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上海源葉生物科技有限公司
初級會員 | 第16年
BOC-D-丙氨酸2012/10/13
英文名稱:BOC-D-Alanine其他名稱:N-叔丁氧羰基-D-丙氨酸CAS號:7764-95-6C8H15NO4=189.21含量:≥99.0%比旋光度:+22~+24°熔點:75~80℃性狀:白色或類白色結晶粉末用途:科研、實驗保存:RT
聯(lián)合碳化透析袋技術參數(shù)及處理方法2012/09/22
技術參數(shù):△PH穩(wěn)定范圍:5-9△污染物水平:硫化物△化學兼容性:與很多鹽兼容,比如CaCl2,(NH4)2SO4;還可與分子生物學及酶學中常用的水溶劑、有機溶劑兼容,比如異丙醇、乙醇和丙酮?!鳒囟鹊挚剐裕嚎芍蠓?,可高壓滅菌。△蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于1ng儲存條件:透析袋可存放于10-29度;每次使用后將余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂。透析袋使用前處理方法:1.把透析袋剪成適當長度(10cm左右)的小段。2.取適量透析袋處理液(Fast-TreSolution)稀釋100倍,將透
美國光譜醫(yī)學透析袋說明書2012/09/22
一、截留分子量(MWCO)說明:由于透析膜由海綿狀橫向耦合的聚合物材料構成,截留性能間接的由孔徑等級即截留分子量(MWCO)表示,截留率90%的溶質分子大小可更的表示膜的MWCO。然而,溶質的滲透性亦取決于分子形狀、水合度、離子電荷與極性,我們推薦選擇膜的MWCO為欲截留物質分子量的一半,兩倍于透過物質的分子大小。二、透析袋膜材質說明:1、生物技術纖維素酯(CE)膜生物學惰性和超純的生物技術CE膜提供廣泛的可選孔徑(9種)和尺寸,用于帶電荷分子的分離及大分子純化。3種尺寸中,生物技術CE膜對條件
BOC-L-丙氨酸2012/09/08
英文名稱:BOC-L-Alanine其他名稱:N-叔丁氧羰基-L-丙氨酸CAS號:15761-38-3C8H15NO4=189.21含量:≥99.0%比旋光度:-25±2°熔點:78~85℃性狀:白色結晶粉末用途:用于生化試劑、多肽合成.本產品僅供科研使用保存:RT
DL-丙氨酸|DL-α-丙氨酸2012/09/08
英文名稱:DL-Alanine其他名稱:DL-α-丙氨酸CAS號:302-72-7CH3CH(NH2)COOH=89.09含量:≥98.0%PH:5.5~7.0干燥失重:≤0.20%性狀:白色結晶粉末用途:科研、實驗保存:RT
Spectra/Por透析袋的膜參數(shù)Spectra/Por透析袋的膜參數(shù)2012/09/01
Spectra/Por生物技術等級膜:CE、RC、PVDF備注:PVDF膜透析袋現(xiàn)在廠家已經停產了只有Spectrum公司提供生物技術等級透析膜,來滿足MWCO、膜純度高要求的關鍵應用。由于這些膜的制作過程沒有重金屬污染及硫化物,所以他們都是超純的,無需清潔或預處理。只需用去離子水清洗,使用通用閉合夾,添加樣品即可!為滿足不同實驗室透析需求,Spectrum公司開發(fā)了3種不同生物技術等級膜材質:纖維素酯(CE)、再生纖維素(RC)和聚偏二氟乙烯(PVDF)。生物技術膜的優(yōu)勢1.超純(重要分離)2
小RNA調節(jié)多巴胺能神經元分化2012/09/01
*,中腦多巴胺能神經元的退行性死亡是帕金森病的zui顯著特征,了解其發(fā)育的分子生物學機制對探索帕金森病的發(fā)病機理以及治療帕金森病都有著至關重要。然而,對于胚胎干細胞向多巴胺能神經元的發(fā)育過程的機制至今還不清楚。中科院上海生命科學研究院健康所神經基因組博士研究生楊德華等在樂衛(wèi)東研究員的指導下,通過對于胚胎干細胞向多巴胺能神經元的發(fā)育過程中microRNA表達譜的變化分析,發(fā)現(xiàn)了一些新的microRNA,并且鑒定出其中一個miR-132在多巴胺能神經元發(fā)育的過程中表達顯著變化。進一步研究表明,miR
Science子刊:腦癱在出生后的治療2012/08/18
在動物中進行的一項新的研究報告說,一種以腦中難以接觸到的炎癥細胞為標靶的新的基于納米技術的方法可能被用于治療出生后的腦癱。腦癱是由在子宮中或是在出生頭幾個月中對發(fā)育中的腦造成傷害所引起的一組疾病,它會對許多腦部功能及神經系統(tǒng)的功能造成損傷,zui顯著的是對運動技能的損傷。在對損傷做出反應時,腦子會激活被稱作小膠質細胞和星形膠質細胞的細胞,這些細胞會對損傷進行清理并清除細胞碎片。不幸的是,這些細胞會過度反應并開始破壞正常的周圍組織,導致神經發(fā)炎。目前的消炎藥物必須在腦中繞過無數(shù)的屏障后才能到達小膠
抗感染免疫研究取得新進展2012/08/18
真核生物的天然免疫是抵抗外界病原體入侵的*道防線。天然免疫主要是通過模式識別受體來識別病毒或細菌等外來病原體。Nod樣受體(NLR)是近年來研究發(fā)現(xiàn)的識別胞內菌的模式受體。NLRC5作為Nod樣受體家族中zui大的一個成員,其生理學功能一直不清楚。4月10號,《細胞研究》(CellResearch)雜志在線發(fā)表中科院上海生命科學研究院/上海交通大學醫(yī)學院健康科學研究所錢友存研究組關于NLRC5在抗胞內菌感染過程中的作用研究(NLRC5regulatesMHCclassIantigenpresen
Mi-2抗體自身抗體2012/08/04
1976年在肌炎患者血清中發(fā)現(xiàn)該自身抗體,因而取名為Mi抗體。以牛胸腺提取物為抗原的免疫雙擴散法檢測發(fā)現(xiàn),Mi抗體有兩型,Mi-1型抗體僅僅在低濃度抗原中檢測到,而Mi-2則僅僅在高濃度抗原中能檢測到。致病作用尚未有證據(jù)支持或排除Mi—2抗體有致病作用。動物模型研究顯示,用重組的抗原片段免疫動物,僅產生相應片段的抗體,但未見動物產生自身免疫病。
Mi-2抗體的檢測方法2012/08/04
*的檢測方法是放射免疫沉淀法。在以Hela細胞為抗原的IP法中能檢測多個陽性條帶,包括240、150、65、63kD,但不能檢測75、50、34kD蛋白。如果以Hep-2細胞提取物為抗原,某些條帶檢測不到。以親和純化的抗原建立的ELISA也是常用檢測方法,但有可能出現(xiàn)假陰性結果。以天然的MF2作為抗原的蛋白質印跡法結果不可靠,改用重組的Mi-2抗原多肽,將大大提高蛋白質印跡法檢測的敏感性。此外,IIF也是常用的篩查方法。Mi-2抗體陽性的熒光圖形是核漿斑點狀著染,有時易與U1—RNP抗體相混。
放射受體測定法測定轉化生長因子TGFβ2012/07/28
1.培養(yǎng)上清中TGF-β的激活測定前必須使無血清培養(yǎng)上清中TGF-β激活。激活有熱激活和酸激活兩種方法,熱激活法是通過將標本加熱至80℃5min而激活。酸激活法的步驟如下:①在200uL無血清培養(yǎng)上清中加6mol/LHCl1.5ul,使pH≤3.0,22℃孵育30rain;②用30ul中緩沖液中和,調至pH7.0~7.4。若pH值不在此范圍,可加少量1:10稀釋的6mol/LHCl或中和緩沖液調整(中和緩沖液為6mol/LNaOH和1mol/LHEPES等量混合而成);③用于胸腺細胞增殖法測定前
集落刺激因子(CSF)的測定2012/07/28
(一)生物活性檢測法1.骨髓細胞集落形成法(1)用含有10%FCS的RPMI-1640培養(yǎng)液制備0.3%~0.4%的軟瓊脂。(2)用淋巴細胞分層液分離得到骨髓單個核細胞,以3×104—5×104細胞/mL接種于軟瓊脂中,鋪在無菌平皿內;37~C,5%C02溫箱中培養(yǎng)14d。(3)顯微鏡下計數(shù)大于或等于40個細胞的集落形成數(shù),計算出集落刺激活力(colonystimulatingactivity,CSA),計算公式如下:CSA=集落形成數(shù)/105骨髓單個核細胞2.依賴株3H-TdR摻人法GM-CS
膜腫瘤壞死因子(TNF) 生物學活性檢測2012/07/07
多聚甲醛固定后的效應細胞或直接用效應細胞的胞膜(其膜表面有跨膜型TNF-a),按一定比例加入靶細胞,如L929,以觀察跨膜型TNF-a對靶細胞的細胞毒活性。1.材料①L929細胞株;②1%多聚甲醛溶于RPMI-1640培養(yǎng)液中;③PBS,pH7.2;④0.5%MFIT。2.多聚甲醛固定法(1)以105/孔效應細胞置96孔培養(yǎng)板培養(yǎng),可加用刺激物,如LPS(100ns/mL)刺激一定時間后,棄上清。(2)PBS洗一次后,用1%多聚甲醛RPMI—1640室溫下固定15—20min,用PBS洗數(shù)次以去
FACS分析檢測跨膜型腫瘤壞死因子(TNF)2012/07/07
以下簡單介紹用FACS分析檢測跨膜型TNF。1.材料①含2%人血清,0.1%疊氮鈉的PBS;②FITC標記的TNF單克隆抗體;③羊或兔抗TNF多克隆抗體及F1TC標記的羊抗兔IzC。2.操作步驟(1)單核細胞加或不加激活劑,37℃培養(yǎng)一定時間。(2)2000rpm離心10min,棄上清。(3)用含2%人血清/0.1%疊氮鈉的PBS懸浮細胞。(4)將105細胞廳L0口人圓底96孔培養(yǎng)板,并加FITC標記的TNF單抗冰上放置20min。如無FITC標記的TNF單抗,可按(5)~(7)步驟操作。(5)
細胞因子mRNA表達的檢測2012/06/30
常用的方法有Northern印跡雜交,斑點印跡雜交,RT-PCR,原位雜交與原位PCR,RNA半壽期的檢測,進行中的轉錄分析(run。nassay)等。(一)Northern印跡雜交將RNA變性及電泳分離后,將其轉移到固相支持物(如尼龍膜)上,再用某一細胞因子的標記核酸探針雜交,以檢測相應細胞因子mRNA的分子量及其在細胞內的積累量。細胞因子大都是在某種刺激因素的影響下,使其mRNA轉錄活性增強,從而導致細胞內mRNA積累增加。但用細胞總RNA作Northern印跡雜交,其結果不能*反映mRNA
再生式序列復制反應直接擴增RNA靶序列2012/06/30
再生式序列復制反應(self-sustainedsequencereplicationreaction,3SR)是一項與PCR類似的新技術。它利用3種酶(AMV逆轉錄酶、RNA酶H及T7RNA聚合酶)的活性,進行體外mRNA的擴增。所用的引物A與待檢的RNA3’端互補,并在引物的5’端含一個T7RNA聚合酶的識別結合位點;引物B則與引物A引導合成的cDNA的3’端互補。3SR的基本原理是,在AMV逆轉錄酶的作用下,以靶mRNA為模板,在引物A的引導下合成cDNA*鏈,形成RNA/DNA雜交體。而
ELISA的操作要點2012/06/16
的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。1標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液、分泌物和排泄物)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELI
ELISA的概念、原理、操作步驟2012/06/16
ELISA的概念、原理、操作步驟ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫(yī)學科學的許多領域。(一)原理ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后
亞適劑量抗IsM抗體刺激B細胞增殖法檢測IL-42012/06/09
亞適劑量抗IgM抗體對B淋巴細胞的刺激較弱,當加人IL-4時,B淋巴細胞對亞適劑量抗IgM抗體刺激表現(xiàn)出明顯的DNA合成增加,3H-TdR摻人量與IL-4含量相關。(1)小鼠脾臟B細胞懸液的制備1)取BALB/c或C57BL/6小鼠,常規(guī)方法分離脾臟淋巴細胞。用Hanks液洗2次;再用10%NBS-IMDM培養(yǎng)液調整細胞濃度為1X107~2X107/mL。2)去除粘附細胞:將上述脾細胞懸液置24孔培養(yǎng)板,每孔1~1.5mL,置37cC,5%C02溫箱中培養(yǎng)1h;將細胞懸液移至另外培養(yǎng)孔內,繼續(xù)培
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