線粒體研究-探索衰老、腫瘤、糖尿病或神經(jīng)退行性疾病的分子機制
翼和生物為您帶來“一管雙檢”的黑科技——細胞/血清游離線粒體拷貝數(shù)檢測試劑盒,讓線粒體研究一步到位!
01 為什么必須關(guān)注線粒體拷貝數(shù)?
• 細胞內(nèi)線粒體:拷貝數(shù)異常直接擾亂能量代謝,與衰老、糖尿病、心血管疾病、腫瘤等密切相關(guān)。
• 游離線粒體:外周血或血漿中游離mtDNA(ccf-mtDNA)正在成為非侵入性腫瘤早篩、燒傷預(yù)后、失眠/抑郁合并癥監(jiān)測的“明星標志物”。
02 翼和如何脫穎而出?
翼和生物雙色熒光TaqMan探針法
? 絕對定量:配套標準曲線,拷貝數(shù)“可數(shù)”又“可溯”。
? 雙重熒光:FAM通道測線粒體,HEX通道同步校正細胞數(shù)或抽提質(zhì)量,孔間差<5%。
? 一管雙檢:同一試劑盒即可檢測細胞內(nèi)線粒體與血清游離線粒體,省時、省樣、省錢。
? 多重PCR:反應(yīng)體系僅20 μL,降低30%試劑成本。
03 實驗數(shù)據(jù)說話
• 細胞實驗:翼和試劑盒成功繪制30-80歲人群線粒體拷貝數(shù)隨年齡變化的精準曲線,為衰老研究提供量化標尺。
• 血清實驗:在200例腫瘤患者中,ccf-mtDNA拷貝數(shù)與腫瘤負荷高度正相關(guān)(R=0.83,P<0.001),提示其作為動態(tài)監(jiān)測標志物的巨大潛力。
04 操作流程——三步上手
1. 樣本制備:EDTA 抗凝全血 30 min 內(nèi)分離血清,DNA 提取試劑盒即提即用。
2. qPCR 體系:18 μL 預(yù)混液 + 2 μL 模板(10 ng/μL),石蠟油封閉,防蒸發(fā)。
3. 程序運行:95 ℃ 2 min →(95 ℃ 15 s → 56 ℃ 1 min → 72 ℃ 30 s)× 40,72 ℃ 采集熒光。
05 應(yīng)用場景
• 衰老與長壽研究:評估線粒體功能衰退趨勢。
• 腫瘤液體活檢:檢測循環(huán)游離 mtDNA,輔助早期診斷與療效監(jiān)測。
• 代謝性疾?。禾剿魈悄虿 ⑿难懿〉扰c mtDNA 拷貝數(shù)變異的關(guān)聯(lián)。
• 藥物毒理:監(jiān)測藥物對 mtDNA 的影響,優(yōu)化安全性評價。
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