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瑞禧:Cys(Npys)-TAT (47-57),F(xiàn)AM-labeled 用于機制驗證或模型構(gòu)建

來源:西安瑞禧生物科技有限公司   2025年10月30日 16:59  

英文名稱:Cys(Npys)-TAT (47-57), FAM-labeled

中文名稱:Cys(Npys)-TAT (47-57) 熒光標記肽

一、分子概述

Cys(Npys)-TAT (47-57),F(xiàn)AM-labeled 是一種經(jīng)過熒光標記和巰基保護修飾的細胞穿透肽(Cell-Penetrating Peptide, CPP),其核心序列源自 HIV-1 病毒轉(zhuǎn)錄激活因子(Trans-Activator of Transcription,TAT)的第47至57位氨基酸片段。該片段以豐富的精氨酸和賴氨酸殘基著稱,能夠促進多種分子跨越細胞膜進入胞質(zhì),從而成為研究細胞攝取、蛋白轉(zhuǎn)運以及納米材料界面修飾的重要工具。通過在N端引入Cys(Npys)(3-Nitro-2-pyridinesulfenyl保護半胱氨酸)以及FAM(5-羧基熒光素)標記,該分子兼具化學可控性與熒光可視化特性,便于在生物化學實驗中進行動態(tài)追蹤與分子交互研究。

二、結(jié)構(gòu)與功能特點

TAT (47–57) 的典型序列為 YGRKKRRQRRR,該結(jié)構(gòu)富含堿性氨基酸,帶有顯著的正電荷,使其能與細胞膜上的陰離子組分(如磷脂或糖胺聚糖)產(chǎn)生強烈的靜電相互作用。Cys(Npys) 的引入為分子提供了一個可逆的巰基保護位點,便于后續(xù)與其他含巰基或馬來酰亞胺基團的分子發(fā)生選擇性偶聯(lián)反應。這一特征使其成為構(gòu)建可控釋放體系、雙功能探針及復合納米體系的理想模塊。

FAM 標記則賦予該肽綠色熒光特征(激發(fā)波長約為 488 nm,發(fā)射波長約為 520 nm),可直接用于熒光顯微鏡、流式細胞術(shù)以及活細胞成像中,實時監(jiān)測肽分子的攝取、分布及降解過程。整體結(jié)構(gòu)設計平衡了化學活性與生物兼容性,在保持穿膜性能的同時提升了可視化與偶聯(lián)靈活性。

三、應用與實驗價值

Cys(Npys)-TAT (47-57), FAM-labeled 在分子與細胞生物學研究中用途廣泛,主要包括:

1、分子遞送研究:可作為載體促進寡核苷酸、小分子藥物、蛋白質(zhì)或納米顆粒進入細胞,用于機制驗證或模型構(gòu)建。

2、活細胞成像:FAM 熒光信號可直觀顯示肽的攝取路徑與胞內(nèi)分布,為研究膜轉(zhuǎn)運機制提供可靠數(shù)據(jù)支持。

3、化學連接橋梁:Cys(Npys) 的保護巰基在溫和條件下可脫保護生成游離硫醇,用于特定化學偶聯(lián)或分子組裝,常用于構(gòu)建生物傳感器或表面修飾層。

4、生物材料修飾:其強穿透性與化學活性使其成為功能化納米載體、聚合物或水凝膠系統(tǒng)的理想修飾單元。

通過這類雙修飾策略,研究者能實現(xiàn)“可視+功能”同步的實驗設計,有助于更精準地理解生物分子在細胞環(huán)境中的行為。

四、物理性質(zhì)與純度

Cys(Npys)-TAT (47-57), FAM-labeled 通常為淺黃色至淡綠色固體粉末,具有良好的水溶性及pH穩(wěn)定性。產(chǎn)品經(jīng)高效液相色譜(HPLC)純化,純度一般可達 ≥95%(HPLC),質(zhì)量由質(zhì)譜(MS)或氨基酸分析驗證。由于含有熒光基團及活性巰基保護結(jié)構(gòu),需避免強光和氧化性環(huán)境以防分解或熒光淬滅。

五、溶解性與配制

該肽可溶于 去離子水、PBS緩沖液或DMSO,具體溶解度取決于實驗需求與最終使用體系。建議使用 0.1–1 mg/mL 濃度配制,溶液可通過無菌濾膜除菌后分裝保存,以保證穩(wěn)定性和可重復性。

Cys(Npys)-TAT (47-57),F(xiàn)AM-labeled

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