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熒光定量檢測(cè)的檢測(cè)周期是多久？

來(lái)源：北京佰司特科技有限責(zé)任公司 2025年05月31日 15:05

熒光定量檢測(cè)的周期因檢測(cè)類型、樣本復(fù)雜度、儀器效率及實(shí)驗(yàn)流程等因素差異較大，短則幾十分鐘，長(zhǎng)則數(shù)小時(shí)甚至更長(zhǎng)。以下是常見(jiàn)場(chǎng)景的檢測(cè)周期分析：

一、按檢測(cè)場(chǎng)景分類

1.實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）

應(yīng)用場(chǎng)景：基因定量（如病毒載量、基因表達(dá)分析）、病原體檢測(cè)（如新冠病毒）等。

周期：

樣本制備：30分鐘～2小時(shí)（核酸提取、純化）。

上機(jī)檢測(cè)：40分鐘～1.5小時(shí)（儀器運(yùn)行，完成40~50個(gè)循環(huán)）。

總周期：通常2~4小時(shí)（含前處理），自動(dòng)化程度高的設(shè)備可縮短至1.5小時(shí)左右。

2.熒光免疫定量檢測(cè)

應(yīng)用場(chǎng)景：蛋白質(zhì)定量（如腫瘤標(biāo)志物、激素）、藥物濃度監(jiān)測(cè)等。

周期：

免疫反應(yīng)：30分鐘～2小時(shí)（抗原-抗體孵育，取決于反應(yīng)溫度和試劑盒設(shè)計(jì)）。

熒光檢測(cè)：5~10分鐘（上機(jī)讀取熒光信號(hào)）。

總周期：1~3小時(shí)（手工操作流程較長(zhǎng)，全自動(dòng)設(shè)備可縮短至1小時(shí)內(nèi)）。

3.細(xì)胞熒光定量分析（如流式細(xì)胞術(shù)）

應(yīng)用場(chǎng)景：細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞表面標(biāo)志物定量、細(xì)胞周期分析等。

周期：

樣本染色：30分鐘～1小時(shí)（熒光標(biāo)記抗體孵育）。

上機(jī)檢測(cè)：5~30分鐘（取決于細(xì)胞濃度和檢測(cè)參數(shù)數(shù)量）。

數(shù)據(jù)分析：10分鐘～1小時(shí)（復(fù)雜分析需更久）。

總周期：1~3小時(shí)。

4.小分子熒光定量（如熒光探針?lè)ǎ?/div>

應(yīng)用場(chǎng)景：環(huán)境污染物（如重金屬、農(nóng)藥殘留）、食品添加劑檢測(cè)等。

周期：

樣本前處理：1~4小時(shí)（萃取、純化等，視基質(zhì)復(fù)雜度而定）。

熒光檢測(cè)：5~15分鐘（直接測(cè)量或反應(yīng)后測(cè)量）。

總周期：2~5小時(shí)（復(fù)雜樣本如土壤、血液需更長(zhǎng)前處理時(shí)間）。

二、影響檢測(cè)周期的關(guān)鍵因素

樣本前處理復(fù)雜度

簡(jiǎn)單樣本（如血清、細(xì)胞裂解液）：前處理時(shí)間短（30分鐘～1小時(shí)）。

復(fù)雜樣本（如組織、糞便、環(huán)境樣本）：需均質(zhì)化、去雜質(zhì)、濃縮等步驟，可能耗時(shí)2小時(shí)以上。

檢測(cè)儀器自動(dòng)化程度

全自動(dòng)設(shè)備：如集成樣本制備-檢測(cè)的熒光定量PCR儀，總周期可壓縮至1.5小時(shí)內(nèi)。

手動(dòng)/半自動(dòng)化設(shè)備：需人工操作加樣、孵育等步驟，周期延長(zhǎng)至2~4小時(shí)。

熒光反應(yīng)動(dòng)力學(xué)

快速反應(yīng)體系（如實(shí)時(shí)PCR）：檢測(cè)階段僅需數(shù)十分鐘。

慢反應(yīng)體系（如某些免疫熒光）：需長(zhǎng)時(shí)間孵育（如過(guò)夜），總周期可能超過(guò)12小時(shí)（但此類場(chǎng)景較少，多通過(guò)優(yōu)化試劑縮短時(shí)間）。

多指標(biāo)同時(shí)檢測(cè)

單指標(biāo)檢測(cè)：周期較短（如單重qPCR）。

多重檢測(cè)（如同時(shí)測(cè)10種病原體）：儀器運(yùn)行時(shí)間增加，但前處理可同步進(jìn)行，總周期延長(zhǎng)約20%~50%。

總結(jié)

熒光定量檢測(cè)的周期最短可控制在1小時(shí)內(nèi)（如簡(jiǎn)單樣本的快速免疫檢測(cè)），復(fù)雜場(chǎng)景則需數(shù)小時(shí)。實(shí)際周期需結(jié)合具體實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、樣本特性及設(shè)備性能綜合判斷，建議通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化流程或咨詢儀器廠商獲取針對(duì)性方案。

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