Ethidium Iodide:碘化乙啶(HI)的實(shí)驗(yàn)示例
【參數(shù)信息】
英文名稱:Ethidium Iodide
中文名稱:碘化乙啶(HI)
CAS NO:211566-66-4
分子式:C25H28IN3
分子量:497.41
狀態(tài):固體
Ex/Em:~518/600nm(與DNA結(jié)合)
純度:≥95%
儲存條件:-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡單概述】
碘化乙啶(Ethidium Iodide)是一種中等親脂的菲啶鎓染料,一種核酸染色劑,具哺乳動物細(xì)胞膜通透性,在含革蘭氏陰性菌的環(huán)
境下選擇性染色幾乎所有的革蘭氏陽性菌。一旦與DNA結(jié)合,碘化乙啶發(fā)出激發(fā)/發(fā)射波長分別約為518/600nm的熒光。通常,真
核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核都會被碘化乙啶染色。然而,線粒體和核仁也可能被染色。
【實(shí)驗(yàn)示例】
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>
用碘化乙啶(HI)染色金黃色葡萄球菌,從而評估小鼠巨噬細(xì)胞對金黃色葡萄球菌的吞噬能力。
實(shí)驗(yàn)方法:
1)50ml離心管內(nèi)裝1ml S. aureus(5 × 108/ml);
2)加入20 μl碘化乙啶儲存液(濃度為:5mg/ml,用1ml DMSO加入5mg HI粉末,充
分溶解后,分裝避光凍存在-20℃),混勻;
3)室溫避光孵育15min;
4)冰DPBS清洗2次(4 °C, 3,000 rpm, 10 min);
5)用BMM培養(yǎng)基重懸細(xì)菌,使其密度為2 × 107/ml,
此時的細(xì)菌立即進(jìn)行后續(xù)的分析;
6)用FACSCanto流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測,碘化乙啶的熒光用FL2通道來搜集信號。用
FlowJo進(jìn)行結(jié)果分析。
【相關(guān)試劑】
EB (10 mg/ml in Water) EB水溶液 (10 mg/ml)
Propidium lodide碘化丙啶(粉末)
APC-Streptavidin,APC標(biāo)記鏈霉親和素
PE-Streptavidin,PE-Cy7標(biāo)記鏈霉親和素
Fluo-3,AM,Cell Permeant 鈣離子熒光探針
149733-79-9,Lucifer Yellow Cadaverine
Propidiumlodide(1mg/ml)碘化丙啶(1mg/ml)
EthidiumHomodimer 1(EthD-1)溴乙啡錠二聚體1
EthidiumHomodimer3(EthD-3)溴乙啡錠二聚體3
7-AAD(7-Aminoactinomycin D) 7-氨基放線菌素D
AcridineOrange Hydrochloride丫啶橙鹽酸鹽
PropidiumMonoazide(PMA)疊氮溴化丙錠
EthidiumMonoazideBromide(EMA)疊氮溴化乙錠
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本試劑僅適用于科研實(shí)驗(yàn),敬請知悉。
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