elisa試劑盒供應(yīng)商配對抗體的辦法2018/08/07

elisa試劑盒供應(yīng)商單克隆抗體制備時很多朋友會遇到這樣的問題，即咱們免疫用的蛋白為原核表達蛋白而意圖蛋白是真核蛋白或病毒等，由于沒有規(guī)范品咱們做出來的抗體沒有辦法用規(guī)范品來驗證是否與其發(fā)作反響，終究導(dǎo)致咱們做出的是無用抗體。以下內(nèi)容為我公司試驗室技能總結(jié)的幾種辦法供咱們參閱，期望對咱們有所協(xié)助。若要檢測的抗原為某種新的病毒ELISA試劑盒辦法：1、很多做出該病毒某個蛋白的單克隆抗體；2、很多收集該病毒疑似感染動物或人血液，用PCR的辦法進一步斷定每份血液是否真的有該病毒存在；3、將你做出的很多

腫瘤細胞具有更多分子和遺傳上的相似性2018/08/02

腫瘤細胞研究結(jié)果表明相對于癌癥起源的組織類型，如乳房腎臟、膀胱等，相同癌癥起源的細胞類型具有更多分子和遺傳上的相似性。這一研究組發(fā)現(xiàn)在十個癌癥患者中至少有一個能通過這種新系統(tǒng)分類到不同的癌癥類型中，而且Benz認為如果他們下一輪進行更多的樣品，和腫瘤類型的分析，將會有更多的腫瘤需要重新分類，他預(yù)計下一輪將進行超過20種不同腫瘤類型的分析?！翱紤]到這種多平臺類型基因組分析的潛力，我們還只是分析了冰山的一角。未來可能還有多達30%或50%的癌癥需要被重新歸類”。在這項研究中，引人注目的發(fā)現(xiàn)就是膀胱癌

原代細胞與真核細胞的細胞分裂過程不同2018/07/31

原代細胞分裂是一個非常復(fù)雜的過程，包括顯微鏡下可見的細胞形態(tài)變化和不可見的分子水平變化。在細胞分裂開始之前，母細胞必須依次完成一系列生化、生理和形態(tài)學(xué)的變化過程。如：母細胞生長到適當大小，并完成所有重要細胞組分的復(fù)制，以便在細胞分裂對按照比例分配到子細胞中去。這些過程均在分裂間期完成。應(yīng)該再次強調(diào)的是：細胞分裂是一個連續(xù)的過程。迄今為止，在真核細胞中已發(fā)現(xiàn)了無絲分裂(amitosis)、有絲分裂(mitosis)和減數(shù)分裂(meiosis)等細胞分裂方式，其中，無絲分裂又稱為直接分裂(direc

原代細胞消化傳代的廣泛應(yīng)用2018/07/26

作為各類種屬的原代細胞供應(yīng)商，一般客戶咨詢血清購買時，我們都會推薦牛血清。而我公司zui為熱銷的血清產(chǎn)品中莫過于胎牛血清了，那么為何牛血清在細胞培養(yǎng)實驗中如此受寵呢？據(jù)技術(shù)員分析，主要原因有這五個方面：1.提供結(jié)合蛋白：作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì)，在細胞代謝過程中起重要作用。2.提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。3.提供基本營養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生等是細胞生長必須的物質(zhì)。4.提供激素和各種生長因子。5.對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用。針對第五個原因，我們來重點談?wù)?。有一些細胞，如?nèi)皮細

原代細胞取用方法2018/07/24

原代細胞試劑一般裝在帶膠木塞的廣口瓶中，液體試劑則盛在細口瓶中（或滴瓶中），見光易分解的試劑（如硝酸銀）應(yīng)裝在棕色瓶中，每一種試劑都貼有標簽以表明試劑的名稱、濃度、純度。（實驗室分裝時，固體只標明試劑名稱，液體還須注名明濃度）。取用試劑規(guī)則為了達到準確的實驗結(jié)果，取用試劑時應(yīng)遵守以下規(guī)則，以保證試劑不受污染和不變質(zhì)：（1）試劑不能與手接觸。（2）要用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑，不準用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后，應(yīng)將工具洗凈（藥勺要擦干）后，方可取用另一種試劑。（3）試劑取

原代細胞培養(yǎng)目的與用途2018/07/19

原代細胞培養(yǎng)是指從體內(nèi)組織取出細胞在體外模擬體內(nèi)環(huán)境下，使其生長繁殖，并維持其結(jié)構(gòu)和功能的一種培養(yǎng)技術(shù)。細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)物可以是單個細胞，也可以是細胞群。細胞培養(yǎng)目的與用途藥物研究與開發(fā)（1）新藥篩選：如化學(xué)合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定等。（2）疫苗研究與開發(fā)：如病毒性疫苗的研究與開發(fā)（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、腫瘤疫苗（多肽疫苗）等。（3）基因工程藥物研究與開發(fā)：如干擾素研究與開發(fā)，細胞生長因子研究與開發(fā)等。（4）細胞工程藥物研究與開發(fā)：生物活性多肽研究與開發(fā)，人參皂甙、紫杉醇等

如何誘導(dǎo)原代細胞往正確的方向分化問題？2018/07/12

將oct4、Sox2、Klf4、c-myc四個基因插入到成體原代細胞DNA中重編程細胞恢復(fù)到胚胎干細胞狀態(tài)，由此建立了iPS細胞。這些細胞可以向胚胎干細胞一樣，轉(zhuǎn)變?yōu)閹缀跛械慕M織類型。為此,山中伸彌在2011年獲得諾貝爾獎。雖然iPS細胞有潛力發(fā)育為任何組織器官，但如何誘導(dǎo)它們往正確的方向分化問題尚未解決。由中科院上海生命科學(xué)院/上海交大醫(yī)學(xué)院健康科學(xué)研究所金穎教授帶隊的關(guān)于“基于誘導(dǎo)多能干細胞技術(shù)的若干重大疾病模型與機理研究”的“973”科技部重大科學(xué)研究項目，就是希望能找到誘導(dǎo)iPS細胞的

細胞系在復(fù)制之前需要“理個發(fā)”2018/07/05

我們的許多細胞系都裝備了一條毛茸茸的“天線”，將外部環(huán)境相關(guān)的信息傳遞給細胞，科學(xué)家們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，這些所謂的原纖毛的出現(xiàn)和消失，都是與細胞復(fù)制過程（稱為有絲分裂）同步的。現(xiàn)在，約翰霍普金斯大學(xué)的細胞生物學(xué)家報道稱，他們進一步闡釋了“這種‘脫發(fā)’和細胞復(fù)制，是如何通過戲劇性的纖毛削剪（科學(xué)們稱之為斬首）而相互關(guān)聯(lián)的”。研究人員說，這一新信息是更好地理解“細胞如何決定進行有絲分裂”的關(guān)鍵，這一過程對于生物體的發(fā)育、組織的維持和癌癥的形成，是*的。他們也希望，這項工作能揭示纖毛相關(guān)疾病，如多囊*病，以及

細胞株凍存技術(shù)2018/07/03

細胞株實驗室低溫保存設(shè)備包括：液氮保存箱、液氮罐、-140℃/-150℃深冷低溫保存箱、-86℃超低溫冰箱、程控降溫儀、低溫冰箱（-20℃、-30℃、-40℃）、藥品保存箱、疫苗保存箱、血庫冰箱、層析柜、防爆冰箱、防火冰箱等。檢驗冰箱可靠性和制冷能力的方法：1、常規(guī)冰箱放置溫度計；2、超低溫冰箱放置加熱器、大量樣品或反復(fù)開門很多化合物都可以作為凍存保護劑，它們既可以單獨使用也可以聯(lián)合使用，例如糖、血清和去污劑。雖然凍存沒有準則，但是大家普遍認為二甲基亞砜（DMSO）和甘油是保護活細胞和組織使用z

細胞株究竟如何通過“握手”區(qū)分敵我2018/06/28

細胞株是免疫系統(tǒng)中的重要安全守衛(wèi)，zui近一項研究發(fā)現(xiàn)它們能夠使用一種類似"握手"的方式區(qū)分它們遇到的細胞究竟是朋友還是敵人。這項發(fā)表在學(xué)術(shù)期刊PNAS上的研究由埃默里大學(xué)的物理生化學(xué)家KhalidSalaita領(lǐng)導(dǎo)，他主要從事細胞活動中的機械力研究。一直以來人們已經(jīng)熟知了T細胞對抗原遞呈細胞遞呈的抗原肽的識別過程，但是T細胞究竟如何區(qū)分抗原配體上的微小修飾以及T細胞如何決定是否做出應(yīng)答一直沒有得到*了解。由于T細胞具有很高的機動性，并且抗原識別過程發(fā)生在T細胞與抗原遞呈細胞產(chǎn)生物理接觸的膜連接

原代細胞培養(yǎng)中不要使用抗生素的原因2018/06/26

原代細胞由于過濾技術(shù)的提高和超凈臺質(zhì)量的改進，在規(guī)范的細胞培養(yǎng)操作過程中引進污染的機會已經(jīng)被大大降低了。所以比較合理的建議是，在常規(guī)的細胞培養(yǎng)中不要使用抗生素。只有在培養(yǎng)污染源很多（比如組織培養(yǎng)），或者培養(yǎng)非常珍貴的細胞株時才使用抗生素。抗生素雖然減少了可以觀察到的細菌、酵母等微生物的污染機會，卻會增加支原體、病毒等隱性污染的機會。因為細胞培養(yǎng)中污染主要來源于空氣中的微粒和汽霧，而這些微粒和汽霧可以同時攜帶支原體、病毒和其他微生物。當抗生素使用時，可見污染被抑制而隱性污染又沒被注意到，這樣支原體

原代細胞培養(yǎng)的起源2018/06/21

原代細胞是在標準條件下用有限或連續(xù)細胞系開展工作的.所以,考慮培養(yǎng)物中的細胞成分非常重要.如細胞在誘導(dǎo)條件下表現(xiàn)分化特征,要么意味著培養(yǎng)的細胞是成熟的,保持其持續(xù)合成特殊蛋白質(zhì)的能力就夠了;要么意味著培養(yǎng)細胞由前體細胞或干細胞組成,這些細胞有增殖能力,美工維持未分化狀態(tài),當有了合適的誘導(dǎo)條件,其中的一些或全部細胞會成熟并分化.有指導(dǎo)意義的考慮是,把培養(yǎng)物看成是由多能干細胞,未分化的定向前體細胞和成熟細胞組成的平衡狀態(tài),并且,這種平衡可隨環(huán)境條件變化而改變.在細胞密度較低的情況下,連續(xù)傳代可促進細

原代細胞新打印技術(shù)存活率高2018/06/19

研究人員開發(fā)出一種可將原代細胞打印到任何表面和幾乎任何形狀上的技術(shù)，且整個過程中幾乎所有的細胞仍能存活。新技術(shù)猶如中國古代木刻版印刷術(shù)和現(xiàn)在兒童橡皮印章玩具，與噴墨打印方法有所不同。這種方法在短短半個小時內(nèi)可產(chǎn)生2D細胞陣列，打印出的細胞緊密到接近5微米（大多數(shù)動物細胞在10到30微米寬），并允許使用許多不同類型的細胞。研究人員將這種技術(shù)命名為批量細胞打?。˙loC打?。娔蛴》椒ù蛴《S和三維細胞已基本成功，但有時只有一半細胞在打印過程中存活。秦立冬說：“基于噴墨的細胞打印會使許多細胞受損

原代細胞分析之全攻略2018/06/14

原代細胞轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)NanoStringTechnologies的科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，細胞群體的RNA平均表達水平不一定與群體中單個細胞的RNA表達相同。例如，有些基因持續(xù)在低水平表達，而另一些則在短時間內(nèi)大量表達。對宏觀測定而言，這樣的表達模式被平均化。該公司*的數(shù)字表達譜分析系統(tǒng)能直接對單個RNA分析進行計數(shù)，zui多可分析單細胞中的800個不同分子。這是利用nCounterSingleCellGeneExpressionAssay中的分子條形碼來實現(xiàn)的，它識別特定的RNA分子。單細胞樣品在

避免污染的原代細胞培養(yǎng)方法2018/06/12

培養(yǎng)原代細胞常規(guī)方法需用二氧化碳溫箱，且為保持箱內(nèi)二氧化碳氣5%～10%的濃度，需持續(xù)輸入二氧化碳氣體。為此，箱內(nèi)的培養(yǎng)瓶蓋不能擰緊以便二氧化碳氣體自由進出。*步，配制1L培養(yǎng)液。培養(yǎng)基中含有酚紅指示劑，偏堿時液體為深紅或紫色，偏酸時則呈黃色。取配1L培養(yǎng)液的粉劑培養(yǎng)基，加入750ml三蒸水或去離子水，搖勻(一般培養(yǎng)液呈橘紅色)；再加入碳酸氫鈉1～1．1g，至*溶解(呈深紅色)；zui后再加三蒸水或去離子水至1L止。第二步，插吸管于配好的培養(yǎng)液內(nèi)，通入二氧化碳氣體。隨著二氧化碳氣的融人，液體逐漸

原代細胞被支原體污染的危害2018/06/07

為什么有些原代細胞實驗無法重復(fù)？為什么有的細胞在相當長的時間里，都養(yǎng)不到好的狀態(tài)？為什么實驗室中，超過一株以上的細胞都時好時壞？細胞生長緩慢、細胞變形、碎片增加、懸浮細胞容易成團、培養(yǎng)基提前變色、鏡下發(fā)現(xiàn)有小黑點……如果排除了其他試劑選擇不當、細胞株老化、細菌污染等原因，而仍有上述一種或幾種情況，則高度提示——你的細胞可能被支原體污染了！支原體污染普遍存在據(jù)美國數(shù)據(jù)統(tǒng)計，細胞發(fā)生支原體污染的幾率在70%以上。同時，由于支原體直徑很小，僅在180nm~350nm之間，只有通過電鏡才能看到，不易被實

細胞株污染的清除2018/06/05

培養(yǎng)細胞株一經(jīng)污染，多數(shù)較難處理。如果污染細胞價值不大，宜棄之;在尋找原因后*消毒操作室，復(fù)蘇或重新購置細胞，再培養(yǎng)。若污染細胞價值較大，又難于重新得到，可采取以下辦法清除。一、細菌和真菌的清除1、使用抗生素抗生素對殺滅細菌較有效。聯(lián)合用藥比單獨用藥效果好。預(yù)防用藥比污染后再用藥效果好。預(yù)防用藥一般用雙抗生素，污染后清除用藥需采用大于常用量5～10倍的沖洗法，于加藥后作用24～48小時，再換常規(guī)培養(yǎng)液。此法在污染早期有效。二、支原體的清除1、用MRA處理用MRA(MycoplasmaRemova

細胞株增殖實驗服務(wù)2018/05/31

細胞株增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖、遺傳的基礎(chǔ)，是細胞zui基本的生理活動。生長因子、激素及癌基因產(chǎn)物等均可誘導(dǎo)細胞的增殖或抑制細胞的增殖，通過影響細胞周期、誘導(dǎo)細胞凋亡而實現(xiàn)。MTT檢測細胞增殖MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide。MTT比色法是常用的檢測細胞存活和生長的方法之一，其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲瓚并沉積在細胞中，而死細胞無此功

細胞株狀態(tài)不好的解決方法2018/05/29

細胞株是生物體形態(tài)結(jié)構(gòu)和生命活動的基本單位。通常認為細胞是人體的zui小單位，它是由許多更小的具有自身功能的結(jié)構(gòu)組成。盡管人類細胞大小不等，但所有的細胞均很小。即使是zui大的細胞如受精卵，也是肉眼所不能見到的。細胞狀態(tài)不好，可能是血清中有黑膠蟲。解決方法如下：1.換好一點的血清。2.用無菌的PBS洗幾次，可一定程度上緩解。注意好實驗環(huán)境要，保持細胞間整個環(huán)境的潔凈度。3.換用進口的一次性塑料培養(yǎng)瓶。4.建議清理無菌室所有物品，重新滅菌，用KMnO4熏蒸，按使用無菌室做，細胞重新復(fù)蘇。5.在換液

原代細胞試探性的開端2018/05/24

研究人員成功培養(yǎng)出來自小鼠胚胎的原代細胞。他們很快意識到這項發(fā)現(xiàn)的巨大潛力，因為這些細胞既能自我復(fù)制，又可被推動變成身體200余種細胞類型中的任何一種。不過，此項技術(shù)并不容易在靈長類動物身上實現(xiàn)。威斯康辛大學(xué)麥迪遜分校生物學(xué)家JamesThomson花了14年時間，才將該技術(shù)成功用于猴子。3年后，Thomson利用生育治療中未使用的捐贈胚胎，創(chuàng)建了人類ES細胞系。此項發(fā)現(xiàn)激起了一場道德風暴。批評者——大多數(shù)來自宗教界——認為胚胎構(gòu)成了人類的一部分，并且想阻止任何涉及破壞胚胎的研究。2001年，美