Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑介紹

標題： Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑介紹

在生命科學研究，特別是基因功能研究、蛋白表達和基因治療等領域，將外源核酸（DNA、RNA）高效、安全地導入細胞內(nèi)部是至關重要的實驗步驟，這一過程稱為轉(zhuǎn)染。Polysciences公司作為國際z名的生命科學試劑與材料供應商，憑借其深厚的技術積累，開發(fā)了一系列性能z越的轉(zhuǎn)染試劑，為全球科研工作者提供了高效、可靠的工具。以下是關于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑的深度解析

一、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑核心優(yōu)勢  

1. 廣譜高效性  

   - 細胞兼容性極廣：成功驗證于HEK293、CHO、HeLa等常見細胞系，及原代細胞、干細胞、懸浮細胞（如Jurkat）等難轉(zhuǎn)染類型。  

   - 多核酸適配：適用于質(zhì)粒DNA、siRNA、mRNA及CRISPR-Cas9組件，尤其擅長大質(zhì)粒（＞10kb） 轉(zhuǎn)染。  

2. 成本效益比突出  

   - 價格僅為商品化試劑（如jetPEI®）的1/5-1/3，1g裝售價約$100，可配制500mL以上工作液，單次轉(zhuǎn)染成本低至$0.1。  

3. 定制化靈活性  

   - 提供線性PEI（25 kDa） 與 支鏈PEI（25/40/60 kDa） 多分子量選擇：  

     - 25 kDa線性PEI：毒性低，適合原代細胞  

     - 40 kDa支鏈PEI：轉(zhuǎn)染效率高，適用標準細胞系  

二、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑性能實測對比  

三、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑操作關鍵點  

1. 工作液配制  

   - 將PEI粉末溶解于無菌pH 4.5鹽酸溶液，煮沸10分鐘，調(diào)pH至7.0后過濾除菌（避免直接使用PBS導致沉淀）。  

2. 轉(zhuǎn)染復合物比例  

   - 黃金比例范圍：  

     - DNA : PEI = 1μg : 2-4μg（貼壁細胞）  

     - DNA : PEI = 1μg : 3-6μg（懸浮/難轉(zhuǎn)細胞）  

   - 孵育時間：15-30分鐘（室溫）  

3. 毒性控制技巧  

   - 轉(zhuǎn)染后6小時更換培養(yǎng)基，降低長期毒性  

   - 難轉(zhuǎn)染細胞添加0.1mM丁酸鈉提升表達  

四、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑適用場景推薦  

- 強烈推薦：  

  - 大規(guī)模生產(chǎn)（病毒包裝、蛋白表達）  

  - 經(jīng)費有限的實驗室高頻次轉(zhuǎn)染  

  - 大片段DNA（＞15kb）遞送  

- 謹慎使用：  

  - 對細胞毒性極度敏感的神經(jīng)元  

  - 無血清培養(yǎng)體系（需優(yōu)化復合物緩沖液）  

五、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑缺陷與應對  

1. 批次差異風險  

   - 每批PEI需用報告基因質(zhì)粒（如pEGFP） 預實驗確定最佳比例。  

2. 沉淀問題  

   - 復合物出現(xiàn)絮狀沉淀時，加入5-10%葡萄糖改善分散性。  

3. 支原體污染  

   - 購買后立即分裝凍存，使用前過濾（0.22μm）。  

> 結(jié)論：Polysciences PEI是預算敏感型實驗室的s選。其廣譜性、高載量能力和極低單價優(yōu)勢顯著，但需付出優(yōu)化成本。掌握配制與比例控制要點后，可穩(wěn)定獲得媲美進口試劑的效果，特別推薦用于病毒生產(chǎn)和大規(guī)模轉(zhuǎn)染項目。  

注：建議s選貨號24765-1（線性PEI 25kDa），適用性廣，毒性可控。

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