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GB4789.2菌落總數(shù)測定新舊版本比較

來源:青島高科技工業(yè)園海博生物有限公司   2025年06月13日 16:03  

 在食品衛(wèi)生檢驗中,《GB4789.2 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗 菌落總數(shù)測定》是一個非常重要的標(biāo)準(zhǔn),很多種類的食品檢驗中,菌落總數(shù)定為必檢項目。此外,該標(biāo)準(zhǔn)還用于加工環(huán)境、原材料和過程中間產(chǎn)品的衛(wèi)生監(jiān)控中。

 該標(biāo)準(zhǔn)目前使用的版本為GB4789.2-2016版,新版標(biāo)準(zhǔn)于2022.06.30發(fā)布,自2022.12.30實施。本文就新舊版本的差異專門列表比較(如表1),以期為廣大檢驗工作人員提供參考。

表1  新舊版本標(biāo)準(zhǔn)差異對比表

比較項目

2016版

2022版

設(shè)備和材料

恒溫水浴箱:46℃±1℃

恒溫裝置:48℃±2℃

培養(yǎng)基和試劑

/

增加:菌落總數(shù)測試片

檢驗程序

GB4789.2菌落總數(shù)測定新舊版本比較

GB4789.2菌落總數(shù)測定新舊版本比較

操作步驟

6.1.3用1mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1mL,沿管壁緩慢注于盛有9mL稀釋液的無菌試管中(注意吸管或吸頭尖-端不要觸及稀釋液面),振搖試管或換用1支無菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻,制成1∶100的樣品勻液

6.1.3用1mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1mL,沿管壁緩慢注于盛有9mL稀釋液的無菌試管中(注意吸管或吸頭尖-端不要觸及稀釋液面),在振蕩器上振蕩混勻,制成1∶100的樣品勻液。

6.1.6及時將15mL~20mL冷卻至46℃的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基(可放置于46℃±1℃恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿,并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻。

6.1.6及時將15mL~20mL冷卻至46℃~50℃的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基(可放置于48℃±2℃恒溫

裝置中保溫)傾注培養(yǎng)皿,并轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿使其混合均勻。

結(jié)果與報告

7.2.3若所有平板上為蔓延菌落而無法計數(shù),則報告菌落蔓延。

刪除了“菌落蔓延”的報告形式。

附錄A

A.2 磷酸鹽緩沖液

A.2 無菌磷酸鹽緩沖液

附錄B

新增具體示例

 通過上表可以看出,對于檢驗操作人員而言,新版標(biāo)準(zhǔn)最大的改變有三點:

1、稀釋度的選擇

 舊版標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定,選“2-3個適宜稀釋度的樣品勻液”進(jìn)行傾注;新標(biāo)準(zhǔn)中則為選“1-3個適宜稀釋度的樣品勻液”進(jìn)行傾注。新標(biāo)準(zhǔn)這樣規(guī)定,表面看來是更寬松了,可以允許檢驗者選擇1個稀釋度進(jìn)行計數(shù),但筆者認(rèn)為,這一規(guī)定實際上對檢驗人員的要求更高了。選擇計數(shù)的稀釋度較多較廣,比方說每個稀釋度都進(jìn)行計數(shù),那么得出的每個稀釋度數(shù)據(jù)之間可以相互對比一下,對檢測結(jié)果有個權(quán)衡,如果只選擇一個稀釋度進(jìn)行計數(shù),必然要求檢驗人員對自己的樣品非常了解,比如說有的樣品中含菌量很少(少于300CFU/mL),只選最di稀釋度進(jìn)行計數(shù)即可,但如果含菌量較高的樣品,只選一個稀釋度進(jìn)行計數(shù),沒有第二個稀釋度數(shù)據(jù)作為參考,那么得出的檢驗結(jié)果很可能是有缺陷的,這種情況下,建議還是盡量多做選幾個稀釋度來計數(shù)。

 總之,雖然新版標(biāo)準(zhǔn)允許選用1個稀釋度來計數(shù),但考慮檢驗工作的嚴(yán)謹(jǐn)性,我們還是建議盡量多選幾個稀釋度來計數(shù),以期得出最真實的檢驗結(jié)果。


2、培養(yǎng)基的溫度

 舊版標(biāo)準(zhǔn)中,指定用“恒溫水浴箱”,新版標(biāo)準(zhǔn)改成了“恒溫裝置”,這種表述更加寬泛,筆者理解為只要能達(dá)到“恒溫”的目的就行,不拘泥于水浴箱或其它保溫恒溫裝置。關(guān)鍵是培養(yǎng)基的溫度,舊版為“及時將15mL~20mL冷卻至46℃的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基(可放置于46℃±1℃恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿,并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻”,而新版標(biāo)準(zhǔn)則改為“及時將15mL~20mL冷卻至46℃~50℃的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基(可放置于48℃±2℃恒溫裝置中保溫)傾注培養(yǎng)皿,并轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿使其混合均勻”,培養(yǎng)基的溫度要求從具體的點(46℃)擴展到了一個范圍(46℃~50℃),這樣得出的結(jié)果除了人員操作造成的差異外,溫度的差異是不是也會造成檢測結(jié)果的不同呢?在實際工作中發(fā)現(xiàn),對于有些菌46℃傾注計數(shù)的結(jié)果和48℃傾注計數(shù)的結(jié)果的確有差異,那么如果再提高到50℃,這種差異是否會更加明顯?對于同一個樣品,當(dāng)不同的檢驗人員分別用46℃和50℃的培養(yǎng)基傾注計數(shù),得出的數(shù)據(jù)不一致,甚至有爭議時,該怎么辦?這也是筆者比較疑惑的地方。


3、試驗操作

 對于試驗過程中的一些操作,新版標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了更加細(xì)化的描述,比如6.1.3中,明確描述為稀釋液需要“在振蕩器上振蕩混勻,制成1∶100的樣品勻液”,而不再沿用舊版本中“振搖試管或換用1支無菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻,制成1∶100的樣品勻液”的說法。這一描述更加規(guī)范,也更加科學(xué),筆者非常認(rèn)同,不同方式的混勻程度,的確會給檢驗結(jié)果帶來很大差異,具體請參考:微生物盲樣檢測介紹及注意事項


注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。



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