鏈格孢屬的生物特性與種級分類標準及注意事項！

鏈格孢屬(Alternaria Nees)是分布，經(jīng)濟上重要的半知菌類真菌之一。95%以上的種類兼性寄生于植物上，引起多種植物病害，造成性的田間和產(chǎn)后巨大的經(jīng)濟損失，鏈格孢還會引起水果腐霉病。

一、菌種簡介

平臺編號：Bio-66598

提供形式：凍干物/培養(yǎng)物

拉丁屬名：Alternaria Sp.

中文名稱：鏈格孢屬

拉丁名稱：Alternaria sp.

收藏時間：2008/9/22

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究

特征特性：菌落質(zhì)地呈絨狀?；烤z白色，后變?yōu)榍嗷疑行穆∑鹩型膱A，反面青黑色。分生孢子梗透明或橄欖褐色，基部細胞稍大，頂端膨大呈截狀，隔膜多，單生或束生。分生孢子近橢圓形或近矩形，橄欖褐色，表面有小刺，具橫縱隔膜。

生物危害程度：四類

培養(yǎng)基編號：CM0077

培養(yǎng)基名稱：5 °Bé麥芽汁瓊脂

培養(yǎng)基成分：5°Bé麥芽汁 1.0L，瓊脂 15.0g，自然pH。

培養(yǎng)溫度：28-30℃

培養(yǎng)時間：5-7天

需氧類型：好氧

保存方法：真空冷凍干燥法

共享方式：公益性共享；資源純交易性共享；合作研究共享；資源交換性共享

用途：研究；

注意事項：僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準）

二、培養(yǎng)基

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三、生物特性

營養(yǎng)菌絲分隔，在分生孢子梗上向頂發(fā)育產(chǎn)生典型的鏈狀分生孢子，分生孢子梗和體細胞菌絲很相似，暗色的梨型分生孢子通常既有橫隔又有縱隔。

鏈格孢屬（Alternaria C. G. Nees）。菌絲細長，分枝，淡色至褐色，具隔膜，菌絲體大部分埋生，部分表生。分生孢子梗由菌絲頂端生成，或從菌絲側(cè)生，或生于子座上，通常比菌絲粗，色深，簡單或有時分枝，直或彎曲，單生或數(shù)根叢生。產(chǎn)孢細胞生于分生孢子梗及其分枝的頂端，頂部具一產(chǎn)孢孔，以內(nèi)壁芽生孔生式（eb-tret）產(chǎn)孢，隨著多次產(chǎn)孢作合軸式延伸，使分生孢子梗作膝狀曲折，孢子脫落后留下清晰的孢痕，孢痕周邊色深。分生孢子倒棒形、卵形、倒梨形、橢圓形或近圓柱形，與產(chǎn)孢細胞的接觸面大，孢子基部鈍圓形，臍部明顯。孢身褐色、青褐色或黃褐色，具橫、縱或斜的真隔膜，光滑或具疣、刺，分隔處無縊縮或縊縮，頂端無喙或延伸成喙。喙呈單細胞柱狀，錐狀或多細胞柱狀或纖細的長絲狀，較孢身色淡或近無色，簡單或分枝。凡轉(zhuǎn)變?yōu)榇紊稚咦庸．a(chǎn)孢者稱為假喙，否則為真喙。孢子可連續(xù)產(chǎn)生次生分生孢子，形成長的或短的、分枝或不分枝的孢子鏈。

四、種級分類標準

Neergaard（1945）等相繼提出鏈格孢菌種級分類標準，張?zhí)煊畹龋?997）綜合前人和他們研究結(jié)果，提出下列分類標準。

，分生孢子是種級分類的主要依據(jù)，但其形態(tài)、大小等變幅很大，易受基質(zhì)和其他培養(yǎng)條件的影響。因此，在觀察描繪計量時應注意：盡量選用自然基質(zhì)（標本）上長出的孢子，必須培養(yǎng)時可采用營養(yǎng)相對貧乏的PCA（馬鈴薯20g，胡蘿卜20g，瓊脂15g，水1000mL）或TWA＋WS（水1000mL，瓊脂15～20g，滅菌后的麥稈放于瓊脂板上），在光暗交替條件下培養(yǎng)；選孢子個體發(fā)育充分，處于鼎盛時期的孢子，避免選用生長中的幼小孢子或過老畸形孢子；隨機選擇孢子避免有意多選大個或小個孢子，隔膜多或隔膜少的孢子，盡量客觀地反映實際情況。

分生孢子的基本形狀為倒棒形、卵形或倒梨形，其形狀雖有較大變化，但一個種絕大多數(shù)孢子形狀是有特征性的，是種級分類有用標準。種內(nèi)孢子大小變幅可以較大，相近種間孢子大小可能有交叉，但這一特征仍是分種的可靠性狀和常用標準之一。橫隔膜多少變幅較大，但縱、斜隔膜變幅較小，不同種之間孢子分隔數(shù)目，特別是縱、斜隔膜數(shù)目差別較大是一個有用的分種性狀。分隔處是否隘縮也是一些種間區(qū)別的特征。孢子顏色是有一定的參考價值。孢子表面的紋飾很難用于種級分類。因為幾乎所有鏈格孢屬的種，都可形成表面有紋飾的孢子，或表面有紋飾和光滑的孢子可能出現(xiàn)在同一培養(yǎng)菌株中。孢子單生或成鏈著生，形成短鏈（2～5個孢子）或長鏈（5～10個孢子或更多），孢子鏈分枝與否，這是一個明顯的在一定條件下相對穩(wěn)定的特征，所以孢子成鏈特征是一類非常有用的屬下分組和種級分類特征。孢子頂端有無喙及其形態(tài)是種級分類的有用標準。李多川等（1993）將鏈格孢屬的喙部分為六個類型：無喙、單細胞假喙、柱狀假喙、柱狀真喙、錐狀真喙、絲狀真喙。

第二，分生孢子梗的形態(tài)一般無種間特異性，其長度因基質(zhì)和外界條件不同有較大變化，但其直徑變化較小，可做為某些種間的區(qū)別特征。某些種的孢子梗常發(fā)生一次或數(shù)次分枝，也有一定的鑒別價值。

第三，鏈格孢屬中不同種間的菌絲特異性很小，在培養(yǎng)中有的可形成特征性的厚垣孢子，可作為區(qū)別一些種的鑒別特征。

第四，不同種間在菌落形態(tài)、色澤和生長速度等常有一些差別，但作為種級鑒別特征意義不大。

第五，自然寄主（基質(zhì)），絕大多數(shù)鏈格孢種發(fā)生于植物性基質(zhì)上，在自然條件下常發(fā)生于一定屬或科的植物寄主上，即一定科、一定屬植物上常被一定種的鏈格孢所寄生。少數(shù)種對基質(zhì)的選擇不嚴格，適應性廣，表現(xiàn)腐生性強。鏈格孢中大孢子和長喙種類一般寄生性較強，引起癥狀特征明顯，對寄主范圍的選擇性也較強。而小孢子種類對寄主范圍偏寬。

五、保藏條件

斜面菌種和凍干菌種應在2-8°C保存。西林瓶菌種請置于-20℃冷凍。

六、注意事項

1）凍干活化，干粉要全部用完，不能預留，用0.3ml的培養(yǎng)液或無菌水溶解，接種在1-2支平板上，因凍干粉處于休眠狀態(tài)，請勿接種多支平板，以避免因接種量不足而導致復蘇不成功；或直接接種液體培養(yǎng)基，則試管斜面不超過5ml為宜。 經(jīng)過冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復蘇培養(yǎng)時可能會延遲生長，這時需較長的培養(yǎng)時間； 若您收到的是已復蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實驗，或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)；如有不明白之處，請務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；

2）微生物菌種應保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時間過長會導致菌種衰退；

3）菌種操作應在無菌條件下進行；轉(zhuǎn)種完畢，應經(jīng)滅菌再做丟棄處理；

4）應根據(jù)菌種狀況及時轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時間通常為2-25年；

5）菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降，應及時和微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系。

6）如若有菌種復蘇不活或者污染等情況，請在收到菌鐘后2個月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理；

7） 打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應的防護設(shè)備中進行，生物危害程度為三類的菌種應在生物安全柜中操作，打管時凍干管應遠離面部，保護眼睛。

8）西林瓶開封：用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜內(nèi)使用尖嘴鉗去除塑料蓋及鋁蓋，注意不要同時打開膠塞。緩慢開啟膠塞，用 75%酒精棉消毒瓶口部分，使用無菌吸管注入 0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基復溶凍干粉末。

9）安瓿瓶開封：用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍，并保持在火焰旁操作。

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