細胞膜染色試劑DiO
- 公司名稱 上海谷研實業(yè)有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產地 國產
- 廠商性質 經(jīng)銷商
- 更新時間 2022/4/21 16:01:47
- 訪問次數(shù) 603
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500μl |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X9874 | 應用領域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產品僅供科研 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
500μl | 1～3天 |
商品介紹：
DIOC16(3)PERCHLORATE 細胞膜染色試劑為綠色熒光標記的細胞膜探針，具有488 / 500nm的大激發(fā)/發(fā)射波長。 當親脂性的綠色熒光探針DIOC16(3)PERCHLORATE 進入細胞膜后，在整個細胞膜上擴散，佳濃度時可以使整個細胞膜染色。染色液DIOC16(3)PERCHLORATE在進入細胞膜之前熒光非常弱，當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強，被激發(fā)后可以發(fā)出綠色的熒光，具有很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。 熒光探針DIOC16(3)PERCHLORATE 通常不會明顯影響細胞的活力，因此被廣泛用于正向或逆向的，活的或固定的神經(jīng)等細胞或組織的示蹤劑。除了簡單的細胞膜熒光標記外，還可以用于檢測細胞的融合和粘附，檢測發(fā)育或移植過程中細胞遷移，通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散，檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。 細胞膜探針具有多種顏色可以選擇，可根據(jù)情況對樣品進行多色標記實驗。除了本試劑盒的綠色熒光探針，我公司還可以提供紅色、橙色、深紅色等顏色的染色試劑盒。 以96孔板每孔200μl染色液計，本試劑盒小包裝可以染色1000-5000個樣本。 儲存條件：染料-20℃避光保存；避免反復凍融。 有效期：六個月。 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
綠絨蒿（標準品）英文名稱： Molecular sieves, 5 ?葡萄糖轉運蛋白3抗體包裝25g
綠原(標準品）英文名稱： Kaolin凝溶膠蛋白抗體包裝5g
化兩面針堿（標準品）英文名稱： Kaolin(superfine)生長激釋放激抗體包裝1g
化木蘭花堿（標準品）英文名稱： Kaolin(superfine)膠質纖維性蛋白抗體包裝5g
化矢車菊,花青(標準品）英文名稱： Kaolin(superfine)綠色熒光蛋白（免疫組化用抗體）包裝25g
化纈草英文名稱： Kaolin(superfine)生長激受體抗體包裝5g
化血根堿(標準品)英文名稱： Kaolin腦腸肽抗體包裝1g
輪環(huán)藤根（標準品）英文名稱： Kieselguhr G糖蛋白A33抗體包裝5g
羅布麻寧；香草乙；夾竹桃麻(標準品)英文名稱： Silica gel腦腸肽抗體包裝1g
羅布麻葉（標準品）英文名稱： Silicon dioxide胰高血糖樣肽-2抗體包裝5g
羅漢果（標準品）英文名稱： SandG蛋白偶聯(lián)受體GPR114蛋白抗體包裝100g
羅漢果苷III(標準品)英文名稱： Sand膠質源性連接蛋白抗體包裝25g
羅漢果苷IV(標準品)英文名稱： Ammonium phosphate monobasic糖蛋白VI/六糖蛋白抗體包裝100g
羅漢果黃英文名稱： Dimethyl sulfoxide鳥苷還原1抗體包裝25g
羅漢果皂苷Iva英文名稱： N-N-DimethylacetamideG2期/S期應答相關蛋白1抗體包裝5g
苜蓿中華根瘤菌Sinorhizobium│meliloti 質量規(guī)格：>99%,BR前列腺D2試劑盒毛蘭;Phenol
極細鏈格孢菌Alternaria│tenuissima 質量規(guī)格：HPLC>99%,標準品前列腺A1試劑盒木通乙苷B;Calceoriosid
聚生殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質量規(guī)格：純度>99%前列環(huán)試劑盒馬兜鈴Ⅰ;Aristolochic a
細胞膜染色試劑DiO生孢梭 聚烯酸抗胰蛋白抗體Elisa
紫晶口磨 聚烯酸抗前體Elisa
蘇云金芽胞桿 聚烯酸白分化抗原4Elisa
假單胞屬 聚烯酸過氧化還原1Elisa
日本裂殖酵母 聚烯酸分泌粒蛋白1Elisa
杜氏籃狀 聚烯酸器支原體IgG抗體Elisa
地中海中慢生根瘤 維生E聚乙二琥珀酸酯序列相似家族3成員BElisa
季也蒙邁耶氏酵母 聚氯乙烯蛋白水解誘導因子;皮離蛋白Elisa
釀酒酵母 聚氯乙烯纖維蛋白原IgG抗體Elisa
布魯氏 生物Ⅰ型 聚氯乙烯纖維蛋白原IgM抗體Elisa
擬青霉 聚氯乙烯纖維蛋白原IgA抗體Elisa
綠色木霉 Amberlite® IRA-410(Cl) 離子交換樹脂泰勒蟲抗體Elisa
盤長孢狀盤孢 Amberlite IR-120陽離子交換樹脂過氧化Elisa
小腸腸球 BOC-L-環(huán)基氨酸甘露糖結合蛋白2Elisa
濟州古名氣微 二氯雙[二叔丁基-(4-二甲基氨基苯基)膦]鈀(II)L-酸Elisa
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