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上海昆盟生物科技有限公司
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分子互作實(shí)驗(yàn)CLIP交聯(lián)免疫共沉淀2025/07/14
一、技術(shù)簡介CLIP(Cross-linkingimmunoprecipitation，交聯(lián)免疫共沉淀）通過結(jié)合UV交聯(lián)和免疫共沉淀的方法來分析蛋白與RNA相互作用的結(jié)合位點(diǎn)。二、技術(shù)原理CLIP技術(shù)利用紫外線照射使細(xì)胞內(nèi)的RNA與RNA結(jié)合蛋白（RBP）發(fā)生共價(jià)交聯(lián)，隨后通過免疫沉淀的方法富集與特定RBP結(jié)合的RNA片段，再經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄和高通量測序等步驟，獲取RBP在體內(nèi)的RNA結(jié)合位點(diǎn)和結(jié)合序列信息。三、應(yīng)用場景1.蛋白質(zhì)-RNA相互作用研究：確定特定蛋白質(zhì)在體內(nèi)的RNA結(jié)合位點(diǎn)和結(jié)合序列，揭
分子互作實(shí)驗(yàn)RIP（RNA免疫沉淀）2025/07/14
一、技術(shù)簡介RIP（RNAImmunoprecipitation，RNA免疫沉淀）技術(shù)是一種用于研究細(xì)胞內(nèi)RNA與蛋白質(zhì)相互作用的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)方法，能夠揭示RNA結(jié)合蛋白（RBP）在轉(zhuǎn)錄后調(diào)控中的功能機(jī)制。二、技術(shù)原理RIP利用針對目標(biāo)蛋白的抗體把相應(yīng)的RNA-蛋白復(fù)合物沉淀下來，通過分離純化，對結(jié)合在復(fù)合物上的RNA進(jìn)行RT-PCR驗(yàn)證或測序分析，結(jié)果更具生物學(xué)說服力。三、應(yīng)用場景1.基礎(chǔ)機(jī)制：解析RNA結(jié)合蛋白（如AGO2、Polycomb復(fù)合物）的功能及RNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。2.疾病研究：比較疾病與
分子互作實(shí)驗(yàn)ChIP染色質(zhì)免疫共沉淀2025/07/10
一、技術(shù)簡介ChIP（染色質(zhì)免疫共沉淀）是一種研究蛋白質(zhì)與DNA相互作用的關(guān)鍵技術(shù)，廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)鑒定、表觀遺傳修飾分析等領(lǐng)域。二、技術(shù)原理利用抗原抗體的特異性結(jié)合，將與目的蛋白相結(jié)合的DNA片段沉淀下來，能夠真實(shí)地反映結(jié)合在DNA序列上的調(diào)控蛋白。三、應(yīng)用場景1.轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究：鑒定轉(zhuǎn)錄因子（如p53、NF-κB）的DNA結(jié)合位點(diǎn)。2.表觀遺傳學(xué)：分析組蛋白修飾（如H3K27me3）在基因沉默中的作用。3.疾病機(jī)制：探索癌癥中異常蛋白（如MYC）的基因組結(jié)合模式。4.可與qpcr、s
分子互作實(shí)驗(yàn)IP/CO-IP免疫共沉淀2025/07/10
一、技術(shù)簡介IP（免疫沉淀，Immunoprecipitation）和Co-IP（免疫共沉淀，Co-Immunoprecipitation）是研究蛋白質(zhì)功能及相互作用的核心技術(shù)，廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域。二、技術(shù)原理IP通過特異性抗體與目標(biāo)蛋白結(jié)合，利用抗體將靶標(biāo)蛋白（即抗原）分離出來，從而檢測某一種蛋白的表達(dá)情況；而CO-IP是在IP基礎(chǔ)上，驗(yàn)證蛋白質(zhì)間的相互作用。通過捕獲一個(gè)蛋白（誘餌蛋白），檢測與其結(jié)合的互作蛋白（靶蛋白），從而特異性富集所研究的目的蛋白，進(jìn)而研究復(fù)合物中與已知
基于生姜衍生脂質(zhì)納米載體（GDNVs）的阿霉素遞送系統(tǒng)：新型結(jié)腸癌治療策略2025/03/05
本研究作者開發(fā)了一種由生姜衍生脂質(zhì)制成的納米載體（GDNV），用于遞送阿霉素（Dox）治療結(jié)腸癌。作者研究發(fā)現(xiàn)，GDNV能被結(jié)腸癌細(xì)胞有效吸收，并在200μmol/l濃度下表現(xiàn)出優(yōu)異的生物相容性，相比之下，陽離子脂質(zhì)體會抑制細(xì)胞增殖并增加細(xì)胞凋亡。GDNV可高效負(fù)載Dox，且藥物釋放具有更好的pH依賴性。通過與靶向配體葉酸偶聯(lián)，GDNV可將Dox精準(zhǔn)遞送至結(jié)腸26腫瘤，顯著增強(qiáng)化療效果。該研究展示了天然來源納米顆粒作為治療載體的潛力，有望減輕傳統(tǒng)合成納米顆粒的潛在問題。該研究最后被作者以題名為E
SCXN納米顆粒：腸道菌群調(diào)節(jié)與化療聯(lián)合治療結(jié)直腸癌的創(chuàng)新策略2025/01/13
胃腸道微生物群會影響結(jié)直腸癌（CRC）的治療效果，與傳統(tǒng)干預(yù)手段相比，將益生元輸送到腸道是一種更可控的腸道微生物群調(diào)節(jié)治療方法。本文作者利用益生元xylan-硬脂酸偶聯(lián)物（SCXN）構(gòu)建了一種負(fù)載卡培他濱的納米顆粒。成功在NatureCommunications（IF=14.7，1區(qū)）發(fā)表了以題名為Combininggutmicrobiotamodulationａndchemotherapybycapecitabine-loadedprebioticnanoparticleimprovescol
基于葡聚糖硫酸鹽納米光敏劑靶向腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞的光動(dòng)力抗癌療法2024/11/21
研究成果：腫瘤中存在的腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）的M2樣表型促進(jìn)腫瘤生長和轉(zhuǎn)移。因此，靶向M2樣TAM是一種潛在的癌癥治療策略。然而，針對M2巨噬細(xì)胞的全身治療可能會抑制腫瘤組織中的TAM以及在正常過程中起關(guān)鍵作用的其他M2巨噬細(xì)胞，導(dǎo)致免疫功能低下狀態(tài)的風(fēng)險(xiǎn)增加。光動(dòng)力療法（PDT）是一種非侵入性的局部癌癥治療方法，通過聯(lián)合使用光敏劑和無害光產(chǎn)生活性氧（ROS），誘導(dǎo)膜損傷和細(xì)胞凋亡。重要的是，PDT的治療效果僅限于光治療的腫瘤區(qū)域。因此，在不影響正常巨噬細(xì)胞的情況下，局部PDT是一種很好的
VEGF-aPMNEM-ECM抗菌促愈合水凝膠2024/11/19
慢性糖尿病傷口主要由感染、炎癥和血管生成相關(guān)疾病引起。治療慢性糖尿病傷口的理想方法是結(jié)合抗感染策略、免疫微環(huán)境調(diào)節(jié)和促進(jìn)血管生成。血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）可以促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，從而促進(jìn)血管生成。然而，其穩(wěn)定性低，不能靶向病灶，限制了其應(yīng)用。多形核中性粒細(xì)胞衍生外泌體（PMNExo）具有良好的遞送特性，可用于VEGF的治療遞送，此外，它們還保留了多形核中性粒細(xì)胞（PMN）的抗菌能力。然而，低PMNExo生成阻礙了其治療應(yīng)用。本文作者YanzhenYu等采用了擠壓法制備了PMNs外泌
多功能納米顆粒包膜黃芪多糖和金納米棒聯(lián)合聚焦超聲治療乳腺癌2024/07/24
聚焦超聲（FUS）是臨床上治療腫瘤常用的非侵入性技術(shù)，能夠通過局部熱消融產(chǎn)生對癌癥的免疫刺激效應(yīng)，但是單獨(dú)使用FUS似乎不足以產(chǎn)生很好的抗腫瘤作用。為了克服這一限制，來自重慶醫(yī)科大學(xué)研究團(tuán)隊(duì)在InternationalJournalofNanomedicine上發(fā)表了MultifunctionalNanoparticlesEncapsulatingAstragalusPolysaccharideａndGoldNanorodsinCombinationwithFocusedUltrasoundfo
絲素蛋白納米粒子（FNPs）負(fù)載白藜蘆醇在炎癥性腸病治療中的療效與機(jī)制研究2024/06/28
絲素蛋白納米粒子（FNPs）負(fù)載白藜蘆醇在炎癥性腸病治療中的療效與機(jī)制研究上一期的文獻(xiàn)解讀小編為大家講解了姜黃素結(jié)合材料學(xué)治療潰瘍性結(jié)腸炎，這次為大家講解另一個(gè)在天然小分子屆被研究的很充分的藥物白藜蘆醇。白藜蘆醇抗炎抗氧化的作用已經(jīng)被眾多研究所證實(shí)，但生物利用度低是很多天然小分子化合物的通病。目前，有許多生物材料可被制造成用于藥物輸送的納米粒子。今天為大家解讀一篇來自西班牙研究團(tuán)隊(duì)發(fā)表在InternationalJournalofNanomedicine上的名為Silkfibroinnanopa
雙熒光素酶報(bào)告基因檢測2023/12/12
雙熒光素酶報(bào)告基因檢測熒光素（Luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱，其中螢火蟲熒光素F-Luciferase和海腎熒光素R-Luciferase具有代表性。研究者利用熒光素酶開發(fā)出一套極其靈敏且使用方便的基因報(bào)告系統(tǒng)。目前，雙熒光素酶通常是指螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素。這兩種酶的主要區(qū)別：1.物種來源不同；2.它們的底物和輔因子不同；3.發(fā)光的顏色不同。螢火蟲螢光素酶是一種胞內(nèi)蛋白，從甲蟲（Photinuspyralis）中分離得到，大小為61KDa。在氧氣、ATP和鎂離子
原代細(xì)胞及其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用2023/06/09
原代細(xì)胞是指從組織或器官中直接獲得的、未經(jīng)過復(fù)制或傳代的細(xì)胞，具有正常的染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)，代表了組織或器官真實(shí)的生物學(xué)特性。與之相對的是細(xì)胞系，即通過多次傳代培養(yǎng)而形成的細(xì)胞群體。相比之下，細(xì)胞更具有物理化學(xué)特性和生物學(xué)特性上的可靠性和穩(wěn)定性，因此在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中有廣泛應(yīng)用。原代細(xì)胞的主要特點(diǎn)：1、生物學(xué)特性穩(wěn)定：細(xì)胞來自體內(nèi)器官或組織，與其生態(tài)環(huán)境和細(xì)胞間相互作用密切相關(guān)，其生物學(xué)特性更為穩(wěn)定并能夠反映原始狀態(tài)。2、具有高度可塑性：細(xì)胞可以通過不同類型的分化環(huán)節(jié)轉(zhuǎn)變?yōu)楦鞣N功能細(xì)胞，具有高度可塑
細(xì)胞生物學(xué)檢測都包括哪些內(nèi)容？2023/05/09
細(xì)胞生物學(xué)檢測是一種通過對細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能以及分子水平的改變進(jìn)行檢測和研究的方法。隨著細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展，已經(jīng)成為了一個(gè)非常重要的領(lǐng)域，對于疾病的診斷、治療以及藥物研發(fā)等方面都有著舉足輕重的作用。細(xì)胞毒性檢測是檢測中的一項(xiàng)重要內(nèi)容。細(xì)胞毒性是指物質(zhì)對細(xì)胞造成的損害程度，包括細(xì)胞死亡、凋亡、細(xì)胞色素釋放等。細(xì)胞毒性檢測通常使用染色法、活性酶法、蛋白質(zhì)表達(dá)等方法來進(jìn)行，比如MTT法、CCK-8法和LDH釋放法等。除了細(xì)胞毒性檢測之外，細(xì)胞遷移和侵襲能力檢測也是細(xì)胞生物學(xué)檢測的重要領(lǐng)域。細(xì)胞遷移和侵
細(xì)胞外泌體主要來源于哪些細(xì)胞類型？2023/04/10
細(xì)胞外泌體作為一種新型的生物分子，近年來備受科學(xué)家們的關(guān)注。它是一種由細(xì)胞釋放出來的小顆粒，直徑在30-100nm之間，可以通過分泌到細(xì)胞外提供多種生物學(xué)功能。目前關(guān)于細(xì)胞外泌體研究取得了一系列進(jìn)展，本文將就此進(jìn)行詳細(xì)介紹。一、概述細(xì)胞外泌體是由細(xì)胞內(nèi)部通過分泌方式釋放到細(xì)胞外的一類小顆粒，其大小在30-100nm之間，由脂質(zhì)雙層包裹形成。細(xì)胞外泌體中含有許多重要的生物分子，如DNA、RNA、蛋白質(zhì)、代謝產(chǎn)物等，能夠在細(xì)胞間傳遞信號和調(diào)節(jié)基因表達(dá)等生物學(xué)過程。二、來源及分類細(xì)胞外泌體可來源于多種
細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)要滿足這些培養(yǎng)條件2023/03/09
細(xì)胞培養(yǎng)是一種重要的生物學(xué)技術(shù)，可以使研究人員在體外繁殖和研究細(xì)胞，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、農(nóng)業(yè)、食品工業(yè)等領(lǐng)域，成為現(xiàn)代生命科學(xué)的重要組成部分。細(xì)胞培養(yǎng)是將細(xì)胞放入一定的培養(yǎng)基中，提供適宜的培養(yǎng)環(huán)境，使其在體外繁殖和生長?；驹硎窃谝欢ǖ呐囵B(yǎng)基中提供足夠的營養(yǎng)物質(zhì)和適宜的生長條件，如溫度、濕度、氧氣、二氧化碳等，使細(xì)胞能夠不斷繁殖和生長。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，現(xiàn)在已經(jīng)可以培養(yǎng)各種類型的細(xì)胞，包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞、微生物細(xì)胞、植物細(xì)胞等。細(xì)胞培養(yǎng)需要提供適宜的培養(yǎng)條件，如溫度、濕度、氧氣、二氧化
細(xì)胞培養(yǎng)瓶有三種容量規(guī)格可選2023/02/10
一些細(xì)胞和組織可在懸浮狀態(tài)下生長,但相當(dāng)一部分哺乳動(dòng)物細(xì)胞需要表面貼壁。因此,用于提供細(xì)胞體外培養(yǎng)環(huán)境的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板和培養(yǎng)皿除了具有良好的透明度和無毒、無菌外，還需經(jīng)表面改性處理使之能夠貼壁、分裂和生長。細(xì)胞培養(yǎng)瓶瓶體設(shè)計(jì)合理，表面TC處理，適用于實(shí)驗(yàn)室中等規(guī)模細(xì)胞和組織培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)瓶是實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行長時(shí)間細(xì)胞培養(yǎng)、大量細(xì)胞擴(kuò)增和防污染的合適培養(yǎng)器皿。未處理表面適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)；TC處理表面，經(jīng)過處理后聚苯乙烯表面具有較好親水性，適用于常見細(xì)胞系的粘附和伸展；超親水處理表面屬于增強(qiáng)型表面，可以
細(xì)胞凋亡時(shí)會出現(xiàn)哪些形態(tài)學(xué)變化？2023/01/09
凋亡（Apoptosis），或者說程序性細(xì)胞死亡（Programmedcelldeath），是細(xì)胞內(nèi)建的防御機(jī)制之一，在生物的正常發(fā)育及疾病抵御中起到重要的作用。凋亡過程與通路的異常，會導(dǎo)致多種疾病，包括腫瘤。目前至少有十?dāng)?shù)種檢測細(xì)胞凋亡的方法，從大框架上講，可以劃分為基于細(xì)胞形態(tài)、生物學(xué)功能和生化標(biāo)記三大類。然而，每一種方法都有其優(yōu)缺點(diǎn)，且并非所有的方法對每一位實(shí)驗(yàn)人員來說都是實(shí)用的。細(xì)胞凋亡（Apoptosis）是細(xì)胞程序性死亡（Programmedcelldeath）的一種,由基因嚴(yán)格控制
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)中的注意事項(xiàng)2022/12/08
原代培養(yǎng)的細(xì)胞，來源于胚胎、組織器官和外周血，通過特殊的分離方法制備，稱為原代細(xì)胞。初步分離得到的細(xì)胞具有與體內(nèi)細(xì)胞相似的生物學(xué)特性，是研究生進(jìn)行與物體相關(guān)的生命活動(dòng)的理想材料。原代細(xì)胞分離培養(yǎng)是從體內(nèi)取出人/小鼠模型動(dòng)物特異性細(xì)胞，用胰蛋白酶和螯合劑(EDTA)處理，分散成單細(xì)胞，并在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使得細(xì)胞能夠存活、生長和繁殖的過程。原代培養(yǎng)是指細(xì)胞、組織和器官直接從體內(nèi)取出后立即進(jìn)行培養(yǎng)。此時(shí)的細(xì)胞保持了原細(xì)胞的基本性質(zhì)，如果是正常細(xì)胞，則仍保留二倍體數(shù)。但實(shí)際上，一代至第十代內(nèi)培養(yǎng)的
原代心肌細(xì)胞間的培養(yǎng)都有哪些抗污染措施？2022/11/09
成纖維細(xì)胞比心肌細(xì)胞更容易貼壁，具有分裂增殖能力。差異貼壁后，原代心肌細(xì)胞間中仍有少數(shù)成纖維細(xì)胞混雜，如果處理不當(dāng)，很容易長成優(yōu)勢細(xì)胞。溴脫氧尿苷(BrdU)可以干擾細(xì)胞有絲分裂，因此BrdU常規(guī)用于抑制成纖維細(xì)胞的生長。但如果用胎牛血清培養(yǎng)細(xì)胞，由于胎牛血清含有很多促有絲分裂因子，BrdU很難抑制成纖維細(xì)胞的生長。使用小牛血清可以克服這種現(xiàn)象，獲得90%以上的心肌細(xì)胞。觀察原代心肌細(xì)胞間形態(tài)時(shí)，接種密度低，貼壁心肌細(xì)胞數(shù)量減少。為了防止存活的心肌細(xì)胞隨著液體的更換而被丟棄，液體的更換應(yīng)在接種4
細(xì)胞外泌體的組成都包括什么？2022/10/12
細(xì)胞外泌體是細(xì)胞分泌的大小約為30-150nm的納米物質(zhì)，是細(xì)胞外囊泡的一類，結(jié)構(gòu)類似于細(xì)胞，磷脂雙分子層表面具有多種特異性膜蛋白，內(nèi)部搭載著多種蛋白質(zhì)、RNA、DNA等重要生物信號物質(zhì)，廣泛分布于血液、尿液、腦脊液、唾液、乳汁、膽汁等各種體液中。外泌體的來源細(xì)胞種類非常豐富，幾乎在人體血液、尿液、母乳和唾液等多種體液中都能發(fā)現(xiàn)它的蹤跡?？蓚鬟f包括DNA、RNA、miRNA、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)在內(nèi)的多種生物活性物質(zhì)，同時(shí)保護(hù)包裹的內(nèi)含物免受核酸酶和蛋白酶，以及外界壞境變化引起的降解和變性。也正是因?yàn)橥?
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