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生命科學(xué)PCR熱循環(huán)儀做實(shí)驗(yàn)需要哪些耗材?

來源:孚約生物科技(上海)有限公司   2025年10月30日 10:27  

PCR儀在使用過程中通常需要以下一些耗材:


一、反應(yīng)管

1、薄壁管:一般為聚丙烯材質(zhì),有 0.2ml、0.5ml 等常見規(guī)格,適合用于放置 PCR 反應(yīng)體系,能很好地適配 PCR 儀的加熱模塊,保障熱量均勻傳遞,利于反應(yīng)高效準(zhǔn)確地進(jìn)行。

2、八聯(lián)管:將多個反應(yīng)管連在一起,方便同時進(jìn)行多個樣本的反應(yīng)操作,常用于批量樣本檢測等情況,例如在對多個基因位點(diǎn)同時檢測或者多份臨床樣本篩查時使用,能提高工作效率。


二、管蓋

與反應(yīng)管配套使用,防止反應(yīng)過程中液體揮發(fā)以及避免外界物質(zhì)污染反應(yīng)體系,確保反應(yīng)成分處于相對穩(wěn)定的環(huán)境,保障 PCR 反應(yīng)正常進(jìn)行。


三、吸頭

1、普通吸頭:用于準(zhǔn)確吸取和轉(zhuǎn)移各種 PCR 相關(guān)的液體試劑,像模板 DNA 溶液、引物溶液、PCR 反應(yīng)緩沖液、Taq 酶等,規(guī)格多樣,常見的有 10μl、20μl、100μl、1000μl 等,可依據(jù)吸取液體的量來選擇合適規(guī)格的吸頭,保障移液的準(zhǔn)確性。

2、濾芯吸頭:其內(nèi)部帶有濾芯,在吸取樣本等操作時,能夠防止氣溶膠等雜質(zhì)進(jìn)入吸頭內(nèi)部進(jìn)而污染移液器,避免交叉污染,尤其適用于對樣本純凈度要求較高的實(shí)驗(yàn),比如在分子診斷、基因克隆等高精度實(shí)驗(yàn)中的試劑吸取操作。


四、PCR 反應(yīng)試劑

1、DNA 聚合酶(如 Taq 酶等):是 PCR 反應(yīng)的關(guān)鍵酶,能夠以 DNA 為模板,在引物的引導(dǎo)下,按照堿基互補(bǔ)配對原則合成新的 DNA 鏈,不同的酶適用于不同的反應(yīng)條件和實(shí)驗(yàn)需求,例如有的 Taq 酶具有較高的熱穩(wěn)定性和擴(kuò)增效率。

2、dNTPs(脫氧核糖核苷三磷酸):包含 dATP、dTTP、dCTP、dGTP 四種,是合成新 DNA 鏈的原料,為 PCR 反應(yīng)中 DNA 鏈的延伸提供所需的核苷酸單體。

3、引物:是人工合成的短鏈 DNA 片段,能與模板 DNA 的特定區(qū)域互補(bǔ)結(jié)合,引導(dǎo) DNA 聚合酶起始 DNA 鏈的合成,引物的設(shè)計(jì)質(zhì)量和特異性對于 PCR 反應(yīng)能否準(zhǔn)確擴(kuò)增出目標(biāo)片段起著至關(guān)重要的作用。

4、緩沖液:為 PCR 反應(yīng)提供適宜的酸堿度、離子強(qiáng)度等反應(yīng)環(huán)境,保障 DNA 聚合酶等相關(guān)成分能穩(wěn)定發(fā)揮作用,不同的酶配套的緩沖液成分會略有差異,但通常都含有維持 pH 穩(wěn)定的成分以及鎂離子等對酶活性有影響的離子成分。


根據(jù)實(shí)驗(yàn)類型(常規(guī)PCR、qPCR、數(shù)字PCR等),耗材和試劑可能需調(diào)整。建議參考儀器說明書和實(shí)驗(yàn)方案選擇適配產(chǎn)品。

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