α-Bungarotoxin, CF®543技術(shù)參數(shù)與實驗要點
【產(chǎn)品基本信息】
試劑名稱:α-Bungarotoxin, CF®543
激發(fā)波長:543nm
發(fā)射波長:563nm
外觀性狀:根據(jù)分子量決定,固體或者液體。
溶解性:溶于水等部分有機溶液
供應商:西安凱新生物科技
規(guī)格:0.5mg,1mg,2mg
純度:≥95%
儲存條件:-10 到 -35 °C,干燥、避光
注意事項:現(xiàn)配現(xiàn)用,不可頻繁解凍
【核心功能與應用場景】
1.神經(jīng)肌肉接頭受體成像
功能:通過特異性結(jié)合nAChRs,實現(xiàn)神經(jīng)肌肉接頭處受體分布的高分辨率熒光標記,用于研究受體動態(tài)變化、突觸可塑性及神經(jīng)退行性研究。
示例:在大鼠骨骼肌切片中,1 μg/mL α-Bungarotoxin, CF®543染色溶液室溫孵育15分鐘,可清晰顯示受體簇狀分布,結(jié)合免疫熒光可同時標記其他突觸蛋白。
2.單分子水平受體檢測
技術(shù):利用熒光標記的單分子成像技術(shù),追蹤單個nAChR分子的運動軌跡、擴散速率及聚集狀態(tài),為研究受體動力學提供工具。
優(yōu)勢:CF®543的優(yōu)異光穩(wěn)定性支持長時間單分子追蹤,減少光漂白對實驗結(jié)果的影響。
3.受體親和純化
方法:將生物素化的α-Bungarotoxin與鏈霉親和素磁珠結(jié)合,構(gòu)建親和純化系統(tǒng),從細胞裂解液中特異性捕獲nAChRs,用于受體結(jié)構(gòu)解析或功能驗證。
應用:結(jié)合質(zhì)譜分析,可鑒定受體亞基組成及翻譯后修飾位點。
【技術(shù)參數(shù)與實驗要點】
1.溶解性與儲存條件
溶解性:溶于部分有機溶劑(如DMSO)及水(需優(yōu)化濃度),建議使用新開封的DMSO配制儲備液,避免吸濕影響溶解度。
儲存:-20℃干燥避光保存,避免反復凍融;工作液建議現(xiàn)用現(xiàn)配,4℃保存不超過6個月。
2.染色協(xié)議(以大鼠骨骼肌切片為例)
固定:4%多聚甲醛(PBS)室溫固定15分鐘,或甲醇(-20℃)固定5分鐘。
通透:0.1% Triton X-100(PBS)室溫處理10分鐘(甲醇固定切片省略此步)。
染色:1 μg/mL α-Bungarotoxin, CF®543染色溶液覆蓋切片,室溫避光孵育≥15分鐘。
封片:PBS洗滌后,用抗熒光淬滅封片劑封片,-20℃避光儲存。
3.濃度優(yōu)化
儲備液配制:根據(jù)分子量(7984.3 Da)計算,1 mg毒素可配制125.2 μL 1 mM儲備液(DMSO溶解)。
工作濃度:通常1 μg/mL(約125 nM)用于染色,需根據(jù)實驗體系調(diào)整。
【有關(guān)化學試劑】
DBCO-PEG-OPSS,OPSS-PEG-DBCO,MW:2000
Bis-Biotin-PEG23,雙生物素-PEG23
293298-36-9
Cholera Toxin Subunit B, CF 405M
Cholera Toxin Subunit B, CF 647
DSPE-PEG-NBD,NBD-PEG-DSPE,MW:1000
DSPE-PEG-TPP,TPP-PEG-DSPE,MW:1000
Azdio-PEG-MALeimide
CF 568 SE
CF 633, Succinimidyl Ester
α-Bungarotoxin, CF 405S
4-Arm PEG-MAL
Poly(ε-caprolactone)-PEG-Poly(ε-caprolactone),MW:20000
HO-PEG-X
Hydroxyl-PEG-X,X-PEG-OH,MW:20000
注:該試劑僅用于科學研究,不能用于人體實驗等用途。
本文試劑資料由西安凱新生物科技小華編輯整理。
供應商:西安凱新生物科技有限公司
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