Hamilton為細(xì)胞高通量篩選提供自動(dòng)化解決方案
為了覆蓋廣泛的通量和方法復(fù)雜性,Hamilton提供了3種平臺(tái)類別:ML VANTAGE適用于具有高通量試驗(yàn)(35-60個(gè)SBS板)和360°整合,包括底部整合柜和后部整合柜;Microlab® STAR系列和STAR V,用于中高通量檢測(cè)(25-60 SBS 板)和180-270°整合;以及ML NIMBUS和ML PREP,適用于低通量(7-20個(gè)SBS板)和低中復(fù)雜性的方法。我們所有用于基于細(xì)胞的分析的自動(dòng)化解決方案都是可以定制的。

ML STAR、ML STAR V和ML VANTAGE通常用于細(xì)胞培養(yǎng)方法,因?yàn)樗鼈兛梢耘鋫?6或384多通道移液頭(MPH)與更廣泛的臺(tái)面模塊和第三方設(shè)備整合。Hamilton臺(tái)面模塊可以執(zhí)行加熱、離心、pH測(cè)量、過濾、固相萃取、圖像分析、條形碼和二維碼讀取等步驟。細(xì)胞培養(yǎng)方法中最常見的第三方設(shè)備是孵育器、板存儲(chǔ)、離心機(jī)和成像系統(tǒng)。

細(xì)胞處理
實(shí)驗(yàn)器皿格式
Hamilton自動(dòng)化系統(tǒng)設(shè)計(jì)用于處理各種SBS格式實(shí)驗(yàn)室器皿上的混懸液和貼壁細(xì)胞培養(yǎng),包括標(biāo)準(zhǔn)或定制的1、6、12、24、48、96孔板。
在其他類型的實(shí)驗(yàn)室器皿(如T75燒瓶)中生長(zhǎng)的貼壁培養(yǎng)物通常被消化解離,并以適當(dāng)濃度重懸于單獨(dú)的層流柜或生物安全柜中,然后移入Hamilton平臺(tái)進(jìn)行自動(dòng)接種。在這些情況下,細(xì)胞溶液通常裝在帶有螺旋蓋的塑料管中運(yùn)輸(如Falcon管)。Hamilton Twister通道和去蓋模塊專門開發(fā)用于處理這些試管(即直徑在15mm和38mm之間),包括其運(yùn)輸、離心(高達(dá)1500rpm+/-5%)、開蓋和關(guān)蓋。Twister通道還配備有1D條形碼閱讀器。

移液
Hamilton平臺(tái)可配備通道,用于移取各種體積;從350nl至5ml。通過Hamilton專有的移液技術(shù)確保對(duì)細(xì)胞的溫和處理:用于吸頭連接和定位的O型圈擠壓擴(kuò)張(CO-RE)技術(shù);液面探測(cè)技術(shù)(LLD)來探測(cè)管或板的精確液位水平;用于動(dòng)態(tài)追蹤吸放液步驟的空氣置換移液(MAD)技術(shù)和全程吸放液試試監(jiān)控技術(shù)(TADM)。此外,Hamilton通道允許在Z軸上不對(duì)稱擴(kuò)展和獨(dú)立的液體處理和移動(dòng),這對(duì)于平行處理不同的板特別有益。我們的STAR V設(shè)備還可以配備MagPip通道。MagPip是一種新的移液技術(shù),基于磁化活塞在試管磁場(chǎng)內(nèi)的移動(dòng),它可以高精度覆蓋廣泛的提及范圍(350nl-750μL)。

Hamilton提供了多種方法來處理不同類型的液體類型和細(xì)胞類型。我們有寬口吸頭,便于處理球體等3D結(jié)構(gòu)。寬口吸頭可以處理10-1000μL的體積,并且根據(jù)孔的尺寸有三種不同的規(guī)格:0.71mm、1.55mm、1.2mm和3.2mm.

Hamilton移液通道吸液和分液的參數(shù)可以在Venus軟件上調(diào)整,用于確保所需流速和吸頭定位(例如,與孔底部的距離和孔壁上的側(cè)面接觸等參數(shù))。
細(xì)胞培養(yǎng)方法吸液步驟自動(dòng)化過程中的一個(gè)常見挑戰(zhàn)是在不接觸微孔底部的情況下去除培養(yǎng)基。為了完成這項(xiàng)任務(wù),Hamilton提供了傾斜模塊,模擬微孔板的手動(dòng)傾斜,有助于從1-24孔板的孔中去除培養(yǎng)基。

菌落/克隆挑選
Hamilton ML STAR和STAR V可與EasyPick整合,用于識(shí)別、選擇和挑選菌落形成結(jié)構(gòu)(如細(xì)菌菌落、雜交瘤和多能干細(xì)胞克?。asyPick是一個(gè)模塊,由安裝在移液臂上的高分辨率帶電電荷器件(CCD)攝像頭、Multiflex載架底座上的光臺(tái)和圖像處理專用軟件組成。在專有的EasyPick軟件中,用戶定義參數(shù)并確定用于識(shí)別克隆的典型標(biāo)準(zhǔn)的權(quán)重(例如大小、形狀(圓形)、與菌落間距)。根據(jù)識(shí)別出的克隆位置,軟件隨后計(jì)算機(jī)械臂兼容坐標(biāo)。通過移液通道,工作站隨后挑選識(shí)別的菌落并將其轉(zhuǎn)移至目標(biāo)板。

培養(yǎng)基供應(yīng)
為了便于在臺(tái)面上批量供應(yīng)培養(yǎng)基,Hamilton液體處理平臺(tái)可以配備培養(yǎng)基模塊。培養(yǎng)基模塊包括控制箱、蠕動(dòng)泵和臺(tái)面槽模塊,配備液位探測(cè)傳感器、溢流排水管和導(dǎo)管。該模塊需要兩種類型的管路:與培養(yǎng)基源鏈接的源管路和與廢物/溢流容器連接的廢物管路??稍陬A(yù)熱模塊預(yù)熱培養(yǎng)基。

如果無菌性不存在問題,可以用Hamilton Multi-Flex(MFX)液體分配器2.0來進(jìn)行培養(yǎng)基供應(yīng)。MFX液體分配器2.0由帶閥門/注射器組合的主模塊組成,用于講液體從最多兩個(gè)源容器中泵出。液體可以在臺(tái)面上以兩種方式進(jìn)行轉(zhuǎn)移:一種用移液通道,一種用多通道移液頭。此外,該模塊還可用于將臺(tái)面中的廢液輸送至廢物容器中。

試劑的溫度控制
細(xì)胞培養(yǎng)方法的幾個(gè)步驟需要溫度控制,包括培養(yǎng)基預(yù)熱、酶培養(yǎng)(如胰蛋白酶化)和敏感試劑的中短期冷卻。為了自動(dòng)化基于細(xì)胞的分析,需要進(jìn)行臺(tái)面溫度控制?;蛘?,一些步驟可以在37℃的溫度下進(jìn)行,并整合培養(yǎng)箱。

Hamilton還提供各種具有控制功能的臺(tái)面模塊,包括我們的Hamilton加熱振蕩器(HHS)、加熱器冷卻器和臺(tái)面熱循環(huán)儀(ODTC)。此外,Hamilton提供了2個(gè)專用的冷卻載架,以確保敏感試劑在工作臺(tái)上保持冷卻。
系統(tǒng)無菌性
Hamilton液體處理工作站防止污染最基本的技術(shù)是其移液技術(shù)。Hamilton的移液技術(shù)是基于空氣置換而不是液體置換,避免使用在微生物自然生長(zhǎng)的液體以及樣品和柱塞之間的直接接觸。
為了確保移液范圍之外系統(tǒng)的無菌性,Hamilton平臺(tái)可配備高效微??諝猓℉EPA)過濾罩和紫外燈。對(duì)于ML STAR系列,Hamilton可提供其新的STAR清潔空氣保護(hù)(S-CAP)罩,可通過計(jì)算機(jī)接口或使用內(nèi)置的觸摸屏顯示器進(jìn)行控制。Hamilton系統(tǒng)也可放置在潔凈室或?qū)恿鞴窕蛘逫I級(jí)安全柜(BSC)。

Hamilton還提供一系列用于組織培養(yǎng)的耗材,包括多種類型的無菌吸頭,有或無濾芯。我們的無菌帶濾芯吸頭盒加蓋并單獨(dú)包裝,以保持無菌性并保護(hù)吸頭完整性。吸頭盒可以堆疊在ML VANTAGE入口/出口模塊或Plate Hotels和堆棧(包括Hamilton Verso Q10 Plate Hotel), 以便節(jié)省臺(tái)面空間。
除吸頭外,Hamilton還提供試管、板和試劑容器。Hamilton耗材在ISO 8級(jí)潔凈室中生產(chǎn),基于ISO14644標(biāo)準(zhǔn)以及ISO 9001和ISO 13485。多數(shù)耗材都滿足符合歐盟委員會(huì)(EC)指南和Conformite Europeen (CE)以及體外診斷法規(guī)(IVD)。
整合用于高通量篩選和長(zhǎng)期培養(yǎng)
如前所述,Hamilton平臺(tái)可以與第三方設(shè)備(如培養(yǎng)箱、plate hotel和細(xì)胞成像系統(tǒng))整合,用于全面自動(dòng)化、基于細(xì)胞的高通量篩選分析:從細(xì)胞維持培養(yǎng)和分裝冷凍到全面的實(shí)驗(yàn)分析配置、自動(dòng)化成像分析和取樣。此外,Hamilton還提供從-80℃到室溫的自動(dòng)化樣品存儲(chǔ)解決方案,以及一系列即用型工作站,專門用于核酸提取、qPCR構(gòu)建、NGS文庫制備和LC-MS樣本制備等下游分析方法。
為了便于與第三方設(shè)備的整合,Hamilton提供Hmotion,一種用于板運(yùn)輸?shù)男⌒蜋C(jī)器人。Hmotion是一種靈活的自動(dòng)化解決方案,提供兩種可配置的高度和三種不同的線性軸集成,有或無限性移動(dòng)軌道。

Hamilton還提供細(xì)胞培養(yǎng)計(jì)劃專用CECULA。CECULA的圖形用戶界面(GUI)非常容易使用,可滿足長(zhǎng)期培養(yǎng)工作流程的要求。CECULA擴(kuò)展了Hamilton標(biāo)準(zhǔn)VENUS軟件的功能,以允許正在進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)期間工作流程的改變和多個(gè)批次并行運(yùn)行。

類似于VENUS調(diào)度軟件,CECULA計(jì)算系統(tǒng)的資源消耗,以警告用戶即將出現(xiàn)的短缺(如周末前的吸頭數(shù)量不足)。該軟件還估計(jì)每個(gè)工作流程的時(shí)間,幫助規(guī)劃下一步的實(shí)驗(yàn)步驟,并優(yōu)化系統(tǒng)利用率。
細(xì)胞培養(yǎng)是一項(xiàng)復(fù)雜的任務(wù),因?yàn)橐后w/細(xì)胞處理有難度、無菌要求,以及整個(gè)過程的敏感性。通過Hamilton自動(dòng)化液體處理設(shè)備中的先進(jìn)技術(shù)(如CO-RE)和專用軟件(如CECULA),這些挑戰(zhàn)可以得到有效地解決。系統(tǒng)的最終配置將取決于客戶的具體需求。Hamilton在涉及細(xì)胞培養(yǎng)的分離方法的簡(jiǎn)單和高度復(fù)雜集成方面擁有豐富的經(jīng)驗(yàn)。
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