引言
Ames試驗(yàn),是經(jīng)典的測試化學(xué)物或藥物致突變實(shí)驗(yàn),該法測定主要在培養(yǎng)皿中進(jìn)行,具有簡單、快速、精確而又靈敏的特點(diǎn),被世界各國廣泛采用。該試驗(yàn)是以營養(yǎng)缺陷型的突變體菌株為指示生物檢測基因突變的體外試驗(yàn),常用的菌株有組氨酸營養(yǎng)缺陷型或色氨酸缺陷型大腸桿菌。本文從藥物毒性篩選評價(jià)的角度,簡單闡述不同類型Ames試驗(yàn)菌株的選擇。
Ames試驗(yàn)類型
隨著分子生物學(xué)領(lǐng)域的快速發(fā)展, Ames作為一項(xiàng)經(jīng)典的致突變性篩選方法也在不斷發(fā)展和完善,譬如微孔板法(Mini-Ames或Micro-Ames試驗(yàn))、液態(tài)培養(yǎng)法(Ames II試驗(yàn))等。近兩年,針對N-亞硝胺雜質(zhì)潛在致突變性評估,F(xiàn)DA/國家毒理學(xué)研究中心(US FDA/NCTR)、歐洲藥品管理局(EMA)推薦使用增強(qiáng)Ames測試(Enhanced Ames Test)。
Ames試驗(yàn)菌株
在藥物毒性評價(jià)篩選試驗(yàn)中,不同類型的Ames試驗(yàn),因?yàn)殡s質(zhì)使用量不同,試驗(yàn)菌株的種類有所不同,詳見下表:
相關(guān)產(chǎn)品
※菌株
齊氏生物提供的沙門氏菌株(TA97a、TA98、TA100、TA102、TA1535、TA1537)和大腸桿菌WP2uvrA, 經(jīng)過鑒定,菌株特性與活菌數(shù)量符合Ames試驗(yàn)國家標(biāo)準(zhǔn),并以甘油菌的形式提供,融化后可直接使用。 為了保證試驗(yàn)效果,建議搭配齊氏生物研發(fā)的S9代謝活化系統(tǒng)一起使用。
※ 試劑盒
※ 活化系統(tǒng)
CHI Scientific(齊氏生物)研發(fā)的S9代謝活化系統(tǒng)是經(jīng)過酶誘導(dǎo)劑處理的肝臟所提取的帶有輔助因子和微粒體部分的測試系統(tǒng)。
※ 大鼠肝S9
大鼠肝細(xì)胞S9是肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞勻漿液的去線粒體上清液,包含了大量的CYPs等藥物代謝酶,對于研究化合物的藥物代謝和考察潛在的藥物藥物相互作用是非常有用的研究工具,同時(shí)也是食品、化妝品、化學(xué)品等致突變試驗(yàn)(Ames)重要試劑。
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