸培養(yǎng)失敗,模基也能協(xié)助分析原因。為用戶節(jié)省時間,減少材料消耗,從產(chǎn)品細節(jié)詢問至類器官能進行研究實驗僅需1~1.5個月。                                


                               


                                       


                                       


                                       


                                       


                                       

四.

總結(jié)                                                        


                                       


                                       


                                       

綜上,若研究本身便以因子,小分子抑制劑為重點,那么自己配制類器官培養(yǎng)基是必要的。而對于不以優(yōu)化培養(yǎng)基成分為目的的研究實驗,比起自配類器官培養(yǎng)基來說選擇模基培養(yǎng)基則是類器官的一大助力。                                


                               

價格方面,自配培養(yǎng)基最大的支出在于細胞因子,細胞因子通常購買量少則單價大幅提升。以常用因子rhR-spondin-1為例,1mg標準的rhR-spondin-1需2萬元左右,而5×20μg標準的rhR-spondin-1便需要1萬多元。不考慮多買以備不足的因子僅以消耗計算,自配500ml類器官培養(yǎng)基需近兩萬元,?;惼鞴倥囵B(yǎng)基500ml則在一萬元左右。                                


                               

時間方面,自配培養(yǎng)基的老師在材料還未到手時,選擇?;囵B(yǎng)基的老師便已完成類器官培養(yǎng)開始研究了。                                


                               

技術(shù)方面,模基生物有扎實的類器官理論基礎(chǔ),豐富的類器官培養(yǎng)經(jīng)驗,以及堅定的科研信念。在這樣的技術(shù)支持下培養(yǎng)的類器官雖不能令各位老師的研究實驗一片坦途,毫無困難;但能穩(wěn)定發(fā)揮,排除干擾讓各位老師不為類器官培養(yǎng)所掣肘,在所擅長的研究領(lǐng)域一展身手,大顯神威。                                


                               

?;惼鞴倥囵B(yǎng)基產(chǎn)品列表                                                    

圖片                                        

可向下滑動                                


                               


                                       


                                       


                                       


                                       


                                       

五.

參考文獻                                                        


                                       


                                       


                                       

[1]劉琦,姚茜,韋正波,謝瑩.類器官培養(yǎng)基主要成分的作用機制及潛在功能【J】.中國組織工程研究,2021(31):5072-5078.                                


                               

[2]米杜秋,張路陽,劉強,張東勇.表皮生長因子對膠質(zhì)瘤干細胞增殖與侵襲的影響【J】.解剖科學進展,2019(01):70-73.                                


                               

[3]張宏 , 劉玉琴 . 培養(yǎng)基的正確制備及使用 [J]. 基礎(chǔ)醫(yī)學與臨床 ,2009, 29(4):446-448.                                


                               

[4]XIAO XH, HUANG QY, QIAN XL, et al. Cdc42 Promotes ADSC-Derived IPC Induction, Proliferation,And Insulin Secretion Via Wnt/β-Catenin Signaling. Diabetes Metab Syndr Obes. 2019;12:2325-2339.                                


                               


                                       


                                       


                                       


                                       


                                       

六.

關(guān)于?;?/strong>                                                        


                                       


                                       


                                       

廈門?;锟萍加邢薰疚挥趶B門市國家高新技術(shù)創(chuàng)業(yè)中心,擁有分子克隆和細胞編輯中心、實驗動物中心、蛋白表達和純化中心、類器官質(zhì)檢中心。致力于3D細胞培養(yǎng)核心原材料研發(fā)與產(chǎn)業(yè)化升級,包括3D細胞培養(yǎng)試劑-基質(zhì)膠、培養(yǎng)基、細胞因子、3D細胞培養(yǎng)耗材、3D細胞培養(yǎng)智能顯微鏡等。實現(xiàn)了3D細胞培養(yǎng)核心原材料自研自產(chǎn),為客戶提供整套閉環(huán)的3D細胞培養(yǎng)一站式解決方案!                                




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