細(xì)菌鞭毛蛋白純化試劑盒

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

細(xì)菌鞭毛蛋白可以作為疫苗佐劑，具有重要的應(yīng)用價(jià)值。傳統(tǒng)的純化細(xì)菌鞭毛蛋白的  方法多需要使用超速離心或者層析交換，步驟非常繁瑣，使用不便，為此本公司開發(fā)了不   需要超速離心和層析交換的細(xì)菌鞭毛蛋白快速純化試劑盒。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.只有洗滌和沉淀兩步，簡(jiǎn)單快捷。

2.所得細(xì)菌鞭毛蛋白純度高，完整性好。

3.回收效率高，一般能得到相當(dāng)于總蛋白量 6%的鞭毛蛋白。

4.可用于Escherichiacoli，Salmonellatyphimurium，Salmonellatyphi，

Citrobacterfreundii等細(xì)菌。

5.本產(chǎn)品需要冷凍高速離心機(jī)。

6.本產(chǎn)品足夠 20 次細(xì)菌鞭毛蛋白純化，每次可以處理 1 L 飽和菌液。

7.細(xì)菌鞭毛蛋白純化試劑盒只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

本產(chǎn)品由一個(gè)扁盒和一個(gè)大立盒組成，大立盒包裝，常溫運(yùn)輸和保存

成分規(guī)格包裝

10×細(xì)菌鞭毛蛋白純化洗滌液250 mL250 mL 本色瓶

使用手冊(cè)1 份1 份

本產(chǎn)品由一個(gè)扁盒和一個(gè)大立盒組成，大扁盒包裝，常溫運(yùn)輸和保存

成分規(guī)格包裝

細(xì)菌鞭毛蛋白純化沉淀劑250 g×2500 mL 干粉瓶

使用手冊(cè)1 份1 份

運(yùn)輸及保存

常溫運(yùn)輸和保存，有效期一年。

自備試劑

超純水、PBS 緩沖液（pH 7.4），透析耗材。

使用方法：

1.實(shí)驗(yàn)前取將適量的10×細(xì)菌鞭毛蛋白洗滌液用自備的超純水稀釋10 倍后得到1×細(xì)菌鞭毛蛋白洗滌液，放冰上待用。

2.收集 1 L 過夜培養(yǎng)的細(xì)菌飽和培養(yǎng)液（OD600 在 0.6 左右即可），5,000×g 室溫離心 10 分鐘后棄上清。

3.在細(xì)菌沉淀中加入 200 mL 自備的 PBS 緩沖液（pH 7.4），充分混勻得到細(xì)菌重懸液。

4.5,000×g 室溫離心 10 分鐘，小心棄除上清。

5.重復(fù) 3-4 步一次。

6.在細(xì)菌沉淀中加入 50 mL 1×細(xì)菌鞭毛蛋白洗滌液，充分混勻得到細(xì)菌重懸液。

7.將細(xì)菌懸浮液轉(zhuǎn)移到 100 mL 燒杯中（或 100 mL 平底塑料平中）并放入磁力攪拌子，再將 100 mL 燒杯放到一個(gè)大燒杯（如 2 L 燒杯）中間，周邊入碎冰固定小燒杯，然后將裝有小燒杯的大燒杯放在磁力攪拌器上攪拌 30 分鐘。

8.取出攪拌子，將細(xì)菌重懸液轉(zhuǎn)移到離心管中，10,000×g 離心 20 分鐘，小心收集含有細(xì)菌鞭毛蛋白的上清液。

9.將上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè) 100 mL 干凈燒杯中并放入磁力攪拌子，再將 100 mL 燒杯放到一個(gè)大燒杯（如 2 L 燒杯）中間，周邊入碎冰固定小燒杯，然后將裝有小燒杯的大燒杯放在磁力攪拌器上緩慢攪拌。攪拌中加入細(xì)菌鞭毛蛋白純化沉淀劑 23.6 g，待沉淀劑溶解后停止攪拌，靜置 45 分鐘。期間細(xì)菌鞭毛蛋白將形成沉淀。

10.取出攪拌子，將溶液轉(zhuǎn)移到干凈離心管中，4℃下 10,000×g 離心 10 分鐘。

11.小心棄除上清，所得沉淀為細(xì)菌鞭毛蛋白。

12.由于所得細(xì)菌鞭毛蛋白含鹽，所以用戶需要采用過柱除鹽法或透析除鹽法除鹽。由于  細(xì)菌鞭毛蛋白分子量在 15-40 Kd，所以需要據(jù)此選擇合適截留孔徑的透析袋，在合適透析液（根據(jù)后續(xù)實(shí)驗(yàn)確定）中進(jìn)行過夜透析。本試劑盒不含相關(guān)試劑。

選擇我們的細(xì)菌鞭毛蛋白純化試劑盒，就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！