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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第9年
BIU-87人膀胱癌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作步驟2025/07/24
BIU-87人膀胱癌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作步驟細(xì)胞傳代與擴(kuò)增當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí)，需進(jìn)行傳代操作。棄去舊培養(yǎng)基，用預(yù)冷的PBS輕柔洗滌2次以去除殘留血清。加入1mL0.25%胰蛋白酶（含EDTA），37℃孵育1-2分鐘，顯微鏡下觀察細(xì)胞回縮變圓后，立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。吹打制成單細(xì)胞懸液，按1:3至1:5比例分裝至新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)充適量培養(yǎng)基后置于孵箱繼續(xù)培養(yǎng)。注意記錄傳代次數(shù)，避免細(xì)胞狀態(tài)因過(guò)度傳代而下降。細(xì)胞凍存與復(fù)蘇凍存：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，消化離心后棄上清，用預(yù)冷的凍存液（90%血清
腎母細(xì)胞瘤蛋白重組兔單抗操作要點(diǎn)2025/07/17
腎母細(xì)胞瘤蛋白重組兔單抗操作要點(diǎn)在完成上述操作步驟后，還需要特別注意以下幾個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)：1.抗體孵育后的洗滌步驟至關(guān)重要。建議使用預(yù)冷的PBS-T緩沖液（含0.1%Tween-20）進(jìn)行3次洗滌，每次5分鐘，置于搖床上輕柔振蕩。這一步驟能有效降低非特異性結(jié)合，提高信噪比。2.對(duì)于免疫組化實(shí)驗(yàn)，抗原修復(fù)的溫度控制需要精確把握。建議采用微波修復(fù)法時(shí)，將修復(fù)液（pH6.0檸檬酸鈉緩沖液）預(yù)熱至95℃±2℃，保持15分鐘后自然冷卻至室溫。溫度過(guò)高可能導(dǎo)致蛋白結(jié)構(gòu)破壞，過(guò)低則影響修復(fù)效果。3.二抗孵育環(huán)節(jié)應(yīng)
大鼠分泌型免疫球蛋白AELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)2025/07/07
大鼠分泌型免疫球蛋白AELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5.底物請(qǐng)避光保存。6.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).7.所有
文氏密螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法2025/06/25
文氏密螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法包括以下步驟：(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。其中步驟(1)為：將參照基因與待
鴨源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒使用方法2025/05/29
鴨源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒使用方法：測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱(chēng)為酶放大體系。1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。24μg/ml5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12μg/ml4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液6μg/ml3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液3μg/ml
小鼠肝星狀細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基操作注意事項(xiàng)2025/05/15
小鼠肝星狀細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基的操作需嚴(yán)格遵循無(wú)菌規(guī)范，以確保細(xì)胞活性和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性。以下為關(guān)鍵注意事項(xiàng)的補(bǔ)充說(shuō)明：**培養(yǎng)基預(yù)處理**解凍后的培養(yǎng)基需在4℃避光保存，使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫（25±2℃），避免溫度驟變導(dǎo)致蛋白沉淀。若發(fā)現(xiàn)絮狀物，需立即以1000rpm離心5分鐘去除雜質(zhì)，切勿直接過(guò)濾，以防生長(zhǎng)因子損失。**補(bǔ)液策略?xún)?yōu)化**換液時(shí)建議保留原培養(yǎng)基30%-50%，尤其在高密度培養(yǎng)階段（細(xì)胞融合度＞80%），可減少細(xì)胞應(yīng)激。添加5mM谷氨酰胺增強(qiáng)劑時(shí)，需分次混勻（每次添加1ml震蕩
人科研63PCR檢測(cè)試劑盒準(zhǔn)備試劑與收集血樣2025/04/15
人科研63PCR檢測(cè)試劑盒準(zhǔn)備試劑與收集血樣：雙重核酸試劑盒（熒光PCR法）1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成1200ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在管中加入1200ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如
丹毒桿菌（SER）核酸檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素2025/03/26
丹毒桿菌（SER）核酸檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素：參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：①引物長(zhǎng)度：15-30bp，常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度：以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。③引物堿基：G+C含量以40-60
豬腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞注意事項(xiàng)2025/03/19
豬腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞注意事項(xiàng)在培養(yǎng)豬腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的過(guò)程中，除了基礎(chǔ)的細(xì)胞培養(yǎng)技巧和注意事項(xiàng)外，還有一些特別的細(xì)節(jié)需要特別關(guān)注。首先，由于豬腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞來(lái)源于動(dòng)物腦組織，因此其生物安全性需要高度重視。在采集、處理和培養(yǎng)過(guò)程中，必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范，以防止細(xì)菌、病毒等微生物的污染。同時(shí)，對(duì)于廢棄的細(xì)胞培養(yǎng)物和實(shí)驗(yàn)器材，也需要按照生物安全規(guī)范進(jìn)行妥善處理。其次，細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性對(duì)于豬腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化至關(guān)重要。溫度、濕度、pH值、氣體成分等環(huán)境因素都需要控制在適宜的范圍內(nèi)。此外
人水通道蛋白-2elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)2025/03/12
人水通道蛋白-2elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitativereal-timePCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
雞一氧化氮（NO）elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):2025/02/27
雞一氧化氮（NO）elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5.底物請(qǐng)避光保存。6.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).7.所有樣品
B類(lèi)清道夫受體2ELIS檢測(cè)試劑盒?樣本處理及要求2025/02/08
B類(lèi)清道夫受體2ELIS檢測(cè)試劑盒樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液
大鼠阿立新A(Orexin A)elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)2025/01/22
大鼠阿立新A(OrexinA)elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5.底物請(qǐng)避光保存。6.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒注意事項(xiàng)2025/01/16
大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5.底物請(qǐng)避光保存。6.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).7.所有樣品，
Human MIGF Elisa試劑盒注意事項(xiàng)2024/12/18
HumanMIGFElisa試劑盒注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5.底物請(qǐng)避光保存。6.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).7.所有樣品，洗
大鼠維生素B12（VB12）ELISA免費(fèi)代測(cè)試劑盒?操作注意事項(xiàng)2024/12/04
大鼠維生素B12（VB12）ELISA免費(fèi)代測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng):1．試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。2．實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中
神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞；H4操作步驟2024/11/27
神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞；H4操作步驟:1、貼壁細(xì)胞的消化①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。②加入少量生物Trypsin-EDTAsolution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置0.5～2min，不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入Tryps
大鼠高香草酸elisa試劑盒樣品收集、處理及保存2024/11/22
大鼠高香草酸elisa試劑盒樣品收集、處理及保存：1.細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。2.細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml左右，通過(guò)反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。3.血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。4.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20分鐘后，以1000×g離
大鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞操作注意事項(xiàng)2024/11/01
大鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞操作注意事項(xiàng)：在進(jìn)行大鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞操作時(shí)，還需特別注意以下幾點(diǎn)，以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和安全性。首先，實(shí)驗(yàn)環(huán)境的無(wú)菌控制至關(guān)重要。操作前，應(yīng)嚴(yán)格消毒實(shí)驗(yàn)臺(tái)面和所需器械，佩戴無(wú)菌手套，并在超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行操作，以防止細(xì)菌、真菌等微生物的污染。同時(shí)，保持實(shí)驗(yàn)室的通風(fēng)良好，減少空氣中的塵埃和微生物含量。其次，細(xì)胞的分離與培養(yǎng)過(guò)程需細(xì)致入微。在分離冠狀動(dòng)脈時(shí)，應(yīng)確保操作輕柔，避免對(duì)血管造成不必要的損傷，從而影響成纖維細(xì)胞的活性。培養(yǎng)過(guò)程中，要密切關(guān)注細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，及時(shí)更換培養(yǎng)
牛蛙生長(zhǎng)激素（GH） ELISA免費(fèi)代測(cè)試劑盒操作步驟2024/10/22
牛蛙生長(zhǎng)激素（GH）ELISA免費(fèi)代測(cè)試劑盒操作步驟：1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第
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