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淋巴細(xì)胞分離液(MPbio現(xiàn)貨)

來源:上海易佰聚經(jīng)貿(mào)有限公司   2012年06月12日 11:04  

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備注:本公司銷售的所有產(chǎn)品僅用于生化科研試驗(yàn)


LSM淋巴細(xì)胞分離液


    用于體外分離外周淋巴血細(xì)胞,也可以從其他來源中分離單核細(xì)胞,包括臍帶血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞。

方法概述:

    分離混合血液白細(xì)胞早期的方法,總是伴隨紅細(xì)胞聚集,只輕微影響白細(xì)胞。通過離心,紅細(xì)胞密度增加聚集,同時(shí)可以從離心管上部收集白細(xì)胞。
    Böyum提出了一種更方便,通過使用Ficoll® 甲泛影鈉溶液離心快速分離方法。稀釋的血液在Ficoll?甲泛影鈉溶液中分層,低速短時(shí)離心。紅細(xì)胞和沉降到管底的粒細(xì)胞,和單個(gè)核細(xì)胞(淋巴細(xì)胞)和血小板可以從兩個(gè)分層之間收集。
    許多研究者不斷努力,修訂了Böyum方法,MP生物醫(yī)學(xué)公司生產(chǎn)的LSM,方法的*之處是運(yùn)用,泛影鈉成功的代替了甲泛影鈉。
程序原理:

    除去血液中的纖維蛋白或肝素處理血液以1:1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋,在分離溶液中分層,低速離心30分鐘。通過離心,遷移能力不同zui終形成不同的細(xì)胞層。
    大部分的紅細(xì)胞和粒細(xì)胞通過梯度遷移形成顆粒狀。由于其密度不同,淋巴細(xì)胞和其他單個(gè)核細(xì)胞(單核細(xì)胞和血小板)分布在在血漿和LSM兩層中間。淋巴細(xì)胞可以通過回抽分層回收,在進(jìn)一步去除血小板,LSM和血漿。
試劑:

 LSM® is a sterile filtered solution which contains 6.2g Ficoll and 9.4 g sodium diatrizoate per 100 ml. The density is 1.0770-1.0800 g/ml at 200C.

    LSM® 是一種滅菌過濾溶液,每100毫升包含6.2克聚蔗糖和9.4克鈉胺。密度是1.0770-1.0800/毫升20℃。

使用說明:


    以下的操作步驟是zui初由Böyum.設(shè)計(jì)的程序的眾多改良版本中的一種。此程序的改良是通過運(yùn)用除去血液中的纖維蛋白或抗凝血劑處理人體血液;這種改良對于其他物種來源血液或者其他組織非常有必要。

1. 輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合

2. 無菌轉(zhuǎn)移3 mlLSM15 ml離心管中。

3. 混合2 ml除纖維蛋白血液或肝素處理血液和2 ml 生理鹽水

4. 仔細(xì)的將稀釋血液加入3 mlLSM(室溫)于15ml離心管中,在血液和LSM中形成一個(gè)明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中。

5. 室溫下400g離心15-30分鐘,離心可以沉淀紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞同時(shí)可以再LSM上形成一層單核淋巴細(xì)胞,如上圖所示。

6. 吸出淋巴細(xì)胞上方2-3mm的血漿。

 

7. 吸取淋巴細(xì)胞層以及它下面一半的LSM和轉(zhuǎn)移到另外的一個(gè)離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至淋巴細(xì)胞離心管中,室溫離心10分鐘,離心速度設(shè)定在既不損傷細(xì)胞又能沉淀細(xì)胞即刻,例如160 - 260 x g(去除LSM和降低血小板的百分比)。

8. 用平衡鹽緩沖液清洗細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基重懸細(xì)胞。

 

訂購信息:相當(dāng)于sigma公司的Histopaque®-1077產(chǎn)品


名稱

貨號

規(guī)格

單價(jià)

*

淋巴細(xì)胞分離液MPbio公司產(chǎn)品)

0850494X

100ML

660

350

0850494

100ML*5

1549

1300

相當(dāng)于sigma公司的Histopaque®-1077產(chǎn)品

也相當(dāng)于GE公司的Ficoll-Paque PREMIUM

 

廠家說明


    MP Biomedicals生物醫(yī)學(xué)公司是位于美國加利福尼亞州的生命科學(xué)和生物技術(shù)廠商。2004年底成功收購Qbiogene、ICN,現(xiàn)在有5個(gè)大型倉庫,能夠及時(shí)供應(yīng)各行業(yè)需求,亞洲倉庫位于新加坡。它致力于生命科學(xué)領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究和探索。目前它提供55000多種產(chǎn)品,是世界上能全面提供生命科學(xué)產(chǎn)品和臨床診斷產(chǎn)品的幾家廠商之一。

 

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