5-(6)-CDCFDA熒光探針

&使用方法

探針配制：

儲備液：DMSO溶解（典型濃度1–10 mM），分裝避光保存。

工作濃度：0.5–25 μM（依細胞類型和實驗時長調(diào)整）。

染色流程優(yōu)化：

孵育時間：通常15–45分鐘（避免過長致假陽性）。

洗滌步驟：PBS清洗去除未進入探針，減少背景信號。

信號干擾控制：

避光操作：全程避光延緩熒光淬滅。

死細胞排除：可聯(lián)用PI（碘化丙啶）等死細胞染料

試劑信息

英文名稱：5(6)-Carboxy-2'',7''-dichlorofluorescein Diacetate

簡稱：5-(6)-CDCFDA熒光探針

中文名稱：5[6]-羧基-2',7'-二氯熒光素二乙酸酯

CAS NO：127770-45-0

分子式：C25H14Cl2O9

分子量：529.28 g/mol

狀態(tài)：白色固體

激發(fā)波長：504nm

發(fā)射波長：529nm

溶解性： 溶于DMSO

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥

&作用機制

5-(6)-CDCFDA熒光探針的作用依賴于細胞代謝活性和膜完整性，具體機制分三步：

1. 細胞滲透與酯酶水解

穿透細胞膜：探針以非極性形式自由擴散進入活細胞（死細胞因膜破損無法積累）。

酶促活化：胞內(nèi)非特異性酯酶水解乙酰基，生成帶負電荷的熒光產(chǎn)物 5-(6)-carboxy-2',7'-dichlorofluorescein（羧基二氯熒光素）。

關(guān)鍵點：水解過程依賴酯酶活性，直接反映細胞代謝狀態(tài)。

2. 熒光滯留與信號檢測

水解產(chǎn)物因羧基帶負電，無法穿透完整細胞膜，僅在活細胞內(nèi)積累（死細胞熒光泄漏）。

熒光強度與活細胞數(shù)量/活力正相關(guān)，可通過流式細胞術(shù)或熒光顯微鏡定量。

3. 多功能擴展應(yīng)用

活性氧（ROS）檢測：二氯取代基增強抗氧化性，熒光強度變化可間接反映ROS水平。

pH傳感：pKa ≈ 4.8，在酸性環(huán)境中熒光增強，適用于細胞器pH監(jiān)測。

生物學意義：該探針同步評估細胞活力雙指標——酶活性（代謝功能）和膜完整性（結(jié)構(gòu)完整），優(yōu)于單一參數(shù)檢測方法（如臺盼藍）。

&相關(guān)試劑

CalceinRed,AM鈣黃綠素紅(紅色)

SYTOX Green Nucleic Acid Stain

YOYO 3 Far-red Fluorescent Dye

YOYO 1 Green Fluorescent Dye

Lucifer Yellow CH dipotassium salt

Mag-520 Potassium Salt 鎂離子熒光探針

Rhod-2,AM,Cell Permeant 鈣離子熒光探針

Fluo-4?Pentapotassium?Salt Fluo-4五鉀鹽

BMPO(Spin trapping reagent) 自旋捕獲劑

西安強化生物科技有限公司xxn對以上內(nèi)容進行了系統(tǒng)整理！

本試劑用于科研領(lǐng)域，其他用途概不適用！