股動(dòng)脈外層組織巨噬細(xì)胞清除方案和免疫組化檢測效果解決方案

將一根導(dǎo)線插入股動(dòng)脈（FA）產(chǎn)生了血管內(nèi)損傷，并檢查了周圍脂肪組織（PVAT）中的炎癥反應(yīng)。考慮到雌激素對血管系統(tǒng)的顯著影響，研究使用了雄性或去勢雌性小鼠。多種免疫細(xì)胞基因在血管損傷后24小時(shí)內(nèi)在PVAT中上調(diào)，包括單核細(xì)胞-巨噬細(xì)胞標(biāo)記基因Cd11b、Cd11c、Mrc1和Adgre1（F4/80）（圖1a）。免疫組化染色顯示，在損傷后早期階段（3天），F(xiàn)4/80巨噬細(xì)胞主要積聚在圍繞血管的外部組織中，這些組織主要由PVAT組成，而不是在血管組織中（圖1b，c）。然后，這些F4/80巨噬細(xì)胞在損傷后的晚期（14天）擴(kuò)散到血管組織中（圖1b，c）。與此同時(shí)，TNF（TNF-α）、Serpine1（PAI-1）、Il1a和Il1b等炎癥細(xì)胞因子基因的表達(dá)在血管損傷后在周圍組織中顯著上調(diào)（圖1d）。

對受傷或假手術(shù)操作的動(dòng)脈周圍的特定脂肪組織(PVAT)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析顯示，除了幾種免疫細(xì)胞標(biāo)志基因和炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)水平增加外，血管損傷引起的BAT標(biāo)志基因的表達(dá)水平顯著增加，包括Ucp1、Cidea、Cox8b、Ppargc1a、Elovl3和Dio2，這通過實(shí)時(shí)定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)分析得到了證實(shí)（圖1e）。通過原位雜交分析（圖1f）和免疫組織化學(xué)分析（圖1g, h）確認(rèn)了血管損傷后PVAT中UCP1的上調(diào)。形態(tài)學(xué)上，與假手術(shù)后的脂肪細(xì)胞相比，血管損傷后的PVAT中的脂肪細(xì)胞具有米色/棕色脂肪特征，包括更小的細(xì)胞大小和多房脂滴（圖1g, i）。WB印跡分析也顯示在去除血管的外部組織中UCP1的增加，而不是保留的動(dòng)脈（圖1j）。然后，我們檢查了浸潤的巨噬細(xì)胞在UCP1上調(diào)中的作用。通過給予荷蘭Liposoma巨噬細(xì)胞清除劑氯膦酸脂質(zhì)體清除巨噬細(xì)胞后，顯著減輕了血管損傷后的UCP1上調(diào)（圖1k, l）。卵巢切除術(shù)對BAT標(biāo)志物如Ucp1和Elovl3的表達(dá)水平影響有限，而血管損傷后這些標(biāo)志物的上調(diào)在卵巢切除小鼠中比對照組更為明顯（補(bǔ)充圖1b）。在完整的生殖腺雄性小鼠中觀察到血管損傷后UCP1顯著上調(diào)及脂肪細(xì)胞細(xì)胞大小的形態(tài)學(xué)縮?。ㄑa(bǔ)充圖1c, d）。綜上所述，這些結(jié)果表明，在雌性卵巢切除小鼠和雄性小鼠中，血管損傷引發(fā)巨噬細(xì)胞浸潤PVAT，誘導(dǎo)PVAT轉(zhuǎn)變?yōu)锽AT樣表型，類似于在寒冷或β3AR激動(dòng)劑的影響下觀察到的皮下和內(nèi)臟WAT的“變色”現(xiàn)象。

股動(dòng)脈外層組織巨噬細(xì)胞清除方案和免疫組化檢測效果解決方案：

給藥劑量：200ul/小鼠

注射方式：腹腔注射

時(shí)間點(diǎn)：建模當(dāng)天Day1和Day7， 一共兩次

檢測手段：IHC，見圖K和I。

樣本：股動(dòng)脈外層組織

論文信息：

論文題目：Beiging of perivascular adipose tissue regulates its inflammation and vascular remodeling

期刊名稱：Nature Communications

時(shí)間期卷：13, Article number: 5117 (2022)

在線時(shí)間：2022年9月7日

DOI：doi.org/10.1038/s41467-022-32658-6

產(chǎn)品信息：

貨號：CP-005-005

規(guī)格：5ml+5ml

品牌：Liposoma

產(chǎn)地：荷蘭

名稱：Clodronate Liposomes and Control Liposomes

辦事處：Target Technology(靶點(diǎn)科技)

ClodronateLiposomes氯膦酸鹽二鈉脂質(zhì)體清除單核巨噬細(xì)胞，在血管損傷誘導(dǎo)的炎性模型中單核巨噬細(xì)胞功能研究，荷蘭Liposoma巨噬細(xì)胞清除劑Clodronate Liposomes見刊于Nature Communications：周圍血管脂肪組織的肥大調(diào)節(jié)其炎癥和血管重塑。