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ELISA、WB、Q-PCR采樣及取樣注意事項

來源:上海嶸崴達實業(yè)有限公司   2015年08月10日 14:04  

ELISA、WB、Q-PCR采樣及取樣注意事項

ELISA取樣及運輸注意事項

一、血清提取方法

1.全血促凝管取血,輕輕顛倒兩三次,放置片刻讓全血凝固,凝固后3000轉(zhuǎn)15-30min離心取上清。

2.全血普通EP管取血,室溫放置2h左右,讓其凝固,凝固后3000轉(zhuǎn)15-30min離心取上清。

特別注意:取血清避免震蕩,以防止溶血,溶血會對結(jié)果有影響。

二、樣本取量及運輸

每個指標(biāo)做單孔檢測,一個樣本需取血清30ul,3個復(fù)孔需90 ul,冰盒-20度中短時運輸(小鼠建議采取摘眼球取血,如果血樣有限在試驗方案允許的前提下可以取多只小鼠血樣混合)。

三、樣本編號

樣本標(biāo)號:

組別及樣本標(biāo)號,要在管壁上標(biāo)注清晰,特別注意6,9的區(qū)分,可以使用英文標(biāo)注。切記提供我司樣本清單。


WB、Q-PCR取樣及運輸注意事項

一、細胞收集及保存

1、貼壁細胞胰酶消化后900轉(zhuǎn)5min離心至管底(非貼壁細胞直接離心),棄上清,將細胞凍存與-80度長期保存,-20度,暫時保存。若用于Q-PCR盡量使用滅菌無RNA酶離心管,trizon或RNA樣本保存液中-80度長期保存。

2、組織樣本取樣后立即-80或者液氮保存。后續(xù)用于Q-PCR的取樣后立即存于液氮或者-80度環(huán)境中,或者放于有trizon或RNA樣本保存液的滅菌無RNA酶離心管中-80度保存。

二、樣本運輸

短時2h左右冰袋或者液氮運輸,干冰(干冰可以維持-70度)密封郵寄運輸。

三、樣本編號

樣本標(biāo)號清晰,切記提供我公司樣本清單。


病理實驗取樣及實驗注意事項

1、動物組織提取后(玉米粒大小即可)迅速保存于4%多聚甲醛中固定,管體標(biāo)號,組織塊盡量少帶血液,或可以用多聚甲醛將樣本稍作清洗,常溫保存,常溫運 輸。做電鏡的樣本由2.5%戊二醛固定于15ml離心管內(nèi),樣本直徑小于2mm,常溫保存常溫運輸。提供我公司樣本清單。

2、細胞樣本制作成爬片后PBS浸潤保存與細胞培養(yǎng)板內(nèi),密封常溫運輸。做電鏡的細胞離心收集好后2.5%戊二醛固定,常溫運輸。

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