端粒酶TERT方法的合規(guī)性

目前，干細(xì)胞成瘤性的檢測常用方法主要有三種，分別是裸鼠體內(nèi)接種試驗、軟瓊脂克隆試驗和端粒酶活性檢測。《中國藥典》2020版、《人間充質(zhì)干細(xì)胞》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)和《間充質(zhì)干細(xì)胞制備及質(zhì)量控制技術(shù)規(guī)范》指定裸鼠體內(nèi)接種試驗為標(biāo)準(zhǔn)方法，《人體細(xì)胞治療研究和制劑質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則》和《間充質(zhì)干細(xì)胞制備及質(zhì)量控制技術(shù)規(guī)范》同時規(guī)定了裸鼠體內(nèi)接種試驗和軟瓊脂克隆試驗為標(biāo)準(zhǔn)方法。但是裸鼠體內(nèi)接種試驗、軟瓊脂克隆試驗兩個周期非常長（裸鼠試驗需16周，軟瓊脂克隆形成試驗需21天）。

《臨床研究用人間充質(zhì)干細(xì)胞質(zhì)量檢驗規(guī)范》討論稿2.3.1成瘤性和促瘤性檢測中規(guī)定，成瘤性檢測是評價所檢測細(xì)胞在免疫缺陷動物體內(nèi)形成腫瘤的能力。除動物試驗外，也可通過體外軟瓊脂克隆形成試驗、端粒酶活性檢測，對受檢細(xì)胞的成瘤性風(fēng)險進(jìn)行間接評估。

《干細(xì)胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則（試行）》干細(xì)胞制劑的質(zhì)量研究1.2致瘤性和促瘤性章節(jié)中規(guī)定，在動物致瘤性試驗不能有效判斷致瘤性時，建議檢測與致瘤性相關(guān)的生物學(xué)性狀的改變，如細(xì)胞對生長因子依賴性的改變、基因組穩(wěn)定性的改變、與致瘤性密切相關(guān)的蛋白（如癌變信號通路中的關(guān)鍵調(diào)控蛋白）表達(dá)水平或活性的改變、對凋亡誘導(dǎo)敏感性的改變等，以此來間接判斷干細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的可能性。

中國食品藥品檢定有研究所所認(rèn)為，端粒酶活性是判斷成瘤性的良好指標(biāo)；因此直接檢測法（TRAP法）和間接檢測法（hTERT基因表達(dá)定量）是當(dāng)前端粒酶活性檢測的主要檢測法。

端粒酶活性和催化亞基hTERT基因表達(dá)量作為重要的腫瘤標(biāo)志物，與90%惡性腫瘤呈正相關(guān)，可應(yīng)用于干細(xì)胞成瘤性快檢。中檢院在進(jìn)行干細(xì)胞制品質(zhì)量復(fù)核時，也是進(jìn)行端粒酶活性檢查，采用端粒酶活性（TRAP法）和hTERT基因表達(dá)量的方法。