在日常實驗過程中,如果培養(yǎng)箱反復出現(xiàn)污染,需結合“日常預防消毒”和“污染后清潔”兩步操作,核心是破壞微生物滋生環(huán)境,具體方法如下:
一、日常預防消毒(避免污染反復)
1. 定期清潔內部:每1-2周清空培養(yǎng)箱,用75%醫(yī)用酒精濕巾擦拭內壁、隔板、托盤(可拆卸部件可浸泡酒精5分鐘),重點清潔角落、門縫等易積塵處。
2.紫外線消毒:每次使用后或每日結束實驗時,開啟箱內紫外線燈(確保無樣品),照射30-60分鐘,消毒后通風10分鐘再放入樣品(紫外線會產生臭氧,需避免直接吸入)。
3. 濕度水盤管理:水盤需用無菌水或蒸餾水,每周更換1次,換水時用酒精擦拭水盤內壁,避免細菌在水中滋生。
4. 樣品規(guī)范放置:樣品瓶/皿需密封完好,避免直接敞口;不同類型樣品分開擺放,減少交叉污染風險。
二、污染后消毒(清除已有污染)
1. 清空并初步清潔:取出所有樣品(污染樣品需單獨滅菌處理),用酒精濕巾擦拭內部后,再用0.1%含氯消毒液(如84消毒液,按1:500稀釋)擦拭內壁,靜置20分鐘后用無菌水擦去殘留(避免腐蝕金屬部件)。
2. 高溫干熱滅菌:若培養(yǎng)箱支持“干熱滅菌模式”(一般最高溫度160-180℃),可設置160℃滅菌2小時(需取出不耐高溫部件,如橡膠密封條);無此模式可改用“低溫甲醛熏蒸”(需專業(yè)操作,避免甲醛殘留)。
3. 部件單獨滅菌:隔板、托盤、水盤等可拆卸部件,可放入高壓蒸汽滅菌鍋(121℃、103kPa,20分鐘),殺滅芽孢等頑固微生物。
4. 恢復與監(jiān)測:消毒后通風24小時,放入無菌培養(yǎng)基空白對照(37℃培養(yǎng)24-48小時),確認無雜菌生長后再正常使用。
關鍵注意事項
- 避免用高濃度酒精(如95%)或強酸強堿消毒劑,防止腐蝕培養(yǎng)箱內膽和傳感器。
- 若污染反復出現(xiàn),需檢查培養(yǎng)箱門封條是否老化(密封不嚴會漏菌),或樣品本身是否帶菌(接種前需確認樣品無菌性)。
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