熒光素標(biāo)記載脂蛋白A1抗體IgG資料

熒光素標(biāo)記載脂蛋白A1抗體IgG資料

抗體效價的檢測：加強免疫一周后，耳緣靜脈采血 
-抗體效價測定可用環(huán)狀沉淀試驗、瓊脂雙向擴散法等方法。前者抗體效價在1:4000以上，后者在1:16以上，即可采血，取血清進(jìn)一步提純。 
舉例2：微量抗原淋巴結(jié)內(nèi)注射免疫家兔 
*一般選擇2.5～3.0kg的新西蘭種公兔 
-先在其兩腳墊注射*福氏佐劑0.2ml（卡介苗每兔合5mg）； 
-10天后，見胭窩淋巴結(jié)腫大，然后將抗原注射至腫大的淋巴結(jié)內(nèi)，*次注射抗原用*福氏佐劑混合乳化； 
g；m-以后每隔20天用不*福氏佐劑乳化抗原，以同樣方法加強2次，各次注射的抗原均為25～50 
-末次注射兩周后兔耳放血測價 （可達(dá)1:128）。 
舉例3：豚鼠和大鼠的免疫 
*指抗原和抗體在同一凝膠內(nèi)都擴散，彼此相遇后形成特異性的沉淀線。 
-將抗原與抗體分別加入同一凝膠板中兩個相隔一定間距的小孔內(nèi)，使兩者進(jìn)行相互擴散，當(dāng)抗原抗體濃度之比相適宜時，彼此相遇形成一白色弧狀沉淀線。 
*優(yōu)缺點：簡便，但敏感性較低，易出現(xiàn)假陰性結(jié)果。 
免疫雙向擴散法的操作步驟 
*將玻璃板用水洗凈后用75％乙醇沖洗，晾干后放在水平臺上備用。 
*將1％agar 融化后，置56℃水浴。 
*在玻璃板上鋪膠，約1.5mm 厚，凝固后打孔（直徑 3rnm），孔間距10mm。 
l 抗血清（抗體預(yù)先作系列倍比稀釋即 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32等比例）。ml 抗原樣品，周圍孔內(nèi)每孔加5m*中心孔加5 
*凝膠板置濕盒內(nèi)，室溫擴散24h。